小麦粒重基因TaGW2-6A等位变异的高通量分子检测     

寇程  李学军  高欣  吕千  杜登峰  程显  李扬  李立群 《麦类作物学报》2015,35(11):1467-1475

为了开发出一种高通量的TaGW2-6A基因等位变异分子检测技术,利用高分辨率熔解曲线分析技术(High resolution melting curve analysis,HRM)检测了316份小麦材料的TaGW2-6A基因编码区T碱基插入等位变异以及启动子区Hap-6A-A(-593A和-739G)和Hap-6A-G(-593G和-739A)等位变异,同时利用桑格测序和Hap-6A-P1/P2分子标记验证HRM的分析结果。结果表明,HRM技术能够准确、高效的检测TaGW2-6A基因的等位变异。在316份材料中,检测到61份T碱基插入等位变异材料(命名为TT基因型)和255份无T碱基插入的等位变异材料(命名为tt基因型);其中,189份为Hap-6A-A单倍型材料,127份为Hap-6A-G单倍型材料。  相似文献   

铜在虾夷扇贝鳃和肝胰腺中的累积及对抗氧化酶、脂代谢的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

孟晓林  田雪  郭倩倩  黄建蓉  卢荣华  梁俊平  李学军  孔祥会  聂国兴 《水产学报》2015,39(6):908-915

为了解铜在虾夷扇贝鳃和肝胰腺中的累积规律及对抗氧化酶、脂代谢的影响,以不同浓度的铜分别对虾夷扇贝暴露0、1、3、6、10及14 d,检测铜在鳃、肝胰腺组织中的累积量及对抗氧化酶SOD、CAT及GPx活性的影响,并通过高通量测序手段,分析72 h胁迫时,高浓度铜对肝胰腺组织脂代谢关键调控因子的影响。结果表明:0.025 mg/L胁迫组在鳃中的最高累积出现在第14天(347.55 μg/g),0.05和0.10 mg/L胁迫组最高累积均出现在第6天(340.72和 302.30 μg/g),整体随时间呈曲线变化关系,而肝胰腺组织中,高浓度(0.10 mg/L)组累积随时间呈线性关系,最高为第14天(60.88 μg/g),中低浓度(0.025和0.05 mg/L)组随暴露时间的延长均呈曲线变化关系;鳃组织各抗氧化酶在胁迫期内均被显著性抑制,肝胰腺组织中,除0.05 mg/L胁迫组对GPx酶活性24 h时显著抑制外,0.025和0.05 mg/L胁迫浓度在24 h内均可诱导抗氧化酶显著表达,但随胁迫期的延长逐渐降低,0.10 mg/L胁迫组各酶活性在胁迫期内被显著性抑制;高浓度组(0.10 mg/L)胁迫72 h后,虾夷扇贝肝胰腺脂代谢关键调控因子PPARs-γ2、6PGD、G6PD、FAS、LDH与对照组相比均显著上调,而ACC、CPT1与对照组相比,虽然存在差异表达,但不显著。实验表明,鳃是虾夷扇贝铜的主要蓄积部位,肝胰腺组织对铜的累积不存在浓度依赖性关系,对高铜胁迫累积反应较为敏感,同时与镉对虾夷扇贝的毒性相比,铜的毒性作用更强,对虾夷扇贝抗氧化防御系统的破坏性更大,并且在高浓度急性胁迫条件下,铜可以促进肝胰腺的脂质合成代谢,诱发脂肪的累积。  相似文献   

复方中草药制剂对中华鳖生长、体组成及血清指标的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

马晓  王璐明  王晓清  李学军 《水产科学》2016,(2):147-151

将初始体质量为(3.28±0.15)g的中华鳖稚鳖分为4组,每组设3个重复,分别投喂添加0%、0.5%、1%、2%复方中草药的试验饲料60d,研究复方中草药对中华鳖生长、体成分和某些血清指标的影响。试验结果显示,各组间成活率无显著差异(P0.05)。1%添加组中华鳖的体质量增加率最高,显著高于对照组(P0.05),与0.5%和2%添加组无显著差异(P0.05)。1%添加组中华鳖的肝体比最低,2%添加组中华鳖的脏体比最低。随着中草药添加量的升高,中华鳖的体蛋白含量显著升高(P0.05),灰分含量显著降低(P0.05)。复方中草药添加量对中华鳖体水分和粗脂肪无显著影响(P0.05)。1%与2%复方中草药组鳖体总氨基酸、必需氨基酸以及鲜味氨基酸高于对照组。中华鳖血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶含量随中草药含量升高而显著降低(P0.05),各组中华鳖血清甘油三酯、总胆固醇含量及碱性磷酸酶活性无显著差异(P0.05)。试验结果表明,添加复方中草药能提高中华鳖的生长性能,添加量以1%为宜。  相似文献   

蛹虫草常用菌种选育技术   总被引：1，自引：0，他引：1  

张俊涛  李亚洁  温志新  李学军  石理鑫  米锐  孟楠  孙永新 《食用菌》2010,32(3):20-21

<正>蛹虫草(Cordyceps militaris)又称北虫草,北冬虫夏草,是我国的一种兼具食用和药用价值的优质珍贵大型真菌。蛹虫草的化学成分和药理活性研究结果表明[1],[2],其子座除了富含蛋白质、氨基酸、维生素及钙、锰、锌、硒等微量元素外.还含有虫草素、虫草酸、过氧化物歧化酶(SOD)等生物活性物质,具有增强动物机体免疫力、抗肿瘤、抗辐射、降血糖、降血脂、抗  相似文献   

美洲斑潜蝇生物学特性研究   总被引：6，自引：1，他引：5  

刘世栋  李学军 《辽宁农业科学》1998,(4):19-23

通过１９９６年３月至１９９７年１２月采取室内、外和温箱饲养、结合田间定点、定时调查等方法,对美洲斑潜蝇与发生规律密切相关的生物学特性进行了研究。明确了美洲斑潜蝇的卵、幼虫、蛹、成虫产卵前期和世代的发育起点、有效积温分别为１４．６３、１１．９４、１３．６４、１６．５０、１３．６９℃和４０．５８、５９．７３、１０２．１９、１５．３８、２０３．０６℃;该虫生活史,在辽宁省一年发生１２代以上完成一个世代一  相似文献   

金鱼胚胎发育过程中免疫相关酶活性及丙二醛含量的变化     

孔祥会  王书平  江红霞  聂国兴  李学军 《中国水产科学》2011,18(6)

以金鱼(Carassius auratus)胚胎为研究对象,于受精卵发育24 h时开始取样,以后每隔24 h分别取正常发育胚胎作为实验样品.采用生物化学方法分别测定金鱼胚胎发育不同时期溶菌酶和过氧化氢酶活性及丙二醛含量.结果显示,溶菌酶(lysozyme,LSZ)活性在金鱼胚胎发育过程中呈现下降的趋势,受精后96 h胚胎中LSZ活性降至最低点,为(0.450±0.064) U/mg; 96 h和以后的120 h、144 h胚胎LSZ活性均显著低于24 h胚胎LSZ活性(P＜0.05).过氧化氢酶(catalase,CAT)活性在胚胎发育过程中也呈现下降的变化趋势,96 h、120 h和144 h胚胎CAT活性显著低于24 h胚胎CAT活性(P＜0.05).而丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量在胚胎发育中呈逐渐增多的趋势,96 h后明显增多,120 h和144 h胚胎MDA含量显著高于24 h胚胎MDA含量(P.＜0.05).金鱼胚胎发育过程中LSZ和CAT活性逐渐降低是由于这两种母源性的酶在胚胎发育中逐步消耗,而自身酶合成系统尚未形成所致.CAT活性降低导致活性氧自由基增多和MDA逐渐积累,说明胚胎发育后期细胞内已发生一定的氧化应激反应.  相似文献   

日本沼虾血清淀粉样蛋白A(SAA)基因的克隆及其免疫功能     

江红霞  林鑫辉  李书凯  王洁琛  李学军 《水产学报》2020,44(2):300-313

为探索血清淀粉样蛋白A(SAA)在日本沼虾免疫防御系统中的作用,实验利用RACE方法克隆了日本沼虾SAA(MnSAA)基因cDNA全长序列,采用实时荧光定量PCR(QPCR)分析其在日本沼虾不同组织、不同发育时期的表达情况,以及溶壁微球菌、嗜水气单胞菌和白斑综合征病毒(WSSV)感染后MnSAA在血淋巴细胞和肝胰腺中的表达情况,同时还利用RNA干扰(RNAi)技术检测了MnSAA基因沉默后,日本沼虾再感染嗜水气单胞菌后其肝胰腺中激活子蛋白-1(AP-1)和B类清道夫受体(CD36)基因表达变化及虾的累积死亡率变化。结果显示,M n S A A基因c D N A全长649 b p(G e n B a n k登录号:MK292888),包含21 bp 5′非编码区,232 bp 3′非编码区,369 bp开放读码框,编码131个氨基酸残基;氨基酸序列比对及系统进化分析结果显示,MnSAA蛋白属于急性期血清淀粉样蛋白A蛋白(A-SAA),在进化上与无脊椎动物香港牡蛎的亲缘关系最近;mRNA表达分析显示,MnSAA基因在日本沼虾的各组织和各生长阶段均有表达,分别在肝胰腺和成虾阶段中的表达量最高;病原体感染实验表明,在日本沼虾感染溶壁微球菌、嗜水气单胞菌和白斑综合征病毒后12~72 h,其血淋巴和肝胰腺中的MnSAA基因表达量与对照组相比均显著升高;RNAi实验显示,MnSAA基因沉默后,日本沼虾肝胰腺中AP-1和CD36基因分别在其感染嗜水气单胞菌后12~72 h和6~72 h与对照组相比显著下降,日本沼虾累积死亡率在感染嗜水气单胞菌后与对照组相比明显升高。研究表明,MnSAA参与日本沼虾的抗病原体感染的反应,在日本沼虾的免疫防御体系中具有重要的作用。  相似文献   

中华鳖Gper基因克隆、表达及其在精巢中的功能     

岑双双  马晓  刘倩  王璐明  张超  吴利敏  刘慧芬  李学军 《中国水产科学》2020,27(8):868-878

G蛋白偶联雌激素受体（Gper）是一种膜雌激素受体,介导雌激素的非基因组途径。为研究G蛋白偶联雌激素受体基因（ cDNA全长序列,利用qRT-PCR分析其在不同组织及胚胎不同发育阶段的性腺中的表达模式,并通过来曲唑（letrozole）和Gper抑制剂G-15处理雄鳖初步分析Gper在精巢中的作用。结果显示,中华鳖 cDNA序列全长2023 bp,包含705 bp 5''非编码区、241 bp 3''非编码区和1077 bp开放阅读框,编码358个氨基酸,其氨基酸序列上有7个跨膜结构域和Asp-Arg-Tyr（DRY）三联体结构,基因编码蛋白分子量为41.084 kD,等电点为6.844。表达量变化呈相同趋势：16期表达量最高,随着性腺分化过程表达量显著降低。Letrozole处理组中2表达量明显升高;G-15处理组精巢中,精子发生与促细胞凋亡相关基因表达量显著升高。结果表明,可能参与中华鳖性腺分化早期过程,并调控雄性生殖细胞增殖。  相似文献   

神奇杀星对致病性大肠杆菌的药敏试验     

王尚荣  李学军 《当代畜牧》2006,(4):38-39

采用不同抗菌素与神奇沙星对比,对致病性大肠杆菌C83902(O8:K87,K88ac)和44499[O139:K82(B);H1]进行药敏试验,并查明神奇沙星的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度,为在临床上正确应用神奇沙星等抗菌药物提供理论依据。选取普通营养琼脂平板6枚,分2组。一组检测C83902,另一组检测44499。选用的抗菌素为氯霉素、庆大霉素、土霉素钙盐(粉剂)、敌菌净、痢特灵、神奇沙星与土霉素钙盐等量混合液。结果表明,对致病性大肠杆菌C83902最敏感的药物是神奇沙星,其次是庆大霉素和神奇沙星与土霉素钙盐等量混合液,再次是氯霉素。对致病性大肠杆菌44499最敏感的药物是神奇沙星和氯霉素,其次是庆大霉素和神奇沙星与土霉素钙盐等量混合液,敌菌净对两种细菌均不敏感。因此,神奇沙星是防治仔猪黄、白痢及禽类大肠杆菌病的首选药物,其次是庆大霉素和氯霉素;对致病性大肠杆菌C83902杀灭效果最好的是神奇沙星,3.125μg/mL即可将全部菌杀死。对菌种44499杀灭效果最好的也是神奇沙星,杀菌浓度为3.125μg/mL。  相似文献   

生物操纵对常见底栖丝状绿藻的控制研究     

张怡光  张曼  李玫  吕绪聪  张银鹏  李昊钰  赵慧  鲁雨果  秦岩  李学军 《水生态学杂志》2024,45(3):112-120

为探究安全高效调控丝状绿藻生长的解决方法,本研究开展了两次生物操纵实验。首先研究了耳萝卜螺（Radix auricularia）、子陵吻鰕虎鱼子陵吻虾虎鱼（Rhinogobius giurinus）、中华鳑鲏（Rhodeus sinensis）和日本沼虾（Macrobrachium nipponense）对底栖丝状绿藻—水绵（Spirogyra sp.）的控制效果,结果表明,中华鳑鲏处理组的固着态水绵生物量从实验前期的90g/m2下降到实验末期的34 g/m2,相对于其它生物操纵对象,中华鳑鲏对浮游态和固着态水绵抑制效果尤为显著。进而,我们深入探讨了中华鳑鲏对多种底栖丝状绿藻,包括水绵、水网藻（Hydrodictyon reticulatum）、刚毛藻（Cladophora sp.）生长的抑制效果。结果表明,鳑鲏处理组中,固着态水绵生物量（146 mg/m2）显著低于对照组（8423mg/m2）,固着态水网藻生物量（49mg/m2）略低于对照组（56mg/m2）,固着态刚毛藻生物量（486mg/m2）也低于对照组（1516mg/m2）,结果进一步表明支持中华鳑鲏对水绵、水网藻、刚毛藻均存在一定的抑制效果,其中对水绵抑制效果具有显著性。中华鳑鲏在抑制底栖丝状绿藻生长的同时对水体中浮游植物和浮游动物造成的影响并不显著,表明作为控制丝状绿藻的潜在生物操纵对象具有很好的应用前景。  相似文献