澳洲鳗鲡微卫星分子标记的筛选与检测   总被引：3，自引：0，他引：3  

龚小玲  李思发  蔡完其  杨琴玲  王浩 《中国水产科学》2009,16(1)

采用小片段克隆法构建了澳洲鳗鲡(Anguilla australis)的部分基因组文库,并用地高辛标记的(CA)15作探针筛选阳性克隆,共获得76条微卫星序列.其中10次以下CA连续重复序列占83.67%,没有检测到30次以上的连续重复序列.根据微卫星序列两端足够长的侧翼序列,设计引物55对,选择合成引物26对,用澳洲鳗鲡3个个体的混合基因组进行引物筛选,其中的18对具有清晰的扩增条带.将筛选出的18对引物对澳洲鳗鲡1个群体的40个个体进行了遗传多样性分析,其中1对引物扩增产物为单态,17对扩增产物呈现多态;17对扩增多态的引物在40个个体中扩增出等位基因数目为5～14,平均为9个.该澳洲鳗鲡群体的PIC、Ho、He的平均值分别为0.715 7、0.677 9、0.7374,所有位点均符合哈迪-温伯格平衡(P=0.05),结果证明这17个微卫星位点适于澳洲鳗鲡群体结构的研究分析.[中国水产科学,2009,16(1):133-138]  相似文献   

[4]耐盐罗非鱼育种回交效应评估     

刘于信  李思发  蔡完其  李腾云  莢金华  张艳红 《中国水产科学》2009,16(3)

尼罗罗非鱼肝cDNA文库的构建     

何学军  李思发 《上海海洋大学学报》2005,14(4):353-358

用Stratagene技术构建了吉富品系尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus,GIFT strain)肝cDNA文库。首先用TRIZOL法提取肝总RNA,经琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度检测,表明总RNA纯度高且完整性良好。然后分离纯化mRNA,合成双链cDNA之后,加EcoRⅠ接头、EcoRⅠ末端磷酸化、XhoⅠ消化,并用葡聚糖凝胶柱层析分级收集cDNA样品,得到300 mg cDNA,符合建库要求。双链cDNA与Uni-ZAP XR Vector连接后,用GigapackⅢGold Packaging Extract进行体外包装得到cDNA文库。测得的文库滴度为1.25×107pfu/mL,文库噬菌体的滴度符合文库保存和筛选实验的要求。随机挑选20个阳性单克隆噬菌斑进行PCR鉴定后,得出文库的重组率达100%,扩增出的片段主要集中在0.5~2 kb之间,平均插入片段长度约为1.05 kb,结果说明本实验所构建的cDNA文库质量较高。取扩增文库80μL进行体外切割,约含3.6×106个重组子,切割后phagemid量为2.0×106,切割效率为79.4%。经抽提质粒获得质粒DNA约1.2 mg。  相似文献   

筛选法提高罗非鱼苗种雄性率效果的初步研究     

于爱清  王兵  张志允  李思发  蔡完其  陈辉崇  简伟业 《内陆水产》2011,(2)

取新吉富罗非鱼苗为材料,广式鱼筛为主要工具,以经过一筛、二筛和三筛处理的为试验组,甲基睾丸酮处理、既不筛选也不甲基睾丸酮处理的为对照组,研究筛选法提高尼罗罗非鱼苗种雄性率的效果。结果表明,平均每筛可提高雄性率7.9%,三筛后雄性率达91.4%,较无处理组(67.7%)提高23.7个百分点,较甲基睾丸酮处理组(98.8%)低7.4个百分点,但结果已相对比较理想,如对筛选工具和工艺予以完善,相信可以满足养殖生产、食品安全和环境保护的要求。  相似文献   

尼罗罗非鱼♀×萨罗罗非鱼♂杂交F1亲本分析     

郭金涛  赵金良  颜标  唐首杰  李思发  范武江  叶卫  符云  陈辉崇 《广东农业科学》2012,39(21):144-147

为查明在广州罗非鱼良种场获得的第一批尼罗罗非鱼♀(Oreochromis niloticus)×萨罗罗非鱼♂(Sarotherodonmelanotheron)杂交F1群体的亲本信息,以原杂交试验中的亲本群体及杂交F1为对象,利用微卫星标记和基因重组法推测F1的亲本数目。结果发现:86对微卫星引物中有74对稳定扩增;筛选出14对在尼罗罗非鱼♀和萨罗罗非鱼♂中存在不同等位基因的引物,对杂交F1进行扩增,发现尼罗罗非鱼♀与萨罗罗非鱼♂的等位基因在F1中均结合为杂合基因型,证实杂交F1为真杂交种;应用基因型重组法根据各位点在F1中的基因型,对比其亲本群体的特异等位基因,推测F1中各位点的等位基因是来自于母本或父本,进而判断F1真实有效的父母个体的等位基因,推测出最小的有效亲本数目为一雌一雄,表明F1可能互为全同胞,为尼萨罗非鱼杂交种的进一步选育提供了基础资料。  相似文献   

2011年广东罗非鱼产业发展现状分析     

储霞玲  曹俊明  白雪娜  万忠  李思发 《广东农业科学》2012,39(8):12-14

介绍了国内外罗非鱼发展概况,并从产量、区域分布、进出口情况、存在问题等方面介绍了广东罗非鱼产业发展现状,在分析2011年广东罗非鱼业价格变化的基础上预测2012年罗非鱼价格走势,最后提出广东罗非鱼业发展的对策建议,以期为全省乃全全国的罗非鱼产业的发展提供参考.  相似文献   

贯彻《水产苗种管理办法》开创种苗工程新局面(连载二)     

李思发 《中国水产》2005,(6)

三、对《水产苗种管理办法》当前贯彻重点的建议1、切实保护种质资源种质资源是我国水产养殖发展的战略资源,是苗种科技创新的基础,谁掌握了品种资源,谁就掌握了水产养殖业创新的主动权。我国有着丰富的水生动植物种质资源,有海水鱼类1600余种,淡水鱼类800余种,是打造世界水产养殖大国的物质基础。要实现水产良种工程,必须从源头上做起,即加强对种质资源的保护、开发和合理利用,切实保护好天然种质资源。由于工业污染、水利建设及过度捕捞,水产生物资源不仅在量的方面遭到了前所未有的破坏,而盲目引种、移种,盲目的人工放流放养以及天灾人祸…  相似文献   

吉奥罗非鱼(新吉富罗非鱼♀×奥利亚罗非鱼♂)和4个近缘遗传型罗非鱼的遗传差异的RAPD、SSR比较分析          下载免费PDF全文

李思发  陈林  蔡完其 《水产学报》2008,32(5)

以1个新型杂交鱼-吉奥罗非鱼(新吉富罗非鱼♀×奥利亚罗非鱼♂)群体,4个近缘遗传型罗非鱼群体[奥尼(尼罗罗非鱼♀×奥利亚罗非鱼♂)、新吉富罗非鱼、尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼]为实验材料,采用RAPD和SSR技术,比较分析这两个杂交种间及它们同亲本间的遗传差异.RAPD方面:①群体多态座位比例(P)-吉奥(20.4%)>新吉富(18.5%),但<奥利亚(21.4%)<奥尼(21.7%)<尼罗(22.3%);②Nei'S平均遗传相似系数(Ip)-吉奥(0.9086)<新吉富(0.9231),但>奥利亚(0.8895)>尼罗(0.8588)>奥尼(0.8069);③香农多样性指数(Ha)-吉奥(0.1326)>新吉富(0.1103),但<奥利亚(0.1514)<尼罗(0.1742)<奥尼(0.2410);④群体两两间遗传相似系数(Ipop)-吉奥-奥尼(0.9444)<吉奥-尼罗(0.9496)<吉奥-新吉富(0.9544),但>吉奥-奥利亚(0.9383).SSR方面:①平均有效等位基因数(Ne)-吉奥(2.43)>新吉富(2.31)>尼罗(1.94)>奥利亚(1.18),但<奥尼(2.82);②平均遗传杂合度(H)-吉奥(0.700)>尼罗(0.570)>奥利亚(0.497)>新吉富(0.398),但<奥尼(0.816);③群体的多态信息含量(PIC)-吉奥(0.661)>尼罗(0.568)>奥利亚(0.513)>新吉富(0.420),但<奥尼(0.692);④依据遗传距离构建的NJ树和UPGMA树,奥利亚罗非鱼单独为一支,吉奥等4种罗非鱼为一支.总的说来,RAPD和SSR两种技术检测结果所反映的群体遗传信息一致.这表明,无论是吉奥还是奥尼,两个杂交种在遗传上都同各自的母本较近,这同作者先前揭示的形态和生长等方面的母本效应一致.  相似文献   

白斑狗鱼和黑斑狗鱼遗传关系初步研究     

李思发  乔德亮  凌去非  王成辉 《上海海洋大学学报》2004,(2):97-102

运用RAPD技术,研究了分布于额尔齐斯河流域的白斑狗鱼(Esox lucius)和黑龙江流域的黑斑狗鱼(Esox reicherti)的遗传关系。结果表明:(1)运用筛选的34个有效引物,在自斑狗鱼群体内共扩增出谱带257条,其中多态性带130条,平均每个引物扩增谱带7.56条,多态座位比例为50.58％;在黑斑狗鱼群体内共扩增出谱带267条,其中多态性带135条,平均每个引物扩增谱带7.85条,多态座位比例为50.56％。两种狗鱼间多态座位比例差异不显著(P>0.05)。(2)引物S68在黑斑狗鱼群体内扩增出1943bp单态片段,但在白斑狗鱼群体内没有出现,故认为引物S68扩增的1943bp片段可作为区别这两种狗鱼的遗传标记。(3)在两种狗鱼间,遗传相似度是0.8090,遗传距离是0.0125;在种内个体间,遗传相似度白斑狗鱼是0.8171,黑斑狗鱼是0.8213,遗传距离分别是0.1829和0.1787,香农氏遗传多样性指数分别是0.1236和0.1241,三个指标的种间差异均不显著(P>0.05)。  相似文献   

绍兴中华鳖原种场原种生产技术操作规程   总被引：2，自引：0，他引：2  

童加潮  袁声明  马东标  胡国祥  林志定  李思发 《水产科技情报》1997,24(5):215-216

绍兴中华鳖原种场原种生产技术操作规程童加潮袁声明（浙江省水产局，杭州３１０００７）马东标胡国祥林志定（浙江绍兴中华鳖集团有限公司，绍兴３１２０６９）李思发（农业部水产增养殖生态、生理重点开放实验室，上海水产大学，上海２０００９０）中华鳖（Ｔｒｉｏｎ...  相似文献