牛支原体、无乳支原体和丝状支原体丝状亚种小克隆三重PCR检测方法的建立及初步应用   总被引：3，自引：0，他引：3  

李大伟  黄灿平  张彦明  谢建华  冉智光  熊仲良  范伟兴 《畜牧兽医学报》2011,42(2)

本研究旨在建立一种可一次性区分牛支原体、丝状支原体丝状亚种小克隆和无乳支原体的三重PCR诊断方法,为临床诊断和流行病学调查提供可靠检测技术.根据GenBank发表的上述3种病原的基因组序列保守区域设计3对特异性引物建立三重PCR方法;确定其检测敏感性,以猪支原体、鸡支原体、无乳支原体和丝状支原体丝状亚种小克隆基因作模板检验其特异性;同时和病原分离鉴定结果对比其准确性.结果表明在优化体系和条件下能够同时得到扩增长度为448、549、375 bp 3条特异性片段,未扩增出猪、鸡支原体模板特异性片段;其敏感性(可检测到的最小模板DNA含量)为0.8 ng·μL-1;36份临床样品检测结果显示,三重PCR检测结果与分离培养鉴定方法一致,均能鉴定出牛支原体阳性病料.本研究建立的三重PCR诊断方法能够一次性鉴别3种支原体,具有高敏感性、特异性和准确性,可用于临床诊断和流行病学调查.  相似文献   

规模猪场仔猪腹泻病的诊断与防制     

曾政  曹芸  凌洪权  谢建华  蔺露  熊仲良 《中国猪业》2012,(5):34-35

2010年以来,华东地区出现了大面积的仔猪腹泻病．部分省份的仔猪发病率高达87％．其主要病原为猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒。2012年1月,重庆长寿区一规模猪场暴发严重的仔猪腹泻病．仔猪多在吃初乳后1天左右发病．出现水样腹泻、呕吐、脱水等症状。发病率高达70％,病死率达90％。经血清学和病原学诊断,该病主要由猪流行性腹泻病毒和猪A群轮状病毒引起,并伴发了大肠杆菌病和Kobu病毒病。  相似文献   

大肠杆菌K88ac基因工程菌苗预防仔猪黄、白痢的效果观察     

彭合田  汪德珍  梁开烈  鲁舟文  赵应其  邱才能  宋鸣  王勋珍  卢光涛  骆益民  熊仲良  向仲荣  杨惠 《中国预防兽医学报》1991,(4)

为预防新生仔猪黄痢和白痢,我们应用大肠杆菌 K88ac 基因工程菌苗,先后在重庆市11个区、县的37个乡、镇衣户和一个种猪场的母猪进行免疫接种,观察预防效果。现将结果报道于后。  相似文献   

PCV2 WH株人工感染断奶仔猪复制多系统衰竭综合征     

吴胜昔  ;梁望旺  ;徐斌  ;曾政  ;蔺露  ;董春霞  ;熊仲良 《广西农业科学》2014,(5):864-869

[目的]建立猪圆环病毒2型（PCV2）WH株人工感染断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的动物模型,为探讨PCV2的致病机理及疫苗免疫效果评价奠定基础.[方法]将PCV2 WH株通过颈部肌注和滴鼻感染PCV2抗体阴性的7周龄仔猪,攻毒后第4、7d用钥孔血蓝蛋白（KLH）进行刺激,第7、11 d再腹腔注射巯基乙酸,同时设阴性对照组（单独KLH刺激）.攻毒后第35 d扑杀所有试验猪,观察其组织病变,并取肺脏、淋巴结组织提取病毒DNA,用PCR检测PCV2;取试验猪的肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、淋巴结、心脏、膀胱等组织制作石蜡切片,进行HE染色和免疫组化分析.[结果]攻毒组仔猪的临床症状主要表现为发热、消瘦、被毛粗乱、皮肤苍白;攻毒后第35 d扑杀所有试验猪,剖检发现阴性对照组未出现病理变化,而攻毒组仔猪有明显病理变化,从其病变的肺脏、淋巴结、肾脏、脾脏、肝脏、心脏组织中均能检测到PCV2.HE染色结果显示,组织病理学变化主要为间质性肺炎、淋巴细胞缺失、间质性肾炎、肝脏肝窦单核巨噬细胞增生.免疫组化分析结果显示,肺脏支气管上皮细胞呈明显阳性,部分肺泡巨噬细胞可见阳性信号,主要位于胞浆内;肠系膜淋巴结均出现较强阳性信号,主要位于淋巴细胞的胞浆内;肾间质细胞呈明显阳性.[结论]用PCV2WH株攻毒联合KLH和巯基乙酸反复刺激断奶仔猪能成功复制出PMWS,为后续PCV2疫苗的免疫效果评价及PMWS发病机理研究提供了理想的动物模型.  相似文献   

重庆市部分地区牛病毒性腹泻／粘膜病血清流行病学调查   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨泽林  冉智光  曾政  黄诚  熊仲良  苏承忠  郭利敏  米自由 《畜牧市场》2009,(10):28-29

为了解牛病毒性腹泻／粘膜病（BVD／MD）的流行情况,从重庆市辖区内11个区县（自治县）采集奶牛、黄牛、水牛血清共;369头份,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测BVD／MD抗体。结果从9个区县（自治县）检测出阳性样品,阳性率介于8．33％～50．00％之间,总阳性率为22．49％;规模奶牛场、散养奶牛、散养黄牛、散养水牛的阳性率分别为42．16％、9．62％、21．31％、9．76％。提示该病在我市各种牛群中存在,污染较广,应引起重视。  相似文献   

山东和河南及重庆产金银花中绿原酸含量的研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

武煊  黎晓敏  熊仲良  丁平  苏亮 《西南大学学报(自然科学版)》2006,28(3):436-438

用HPLC法测定山东、河南、重庆产金银花中绿原酸的含量。以绿原酸标准品为参照物,甲醇∶0.4%磷酸水溶液(30∶70)为流动相,流速:0.8 mL/m in,运行时间:30 m in,检测波长:245 nm。结果表明:山东产金银花中绿原酸含量为50.248±0.487 1 mg/g,河南为49.900±0.535 2 mg/g,重庆为49.418±0.801 2 mg/g。经方差分析显示F=2.236(P>0.05),说明山东、河南、重庆产金银花中绿原酸含量无显著差异。  相似文献   

如何提高省级饲料兽药实验室的检测能力     

陈军  郭利敏  熊仲良  苏亮  丁平  武煊 《畜禽业》2007,(4):21-23

<正>功能齐全、保障有力的饲料监测体系,对发现和处理各种饲料安全问题,使饲料中常见的违禁药品、兽药、农药等有毒有害物质得到安全、有效的监控;对打击假冒伪劣兽药、饲料,保证畜产品安全,保障人民身体健康,对提高养殖效益,促进畜牧业的可持续发展,带动整个农业经济的发展都具有重要意义。  相似文献   

现代技术在中药指纹图谱中的应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

武煊  黎晓敏  苏亮  丁平  熊仲良 《畜禽业》2006,(2):42-44

中药指纹图谱对中药材及其制剂质量的全面控制是中药走上现代化道路标志。本文就近年来红外光谱、核磁共振谱、薄层层析色谱、高效液相色谱、高效毛细管电泳、气相色谱、色谱联用技术、高速逆流色谱、x-射线衍射及DNA技术等现代技术在建立中药指纹图谱中的应用做一综述。  相似文献   

开展实验室认证认可,提升动物疫病检测能力     

孙燕  范首君  熊仲良  蔺露  汪子淳  骆璐  梁望旺 《中国动物检疫》2017,34(1):65-67

本文介绍了实验室认证认可制度的发展现状及主要内容,论述了实验室认证认可工作对于提高实验室的质量管理水平及促进畜牧产业和社会发展的重要意义,着重分析了动物疫病检测实验室通过实验室认证认可对人员培训管理、检测设施设备、环境条件及检测结果质量的保障等方面的提升作用。  相似文献   

羊屠宰环节布鲁氏菌病检疫漏检的初步定量风险评估     

王君玮  赵格  雷宇平  熊仲良  盖文燕  谢建华  王治维  李岩  王玉东  王娟 《中国动物检疫》2017,34(9):31-36

[目的 ]评估屠宰环节布鲁氏菌病漏检对屠宰从业人员和消费环节羊肉消费者的潜在健康风险及其干预措施。[方法 ]利用屠宰环节肉品风险评估专项监测中的定量监测数据,以及文献检索数据、专家咨询和调研结果,采用@RISK软件,分析估计屠宰环节布鲁氏菌病检疫漏检情况下的感染人数和消费者因烹调不当发生布鲁氏菌感染的风险。[结果 ]构建了屠宰环节布鲁氏菌病漏检感染风险模型。假设接触漏检羊感染布鲁氏菌病的概率为20%,那么0.001%、0.08%、1.5%三种漏检概率可能导致的感染人数分别为0~4人、0~114人和7~1 829人(90%置信区间);不同接触感染概率的感染人数有较大差异:5%概率时每年有0~541人可能感染布鲁氏菌病;60%概率时,多数情况下有155人感染布鲁氏菌病,最多可达到6 473人。应用该模型对某省居民消费漏检布鲁氏菌病羊肉后新增布鲁氏菌病感染人数的估算结果表明:按照0.1%概率计算,该省2016年度屠宰313.25万只羊可能新增布鲁氏菌病感染病例111~148例(90%置信区间)。如果因厨房生熟不分、烹调不当等因素而使感染概率提高至1%,则可能出现1 234~1 352个新增病例。[结论 ]羊屠宰环节存在布鲁氏菌病检疫漏检现象,从业人员受布鲁氏菌病感染风险较高;消费环节存在因烹调不当而导致的布鲁氏菌病感染风险;应加强养殖环节羊群布鲁氏菌病的控制和宰前检疫,提升从业人员和消费者对布鲁氏菌病危害的认知水平。  相似文献