Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒三种定量检测方法的比较与评价     

曾伟伟  王英英  尹纪元  汤亚方  李莹莹  王庆  高彩霞  任燕  刘春  石存斌 《淡水渔业》2019,49(6)

为了解决Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus genotypeⅡ,GCRV-Ⅱ)含量和滴度测定方法的选择问题,本研究利用荧光定量PCR(quantitative PCR,qPCR)、免疫过氧化物酶单层细胞试验(immunoperoxidase monolayer assay,IPMA)和间接免疫荧光试验(indirect fluorescent assay,IFA)三种方法来对GCRV-Ⅱ进行检测和含量测定,从特异性、敏感性、可靠性和检测结果的相关性来比较这三种方法对于GCRV-Ⅱ定量检测的差异。结果显示:qPCR、IPMA和IFA三种方法检测GCRV-Ⅱ的最低限分别为8.6、86和86拷贝/μL,qPCR的检测灵敏度比IPMA和IFA高一个数量级;特异性分析表明,qPCR、IPMA和IFA三种方法均只能检测出GCRV-Ⅱ型分离株,而其它病毒和未感染病毒的阴性对照细胞均为检测阴性,表明这三种方法均具有较高的特异性;3种方法分别检测60份已知临床样品,qPCR、IPMA和IFA的诊断敏感性和特异性分别为96.7%(29/30)和100%(30/30)、100%(30/30)和93.3%(28/30)及100%(30/30)和100%(30/30);三种方法对于GCRV-Ⅱ的定量检测结果中病毒拷贝数和病毒滴度之间具有较好的相关性,其拟合曲线分别为:Y(IPMA,TCID_(50)/mL)=23.629X-536 174(qPCR,拷贝/mL)(R~2=0.996)、Y(IFA,TCID_(50)/mL)=20.318X-575 062(qPCR,拷贝/mL)(R~2=0.995)和Y(IPMA,TCID_(50)/mL)=1.161X-1 176(IFA,TCID_(50)/mL)(R~2=0.999)。结果表明,GCRV-Ⅱ病毒滴度的测定,除了用IPMA和IFA外,也可以采用qPCR方法通过测定病毒的核酸拷贝数来测算其病毒滴度。  相似文献   

基于全基因组重测序鉴定四株金针菇线粒体序列差异     

吕晓萌  王祥锋  张大伟  王庆佶  王威 《分子植物育种》2023,(11):3589-3596

在真核细胞中,线粒体是氧化磷酸化的发生部位。它广泛存在于生物体中,具有独立的遗传物质DNA,能够参与细胞质遗传。目前金针菇线粒体基因组已经被解析,但其在不同菌株中的多态性仍未见报道。本研究结合已经公布的金针菇菌株4019-20线粒体基因组,组装和注释了重测序的3株金针菇(6-3,6-21, L22)线粒体序列。基因组比较分析表明：金针菇线粒体基因组长度在87 646～88 508 bp,编码蛋白数量均为15个,编码tRNA数目为26个,编码rRNA大亚基和小亚基的基因各1个。除4019-20菌株含有9个内含子外,其余菌株均含有10个内含子。进一步对四株金针菇线粒体基因组结构共线性分析,结果表明,在4个菌株中含有4个差异片段,其中差异片段Ⅰ为cox1基因第4内含子(菌株4019-20缺失)。同时,我们还检测到金针菇线粒体基因组中有两个片段存在移位现象,在移位位点处存在～1.6 kb和～2.8 kb的多态性片段。本研究结果能为金针菇线粒体基因组结构和遗传特性研究提供一定数据基础。  相似文献   

新型职业农民主导下的家庭农场规模经营研究述评与展望     

罗芳  田苗  夏庆利  孙芳敏  王庆 《江苏农业科学》2018,(2)

家庭农场形成较早,是各国普遍采用的一种农业经营模式,学界给予了高度关注。新型职业农民则出现得较晚,且该提法也不具有普遍性,研究相对较少。新型职业农民主导下的家庭农场规模经营是中国当前的实践热点问题,有必要对其相关理论观点进行整理。首先,回顾新型职业农民的内涵、成员结构、培育,重点介绍培育的必要性、模式、效果;其次,梳理家庭农场内涵、特征、发展现状、优势、影响规模的因素、适度规模界定、经营绩效及风险,并重点聚焦经营绩效,包括指标体系的构建、评估以及绩效影响因素等。再次,分析新型职业农民与家庭农场耦合机制的研究成果。最后进行述评与展望。  相似文献   

天津水稻精量水穴播技术试验研究     

申天兵  王庆莹  薄克明  赵亚洲 《农机科技推广》2018,(6)

正近年来,水稻精量水穴播技术在全国多个省市开展了试验示范,应用面积不断扩大,在节约成本,节省劳动力方面具有显著的优势。天津市水稻种植面积30万亩左右,是主要的粮食作物之一,种植地区主要集中在宝坻、宁河、津南等区,水稻种植方式以机械化插秧为主,2017年水稻机插率达到90%以上。然而水稻机械化插秧工序较多,人力、生产资料成本较高,尤其是宝坻地区处于大洼地带,土壤常年保水,比较适合开展水稻水  相似文献   

鲤疱疹病毒3型T分离株主要免疫原性蛋白的鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

石存斌  任燕  曾伟伟  王英英  李莹莹  王庆  郑树城 《淡水渔业》2018,(2):68-72

为了鉴定鲤疱疹病毒3型(Cyprinid Herpesvirus 3,CyHV-3)主要免疫原性蛋白,研究采用CyHV-3-T分离株感染CCB细胞系,运用蔗糖密度梯度超速离心方法对CyHV-3进行纯化,纯化的病毒颗粒经SDSPAGE和考马斯亮蓝染色后,用锦鲤(Cyprinus carpio haematopterus)抗CyHV-3阳性血清进行Western blotting分析和液相色谱串联质谱鉴定。结果表明,透射电镜下可观察到大量完整囊膜包裹或只有裸露核衣壳的CyHV-3颗粒,Western blotting结果显示抗CyHV-3阳性血清与多种病毒蛋白具有明显特异性免疫反应,质谱鉴定表明其中4种免疫原性蛋白分别为ORF92、ORF66、ORF72和ORF81,其中ORF66和ORF72为首次鉴定的具有免疫原性衣壳蛋白。本研究将为CyHV-3血清学诊断方法的建立、亚单位疫苗或DNA疫苗的研制提供更多候选抗原。  相似文献   

干旱胁迫对不同类型红花品种（系） 苗期生理生化特性的影响     

魏波  侯凯  王庆  席爱华  吴卫  王序英 《中国油料作物学报》2018,40(3):391

为筛选抗旱品种提供依据,本试验从14份红花品种中筛选出2个抗旱品种（PI401470和PI401477 ）和2个干旱敏感型品种（系）（PI560169和川红1号）,并以此4份品种（系）为材料,研究干旱胁迫对红花幼苗光合、渗透调节物质和抗氧化物保护酶等生理生化特性的影响。结果表明,干旱胁迫下,4个红花品种（系）叶片净光合速率（Pn）、气孔导度（Gs）、胞间CO2浓度（Ci）和蒸腾速率（Tr）均呈不同程度的下降趋势,且品种间差异显著（P﹤0.05）;抗旱红花品（系）的各光合特性指标降幅均低于敏感型红花品种（系）。干旱胁迫条件下,渗透调节物质可溶性糖、可溶性蛋白质、脯氨酸含量均上升,保护性酶SOD、POD和CAT活性也均呈升高趋势,且抗旱型红花品种（系）的增长率高于敏感型品种（系）;抗旱型品种（系）MDA含量增长率低于敏感型品种。对11项指标进行主成分分析,提取了2个主成分,以净光合速率、气孔导度、胞间CO2 浓度、蒸腾速率、SOD活性和CAT活性为第一主成分,以可溶性蛋白质和脯氨酸为第二主成分的抗旱性鉴定指标,累计贡献率达89.50％。  相似文献   

贯众、当归、黄芪对半滑舌鳎血液抗氧化指标的影响     

葛婧  郭永军  王庆奎  徐大为  孙学亮  陈成勋  邢克智 《水产科学》2016,(5):492-497

在水温(21±1)℃和盐度20±1下,将体质量(95.45±5.29)g的半滑舌鳎饲养在78cm×58cm×46cm水槽中,投喂按0、5、10、15g/kg添加贯众、当归、黄芪的饲料,每箱20尾,每个水平3个重复,7d、14d和21d时尾柄采血,测定总超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性以及总抗氧化能力、丙二醛、总胆固醇和甘油三酯含量。试验结果表明,14d时,贯众剂量为15g/kg组的半滑舌鳎血液中总超氧化物岐化酶活力显著高于对照组(P0.05),14d和21d时,各剂量组丙二醛含量均低于对照组;14d时,当归剂量为5g/kg组的半滑舌鳎血液中总超氧化物岐化酶活力达到最高值;21d时,黄芪剂量为10g/kg组的丙二醛含量值显著低于对照组(P0.05),21d时,黄芪剂量为5g/kg组的半滑舌鳎血液中总超氧化物岐化酶活力达到最高值,不同剂量的黄芪对过氧化氢酶活力有显著影响,但均低于对照组(P0.05);7d时,各组总抗氧化能力达到最高值。试验表明,单独添加贯众、当归及黄芪均不同程度地影响半滑舌鳎血液的抗氧化指标。  相似文献   

追风伞总黄酮的纤维素酶提取工艺研究     

王庆  薛天乐 《长江大学学报》2016,(9):76-79

采用紫外分光光度法,以芸香苷为标准品建立标准曲线,分别研究了酶用量、提取时间、料液比和提取温度对纤维素酶法提取追风伞(Lysimachia paridiformis)中总黄酮提取率的影响,再设计正交试验优选最优提取工艺。结果表明,其最优工艺条件为:酶用量4.0mg,提取时间2.5h,料液比1∶30,提取温度50℃。在最优提取工艺条件下,追风伞中的总黄酮提取率可达2.68%。因此,该方法可以用于追风伞总黄酮的提取。  相似文献   

饲料中不同糖源对杂交鲟幼鱼生长性能、血清生化指标和肌肉营养成分的影响     

宋娇  姜海波  姜志强  陈立侨  王庆奎  袁海文  杨家和  姚俊杰 《大连海洋大学学报》2016,(1):58-64

为探讨不同糖源对鲟鱼生长、饲料利用、血清生化指标和肌肉营养组成的影响,共配制5种含有不同糖源(葡萄糖、蔗糖、糊精、玉米淀粉、小麦淀粉)的等氮、等脂试验饲料,饲养初始体质量为(31.88±1.96)g的杂交鲟Acipenser baerii♀×Acipenser schrenckii♂幼鱼8周。结果表明:各试验组的成活率和日摄食率无显著性差异(P0.05);葡萄糖组终末体质量、增重率、特定生长率和蛋白质沉积率均显著低于其他各组(P0.05),而饲料系数则显著高于其他各组(P0.05);糊精组干物质表观消化率和蛋白质表观消化率均为最高,且显著高于葡萄糖组和蔗糖组(P0.05),但与玉米淀粉组和小麦淀粉组无显著性差异(P0.05);葡萄糖组的血糖、血清胆固醇和血清甘油三酯含量均为最高,其中血糖和血清胆固醇指标显著高于其他各组(P0.05),而血清甘油三酯指标则与蔗糖组无显著性差异(P0.05),但显著高于其他3个试验组(P0.05);糊精组肌糖原含量显著高于其他各组(P0.05),而其余各组间则无显著性差异(P0.05),糊精组肝糖原含量最低,且显著低于葡萄糖组和小麦淀粉组(P0.05);葡萄糖组粗脂肪含量最高,且显著高于其他各组(P0.05),小麦淀粉组粗蛋白质含量最高,且显著高于其他各组(P0.05),但与玉米淀粉组无显著性差异(P0.05)。研究表明,在本试验条件下,玉米淀粉和小麦淀粉更适宜作为杂交鲟幼鱼饲料糖源。  相似文献   

SBE法评价西安地区温室植物景观营造及配置特色     

李艳    杜勇军    刘国宇    王庆    杨群力   《西北林学院学报》2015,30(6):255-260

为了对西安地区温室植物景观特色与品种配置相关性进行研究,在调查温室植物景观现状及类别的基础上,选取具有代表性的5种植物景观（色叶、观花、藤蔓、附生、棕榈）作为评价样本,拍摄相关样本照片作为评价媒介。选择45位评判人员参与评价,运用风景质量评价法中的美景度评判法（SBE法）进行评价,并通过SPSS19.0及Excel软件进行数据分析。结果表明:除了藤蔓植物景观外,园林专业学生组对其余温室植物景观的评价结果同专家组、非专业人员组之间有显著相关,专业学生可初步选作预测温室植物景观评价的评判人员。基于评价结果,对温室植物景观评价高及差别大的实例结合园林植物和景观生态学相关理论进行了分析,筛选出温室景观中最有特色的植物配置模式,为城市农业观光园的植物造景提供科学依据。  相似文献