抗对硫磷单链抗体在昆虫细胞中的表达及活性鉴定     

刘蕊  项丹丹  刘鹏琰  梁晓  郭逸蓉  朱国念 《农药学学报》2016,18(2):177-184

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,在Sf9昆虫细胞中表达抗对硫磷单链抗体,并评价该重组抗体scFv-4C6的分子识别活性。以分泌能特异性识别对硫磷的单克隆抗体的杂交瘤细胞株4C6为RNA来源,采用RT-PCR方法扩增抗体的重链和轻链可变区基因,经重叠延伸PCR方法串联拼接获得单链抗体基因片段(scFv-4C6)。构建包含目的片段的重组杆粒Bacmid-scFv-4C6,转染Sf9细胞表达目的蛋白,采用免疫印迹法(Western blotting)检测表达产物,间接竞争酶联免疫吸附(ic-ELISA)法评价产物的生物活性。结果表明:scFv-4C6基因片段拼装正确,成功转染Sf9细胞,并在转染后72 h表达量最高,表达的单链抗体大小为28.3 kD;表达产物能特异性识别对硫磷,IC50值为7.9 ng/mL,对甲基对硫磷和杀螟硫磷分别有12%和1.8%的交叉反应率,与亲本单克隆抗体的识别性能相似。该研究表明,具有生物活性的抗对硫磷单链抗体scFv-4C6可在昆虫细胞中成功得到表达。  相似文献   

人白细胞介素-4基因在家蚕杆状病毒表达系统中的表达     

陈蔚青  史锋  朱成钢  申屠超 《蚕业科学》2006,32(4):512-516

采用RT-PCR法从经LPS诱导刺激的人外周血淋巴细胞中克隆了人白细胞介素-4(human interleu kjn-4,hIL-4)基因。为高效表达hIL-4,促进其临床应用,将hIL-4插入家蚕杆状病毒转移载体pBacPAK8中,构建重组载体pBacPAK-hIL-4,并与线性化病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕BmN细胞,获得重组病毒BacPAK-hIL-4。将重组病毒感染家蚕5龄幼虫和蚕蛹(1×10~5PFU/头),表达产物以ELISA、SDS-PAGE和Western blotting方法检测,用活化的人外周血T淋巴细胞测定表达产物体外生物活性。ELISA法结果表明hIL-4在感染病毒后96h的蚕血淋巴和120h的蚕蛹中表达量最高,分别达到2．3μg/mL蚕血淋巴和10．2μg/mL体液;SDS-PAGE、Western blotting分析表明表达产物分子量约20kD;表达产物对活化的T淋巴细胞增殖具有明显促进作用。  相似文献   

杂交水稻新品种丰两优一号的引进及高产栽培试验研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

汪德义  黄泽群  蒋晓琰  李欢  廖川康  郭涛 《陕西农业科学》2009,55(3):11-13172

通过品比试验筛选出优质高产水稻新品种丰两优一号,经密度、施肥、秧龄、适应性等各类栽培试验研究,总结出高产配套栽培技术.  相似文献   

叶用莴苣荧光定量PCR体系的优化   总被引：1，自引：1，他引：0  

李婷韩莹琰  范双喜任月 《中国农学通报》2013,29(13):106-113

为建立一套最适合叶用莴苣(Lactuca sativa L.)基因表达量研究的荧光定量PCR技术体系,以叶用莴苣S24为试材,采用SYBR GreenⅠ法,利用叶用莴苣内参基因的2对引物组合18SR1和18SR2,分别在10 μL和20 μL反应体系条件下进行扩增反应。结果表明,分别在10 μL和20 μL反应体系条件下内参基因引物组合18SR1的扩增曲线、标准曲线以及溶解曲线等指标都优于内参基因引物组合18SR2;2对内参基因引物组合18SR1和18SR2在10 μL反应体系中的扩增曲线、标准曲线以及溶解曲线等指标也均优于20 μL反应体系。因此叶用莴苣荧光定量PCR内参基因利用18SR1引物组合,反应体系采用10 μL比较合理。  相似文献   

黄土高原不同苹果园土壤酶、有机质、微生物及树体产量品质的调查研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

田稼  孙超  杨明琰  张晓琦 《中国农业科技导报》2012,14(5):115-122

测定了黄土高原苹果主栽区洛川县6个苹果园土壤脲酶、磷酸酶、蔗糖酶的活性、土壤有机质的含量和微生物数量,调查了6个果园土壤微生物的分布情况,并对土壤酶活性、土壤有机质含量、土壤微生物数量及与苹果品质的相关性进行了分析。结果表明:①6个果园三种土壤酶活性均随着土层剖面加深呈现下降趋势。在0~20 cm土层范围酶活性较高,20 cm土层以下开始迅速下降,之后趋势减缓。②6个果园土壤有机质含量较低,平均为0.945%。③不同树龄果园微生物总量的变化为:盛果期果园(15 a)>老龄期果园(20 a)>幼龄期果园(7 a),微生物类群数量的分布规律为:细菌>放线菌>真菌,其中细菌和真菌的数量相差100倍以上。不同树龄的果园随着土层的深入,土壤细菌、放线菌和真菌在数量上均呈现出减少的趋势。0~20 cm的表层土是菌群分布比较集中的区域。④有机质与脲酶、磷酸酶和蔗糖酶均呈正向相关,r值分别为0.400、0.565和0.788,且三种酶之间也有很强的相关性。⑤三种土壤酶、土壤有机质、土壤微生物与苹果品质的5个指标之间均呈正相关,说明这三类因素可以影响苹果品质。  相似文献   

常山县古树名木资源现状及保护管理建议     

李余新  黄良华  申屠惠良  刘晓明 《华东森林经理》2017,31(1)

通过分析常山县古树名木资源的种类、数量、分布、保护管理现状等情况,指出其存在的宣传力度不够、保护意识淡薄,人为破坏严重、生存环境堪忧,受自然灾害冲击、古树遭受损毁,保护经费严重不足等问题,并提出了加大宣传力度、增强保护意识、明确管护责任,采取有效措施、实行积极保护,设立专项资金、加大保护力度,严厉打击各类损害破坏古树名木的违法行为等古树名木的保护管理建议。  相似文献   

α-淀粉酶预处理对城市生活垃圾厌氧消化的影响研究     

何娟  孙可伟  邹成鸿  李建昌  申屠良义  张剑波 《安徽农业科学》2010,38(27):15166-15168

[目的]研究α-淀粉酶预处理城市生活垃圾后对厌氧消化产气和产甲烷的影响。[方法]采用单因素试验方法,用不同α-淀粉酶添加量、水解温度、水解时间和底物浓度预处理城市生活垃圾,考察经过预处理后的生活垃圾再进行中温厌氧消化对产气和产甲烷情况的影响。[结果]通过α-淀粉酶预处理后比不经过任何处理的效果更显著,且得到利用α-淀粉酶预处理城市生活垃圾来强化厌氧消化的适宜条件为：酶用量100U/gVS、水解温度50℃、水解时间1h、底物浓度为8%。[结论]试验为进一步优化厌氧消化工艺提供了基础数据。  相似文献   

乳酸介质中麦草浆纤维素的降解及其结构的变化     

窦圆圆  李小保  叶菊娣  高勤卫  朱丽琰  洪建国 《安徽农业科学》2010,38(27):15449-15452

[目的]为利用纤维素制备热塑性高分子材料提供依据。[方法]在一定温度下,将预处理后的原料（干燥麦草浆）浸入一定量的乳酸中,搅拌一定时间后干燥至恒重,研究温度、时间对纤维素聚合度和碘吸附值的影响,并分析麦草浆纤维素在乳酸介质中化学结构的变化。[结果]温度高于30℃时,纤维素开始降解,且温度越高,纤维素降解越剧烈。温度和搅拌时间对纤维素聚合度和碘吸附值的影响较大,而乳酸用量对其影响较小。红外谱图和X-衍射图谱分析结果表明,60℃之前,麦草浆在乳酸介质中主要发生物理溶胀和少量的降解;超过70℃后,麦草浆除发生降解外,还可能伴随着化学反应,但纤维素的晶型未发生改变。[结论]该研究为纤维素在乳酸介质中的改性提供了资料。  相似文献   

学较课程质量的监控与评估     

申屠江平 《中国农业教育》2010,(3):17-18,4

我国学校课程质量监控与评估存在评估主体单一,评估标准呆板、评估方法单调、过于倚重总结性评估等问题,已严重影响课改持续、深入进行。完善学校课程质量监控与评估体系应成为当前课程改革的工作重点,学校应准确把握质量监控与评估信息的收集、分析技巧及有效课程的质量标准,研究建立适合各校实际的课程质量评估体系,努力构建校内外结合的课程质量监控与评价运行机制。  相似文献   

CawsAnyWhere Server 2.0的安装及配置     

摆琰 《现代农业科技》2011,(18):45

就昌吉州奇台县芨芨湖区域自动气象站中心站软件安装、配置以及在运行中需要注意的事项加以总结,以供技术人员参考。  相似文献