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以pUC18载体为骨架质粒,犬2型腺病毒(canine adenovirus 2,CAV-2)Tomnto A26/61株为亲本毒株,以复制非必需区E3的侧翼序列为同源重组臂,对外源基因的插入靶点E3区进行了缺失,并在缺失位置插入hCMV IE启动子、多克隆位点,增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)、SV40早期转录poly-A信号,构建了E3区缺失的转移栽体pUC-△E3-EGFP.该载体与CAV-2亲本毒株共转染MDCK细胞,二者发生同源重组,经蚀斑筛选获得了表达EGFP的重组病毒rCAV-2△E3-EGFP.经鉴定重组病毒保持了亲本毒株的生物学性状并能够稳定表达外源基因,动物试验证实E3区的缺失对病毒的致病力无明显影响,为进一步开展CAV-2活载体疫苗研制及相关基础研究提供了技术平台. 相似文献
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本研究从一株鼠仙台病毒（Sendai virus,SeV）中扩增获得核蛋白（nucleocapsid protein,NP）基因,将其克隆入pET32a（＋）中,转化大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达。将原核表达产物作为免疫原,免疫BALB/C小鼠,制备获得抗NP的特异性多抗,经间接免疫荧光法和Western blot法检测,该表达产物原具有良好的免疫原性。将该产物纯化作为包被抗原,建立了一种检测SeV感染的间接ELISA方法。通过H1N1流感病毒、H9N2流感病毒、新城疫病毒阳性血清进行交叉试验表明：该间接ELISA方法有很好的特异性。这为实验动物仙台病毒抗体的检测提供了一种快速、简便的血清学诊断方法。 相似文献
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正2016年6月28日淮安市淮安区博里镇一养殖户电话咨询:为什么阴雨天池塘有零星死鱼?是否与饲料发霉有关?笔者认为阴雨天零星死亡的个体多为吃食鱼,大多数与饲料有关。具体分析如下。1.天气因素阴雨天,光照弱,水体中浮游植物、沉水植物等光合作用减弱;水体中溶解氧较晴天偏低,而底层氧债相对偏高,有害物质如硫化氢等可能产生或偏高。另溶氧水平的高低影响摄食量、消化 相似文献
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工厂化水产养殖检测与控制系统的研究 总被引：2，自引：1，他引：1
通过对国内外工厂化水产养殖检测与控制系统进行了分析和研究,提出了一种基于数据采集卡和输出卡的工厂化水产养殖检测与控制系统.该系统能够对养殖池的温度、水位、pH值和溶解氧等多种水体参数进行检测和控制,能达到降低成本、增加产量、节约能源和降低污染的作用.该系统以其简单结构、低成本、高可靠性、易扩展性等优点有着广阔的应用前景. 相似文献
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用单抗夹心ELISA快速检测鸡新城疫病毒 总被引：3，自引：0，他引：3
采用传统的病毒分离的方法将免疫鸡群泄殖腔棉拭样品盲传一代，再用新城疫单抗夹心ELISA对F1尿囊液进行新城疫病毒(NDV)检测。结果表明本方法具有良好的特异性，NDV阳性样品检出率很高，且鸡禽流感病毒(AIV)对此无干扰作用；分别检测阳性样品453份、阴性样品2959份，与动物世界卫生组织(OIE)推荐的病毒分离及鉴定、毒力试验的经典检测方法相比较，符合率为99．3％、99．7％；测定的变异系数为8％，稳定性较好，同时本法比经典的检测方法缩短检测时间7d。结果表明用单抗夹心ELISA法检测鸡泄殖腔棉拭样品F1尿囊液新城疫病毒实用、准确、特异、稳定、快速。 相似文献