BmCPV多角体蛋白对异源蛋白的包埋     

张轶岭  孟祥坤  朱越雄  曹广力  薛仁宇  贡成良 《蚕业科学》2011,37(4):676-681

为了解家蚕质型多角体病毒(BmCPV)的多角体蛋白对异源蛋白的包埋作用,将BmCPV的多角体蛋白基因克隆至昆虫细胞表达载体pIZT/V5-His,转染家蚕卵巢培养细胞(BmN)后通过吉欧霉素(zeocin)筛选获得稳定表达多角体蛋白的细胞株。倒置荧光显微镜观察发现,转化BmN细胞有轻度的病理变化,细胞质中有呈绿色荧光的多角体蛋白结晶,但从转化BmN细胞中纯化的多角体无明显的绿色荧光。以修饰型线性化家蚕杆状病毒BmPAK6感染稳定转化BmN细胞,96 h后纯化多角体,回复感染显示多角体裂解液能感染家蚕BmN细胞,表明BmCPV多角体蛋白能包埋BmPAK6。纯化的多角体及多角体裂解液均能用X-gal显色,表明BmPAK6表达的β-半乳糖苷酶也能被BmCPV的多角体蛋白包埋。研究结果可为获得具有多角体的重组杆状病毒以及开发利用质型多角体蛋白包埋异源蛋白的功能提供新的技术途径。  相似文献   

JAK/STAT途径对家蚕杆状病毒感染应答的初探     

张晓丽  马焕艳  曹广力  薛仁宇  贡成良 《蚕业科学》2011,37(4):682-687

为了探讨家蚕抗病毒感染的免疫应答途径,通过非转座子介导将家蚕信号转导子及转录激活因子(STAT)基因表达盒(BmSTAT)导入家蚕卵巢培养细胞(BmN),经吉欧霉素(zeocin)筛选获得过表达BmSTAT的稳定转化BmN细胞。修饰型线性化家蚕杆状病毒Bm-BacPAK6感染结果显示:病毒感染后转化BmN细胞和正常BmN细胞的BmSTAT基因表达水平分别提高了32.70%和14.63%,表明家蚕JAK/STAT途径对杆状病毒感染有应答。比较转化BmN细胞和正常BmN细胞对杆状病毒感染的抵抗性,发现病毒对转化BmN细胞的感染比例低于正常BmN细胞,二者之间的感染率相差8.28～18.02个百分点;在感染病毒的转化BmN细胞中,β-半乳糖苷酶基因的表达水平比病毒感染正常BmN细胞的略低,推测这与转化BmN细胞中的BmSTAT水平(JAK/STAT途径信号)高于正常BmN细胞有关。然而,在BmN细胞中,BmSTAT基因的过表达尚不足以明显提高细胞对病毒感染的抵抗力。研究结果为进一步探讨家蚕JAK/STAT途径在病毒感染应答方面的作用奠定了基础。  相似文献   

表达短lef-1dsRNA转基因家蚕对BmNPV的抵抗能力与主要经济性状   总被引：1，自引：1，他引：0  

叶秋霞  薛仁宇  曹广力  张鹏杰  潘中华  郑小坚  贡成良 《蚕业科学》2011,37(5)

为了提高家蚕对核型多角体病毒(BmNPV)的抵抗能力,将带有BmNPV晚期表达因子基因(lef-1)dsRNA表达盒和新霉素抗性基因(neo)表达盒的转基因载体pigA3-LEF-Neo通过精子介导法导入家蚕卵,经G418和GFP双重筛选并结合分子生物学鉴定,证实获得了转基因家蚕。对G6代转基因家蚕2龄幼虫接种BmNPV,结果显示转基因家蚕的死亡率比正常家蚕(对照组)下降了10～30个百分点,表明转基因家蚕对BmNPV的抗性有所提高;对接种BmNPV的5龄转基因家蚕A、B系统的定量PCR检测结果显示,2个系统体内的lef-1 mRNA转录水平比对照组平均降低了72倍和26.5倍,最高下降了104倍,进一步表明表达lef-1 dsRNA的转基因家蚕抑制了BmNPV lef-1基因的表达。转基因家蚕的饲养成绩显示其全茧量、茧层量和茧层率等主要经济性状与正常家蚕无明显差异。  相似文献   

网络版蚕病诊断与防治专家系统设计     

贡成良  石丹平  薛仁宇  曹广力 《蚕业科学》2009,35(1)

为普及家蚕病害的基础知识,辅助提高蚕病诊断的准确率和蚕病防治技术水平,采用微软成熟的IIS+ASP+ACCESS技术建立了基于Internet的包含19种主要家蚕病害在内的诊断与防治专家系统(http:∥211.90.162.131:8099/)。该系统包括蚕病基本知识、识别与诊断知识、发病规律与防治知识、辅助诊断系统以及咨询与影像系统。计算机模糊判断法是辅助诊断系统的核心模块,该模块通过将专家经验转化为可供计算的模式概率值,建立数据库,即可从已知的病征(事实、证据)出发,采用模糊产生式诊断规则给出模糊断言的最大值作为诊断结果,并自动提出相应的防治措施。  相似文献   

关于DNV佐久株的研究综述     

贡成良 《广东蚕业》1989,(4)

前言1929年法国的 Paillot 提出家蚕的空头性软化病是由病毒引起的。从此就结束了蚕的空头性软化病由细菌引起的历史。1960年将由此病毒引起的软化病正式命名为:病毒性软化病或传染性软化病。而此病毒即命名为:传染性软化病病毒。通过蚕病学者们的大量研究,确认此病毒属于微核糖核酸病毒科(Picornaviridae)、肠道病毒属(Entero-virus)的病毒。然而松井(1973年)、古田(1973年)、Himeno等(1974年)、清水(1974年)相继发现了能引起家蚕软化病症,而又不同于原先发现的传染性软化病病毒的新病毒。这些新发现的病毒当时就分别称为:松井株、古田株、姬野株、伊那株。其中姬野株被认为是传染性软化病病毒粒子的未成熟型,而松井、古田、伊那株则是完  相似文献   

家蚕核型多角体病毒四角形多体的研究     

贡成良  卢铿明 《蚕业科学》1993,19(1):25-31

  相似文献   

熏毒威烟熏预防血液型脓病的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

朱军贞潘中华  贡成良 《江苏蚕业》2001,23(4):57-58

熏毒威烟熏可以较好地预防血液型脓病，使用方便。作者利用熏毒威对桑叶叶面、蚕座上的核型多角体进行烟熏消毒，杀灭效果较好。蚕期中以０、５～１ｇ／ｍ３熏毒威烟熏半小时，对蚕的发育、茧质无不良影响。  相似文献   

家蚕蛹虫草的毒性研究(待续)   总被引：1，自引：0，他引：1  

贡成良  徐承智  杨昆  陈国刚  潘中华  吴卫东 《中国食用菌》2003,22(6):54-56

家蚕蛹虫草大、小鼠雌、雄性经口LD50大于10.0g/kg体重,根据急性毒性分级标准,其大小鼠急性经口毒性属于实际无毒类.致癌、致突变、致畸试验阴性.家蚕蛹虫草大鼠30d喂养试验各项指标均未见明显毒性反应,其最大无副作用剂量为4.0g/kg体重.  相似文献   

杀虫剂溴氰菊酯对野桑蚕和家蚕的毒力比较   总被引：12，自引：8，他引：4  

赵华强  王东  李兵  许雅香  贡成良  沈卫德 《蚕业科学》2008,34(1):115-118

基于了解野桑蚕(Bombyxmandarina)和家蚕(Bombyxmori)对农用杀虫剂溴氰菊酯的抗药性差异,采用点滴法和浸叶法测定了溴氰菊酯对野桑蚕和家蚕的毒力,结果其毒力基本一致。野桑蚕和家蚕对溴氰菊酯的敏感度均较高,LD50在0.027~0.429 ng/头之间,但吴江野桑蚕、启东野桑蚕和苏大野桑蚕的抗药性较相对敏感的家蚕品种大造、菁松、皓月强10.11~15.89倍,较家蚕品种L11强4.37倍。  相似文献   

中国野桑蚕mtDNA中A+T丰富区片段的克隆及序列分析   总被引：4，自引：1，他引：3  

郑小坚  曹广力  薛仁宇  陈淼  何泽  贡成良 《蚕业科学》2004,30(4):348-352

对中国野桑蚕mtDNAA +T丰富区片段进行了克隆和序列分析。在所测定的 72 0bp左右的片段中 ,A +T含量为 92 0 8% ,与不同家蚕品种的mtDNA相近 ,中国野桑蚕与家蚕之间的核苷酸序列呈高度同源性 (98%以上 ) ;但与日本野桑蚕相比 ,中国野桑蚕mtDNA的A +T丰富区片段 ,缺少 2个 12 6bp的重复单位 ,A +T含量低 0 9% ,核苷酸序列同源性也较低 (72 % )。该片段与中系家蚕mtDNA比较 ,有 15个变异位点。对mtDNAA +T丰富区的中国野桑蚕和日本野桑蚕及中系、日系和韩国的 4个家蚕品种进行聚类分析表明 ,日本野桑蚕有可能由中国野桑蚕分化而来。  相似文献