番茄环纹斑点病毒N和NSm基因的VIGS载体构建     

崔玥  赵立华  陈思  文俊元  邱润霜  张仲凯  赵明富 《西南农业学报》2023,(1):98-104

【目的】番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot orthotospovirus, TZSV)由传毒介体蓟马以持久增殖型方式传播，且能与其他病毒复合侵染作物，对中国西南地区重要蔬菜的产量和观赏作物的品质造成严重影响，给当地农业生产带来了严重危害。TZSV的N和NSm基因与病毒分类、运动和系统侵染密切相关。本研究通过构建N和NSm基因沉默载体，以期为进一步研究TZSV N和NSm基因在病毒侵染方面的功能提供材料，为抗病育种以及田间绿色防控提供一些依据。【方法】根据TZSV N和NSm基因序列设计特异性引物，利用RT-RCR技术扩增得到TZSV N和NSm基因片段，将扩增得到的目的基因连接到pEASY-Blunt-Zero载体上，含有N和NSm基因序列的pEASY-Blunt-Zero载体和pTRV-pTV00载体用Bam HI和Hind III限制性内切酶进行双酶切，并将酶切产物进行纯化回收，纯化后产物与pTRV-pTV00载体使用T4 DNA连接酶连接，获得pTRV-PTV00-N和pTRV-PTV00-NSm重组载体，将其转入根癌农杆菌GV3101中，并注射到本氏烟和栽...  相似文献   

“营改增”后融资租赁企业税负分析及涉税风险规避          下载免费PDF全文

陈思 《安徽农业大学学报》2014,(5):68-70；109

融资租赁是具有融资与融物双重功能的一种特殊金融交易，我国营业税改征增值税对融资租赁业的发展产生了很大影响。营业税改征增值税后，融资租赁业整体税负下降，但是由于政策不断变更，融资租赁企业难以准确掌握税收政策的变化。同时由于营业税改征增值税相关政策在细节上存在诸多不确定性，融资租赁企业在进行纳税筹划时容易产生涉税风险。针对融资租赁业如何结合最新的税收政策，做好税务方面的筹划与风险防范以促进融资租赁业健康发展进行研究，具有重要的现实意义。  相似文献   

矿山恢复治理区植被物候与健康状况遥感监测          下载免费PDF全文

帅爽  张志  吕新彪  陈思  马梓程  谢翠容 《农业工程学报》2021,37(4):224-234

矿山恢复治理区植被物候与植被健康状况可以定量评价恢复治理工程实施效果,以往矿山恢复治理遥感监测多侧重于监测植被覆盖变化,忽略了对恢复治理区域植被物候特征和健康状况的评估。该研究使用时间序列哨兵2号影像,基于Savitzky-Golay滤波、动态阈值、曲率曲线等方法,以黑龙江省七台河市一玄武岩采石场及周边区域为例,分别提取了恢复治理区和正常耕作区玉米出苗期、拔节期、抽雄期、成熟期、物候期间隔长度等遥感物候指标,研究恢复治理区和正常耕作区玉米生长状态的差异。同时,提取并对比恢复治理区和正常耕作区植被红边位置指数(REIP)、归一化植被指数(NDVI)、绿色归一化植被指数(GNDVI)、陆地叶绿素指数(MTCI)、特征色素简单比值指数(PSSRA)、倒红边叶绿素指数(IRECI)、改进的叶绿素吸收指数(MCARI)和植被覆盖度(FVC)等遥感指标值,评估各遥感指标区分恢复治理区作物的能力和诊断矿山恢复治理区作物健康程度的可行性和敏感性。结果表明:1)相较正常耕作区,恢复治理区玉米关键物候期推迟,出苗期、拔节期、成熟期分别推迟了5～12、9～12和21～22 d,恢复治理区作物生长状态的差异随着作物生长阶段的推移逐步显现;2)恢复治理区和正常耕作区REIP、NDVI、GNDVI、PSSRA、IRECI和FVC等遥感指数值有明显差异,其中GNDVI指数反映恢复治理区作物的整体光谱特征更稳定,PSSRA指数对于区分恢复治理区和正常耕作区作物光谱特征差异最敏感,这种差异受两区域玉米作物叶绿素含量、叶面积指数和叶片含水量等生理信息差异的综合影响。该研究可为矿山恢复治理效果快速评估提供一种技术思路。  相似文献