斑节对虾Pellino基因的克隆及其在不同胁迫条件下的表达分析     

丁阳阳  江世贵  李运东  杨其彬  姜松  杨丽诗  黄建华  周发林 《南方水产科学》2019,(3):87-96

Pellino蛋白家族,是一类高度保守的E3泛素连接酶,在泛素化和先天性免疫中发挥重要作用。该研究通过RACE技术得到斑节对虾(Penaeus monodon)泛素连接酶Pellino基因的c DNA全长。该基因序列全长1 961 bp,编码区序列长1 299 bp,编码432个氨基酸,5’非编码区(UTR)为89 bp,3’UTR为573 bp。通过qRT-PCR技术,研究了PmPellino基因在斑节对虾不同组织中的表达水平,并研究了其在不同浓度氨氮胁迫下和不同微生物刺激下的表达情况。结果显示,PmPellino基因在各组织中均有表达,在鳃组织中表达量最高。急性氮氮胁迫后,PmPellino在肝胰腺中的表达量显著上调(P<0.01),但在鳃中的表达被抑制(P<0.01)。哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)可显著激活PmPellino在鳃中的表达,抑制其在肝胰腺中的表达。鳗弧菌(V. anguillarum)可显著抑制PmPellino在肝胰腺中的表达,而对PmPellino在鳃中的表达无显著影响。金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)可以显著激活PmPellino在肝胰腺和鳃中的表达。结果表明PmPellino可以激活免疫应答通路,在免疫防御中发挥重要作用。  相似文献   

多种环境因子对克氏原螯虾蜕壳死亡的影响及对策研究     

刘栋梁  黄建华  杨丽诗  谭理琦 《南方水产科学》2020,16(2):29-35

为探究克氏原螯虾(Procambarus clarkii)蜕壳死亡原因及预防对策,该研究以不同环境因子饲养和胁迫不同规格的克氏原螯虾,初步探讨其蜕壳死亡原因及预防对策。结果表明,水体中钙(Ca2+)质量浓度为30 mg·L^?1、镁(Mg^2+)质量浓度为15 mg·L^?1时,克氏原螯虾的成活率和蜕壳率最高,显著高于对照组(P<0.05),而蜕壳死亡率显著低于对照组(P<0.05);水体中pH为9.23,或者溶解氧质量浓度为4.5 mg·L^?1时,虾的成活率和蜕壳率显著低于对照组(P<0.05),而蜕壳死亡率显著高于对照组(P<0.05);盐度为21时的蜕壳死亡率最高(P<0.05)。环境因子等诸多因素是造成克氏原螯虾蜕壳死亡的重要原因,而蜕壳死亡现象时有发生,需采取预防对策方可提高产量。  相似文献   

基于InDel标记的斑节对虾早期性别鉴定方法的建立     

黄智康  江世贵  周发林  黄建华  杨其彬  姜松  李运东  杨丽诗 《南方水产科学》2020,16(3):113-118

为分辨斑节对虾(Penaeus monodon)发育早期的性别,利用改良的插入/缺失(InDel)标记追踪了从受精卵、无节幼体、溞状幼体、糠虾幼体、仔虾后1 d(PL1)、仔虾后30 d(PL30)及亚成虾个体的性别,建立了测序和荧光定量PCR熔解曲线的检测方法。结果表明,InDel标记可扩增获得雌雄特异性序列,用测序法判定亚成虾性别的结果与外部观察结果一致,准确率达100%,对受精卵、无节幼体、溞状幼体及糠虾幼体均可得到雌雄特异性序列;进而建立了基于SYBR Green实时荧光定量PCR(Quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)熔解曲线的快速鉴定斑节对虾性别的方法,其中雄性特异序列的熔解温度(Melting temperature,Tm)为(79.10±0.10)℃,雌性为(78.45±0.20)℃,通过特异的熔解曲线可准确区分PL30、亚成虾和无节幼体Ⅵ期个体,准确率可达96.3%以上。  相似文献   

斑节对虾7个全同胞家系间亲缘关系的微卫星分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

苏天凤  熊小飞  江世贵  黄建华  周发林  夏军红 《南方水产》2010,6(6):1-7

为了斑节对虾（Penaeus monodon）后续育种工作的需要,研究了斑节对虾7个全同胞家系的亲缘关系。从95对微卫星引物中筛选出16对,16个微卫星位点共发现79个等位基因（A）。每个位点的A为2～10个,平均4.9375,有效等位基因（Ne）1.7575～5.3980,平均3.3878,平均杂合度观测值（Ho）0.6679,平均杂合度期望值（He）0.6698。平均多态信息含量（PIC）0.6110。7个家系总近交系数（FIT）0.0099,家系内近交系数（FIS）-0.3725,家系间基因分化系数（FST）0.2709。根据遗传距离采用UPGMA法对7个家系进行聚类,F2和F6家系之间的遗传距离最小聚为一类,与F7家系遗传距离最远。结果表明,家系间基因交流较低,遗传分化程度较高,且很少发生近交,F7家系可以优先考虑与其他家系进行杂交选育。  相似文献   

少毛钝绥螨的生物学特性及rDNA ITS序列分析     

黄建华  孙强  杨迎青  兰波  李湘民  《植物保护》2020,46(1):208-211

少毛钝绥螨Proprioseiopsis asetus是在国内有分布的一种捕食螨,其研究尚不深入。为明确其生物学特性,在25℃室内条件下研究了少毛钝绥螨对芦笋蓟马1龄若虫、柑橘全爪螨低龄若螨、椭圆食粉螨1龄若螨和丝瓜花粉的食性。结果表明:少毛钝绥螨可以取食以上4种食物,其中对粉螨和芦笋蓟马的捕食量较大,对柑橘全爪螨捕食量较小。少毛钝绥螨及其近缘种的rDNA ITS序列在61~85、116~159、177~198、224~254、277~317、531~549、438~445 bp和580~594 bp等ITS区段存在差异性碱基。少毛钝绥螨及其近缘种分为两个组群。Proprioseiopsis、Neoseiulus、Amblyseius聚为一个组群(GroupⅠ),而Euseius单独聚为一个组群(GroupⅡ)。少毛钝绥螨与N.womersleyi和N.agrestis亲缘关系较近。  相似文献   

丹阳市农业植物检疫工作的实践与发展     

王璐  闫硕  洪素娣  吴玉平  黄建华  王晓亮  冯晓东 《中国植保导刊》2019,(3):81-84

农业植物检疫是防止检疫性有害生物传播蔓延,保护农业生产安全和保障农产品贸易顺利进行的一项重要举措。江苏丹阳市高度重视农业植物检疫工作,不断加强检疫管理、强化服务指导,努力发挥农业植物检疫的作用。笔者以丹阳市农业植物检疫工作实践为基础,分析了农业植物检疫工作的现状,针对现阶段基层植物检疫工作面临的问题,提出了几点思考和建议。  相似文献   

膨化能量和蛋白饲料在养猪业中的应用     

刘春生  黄建华 《湖南饲料》2004,(5):21-23

膨化是综合了水、压力、温度和机械剪切诸因素的作用而完成的。经过膨化的物料会发生一系列物理、化学变化,如促进淀粉糊化、蛋白质变性、以及使霉变有毒成分和有害微生物失活,提高养分消化率,改善饲料适口性,增进饲料颗粒的稳定性和耐贮性等。另外,对于某些廉价饲料原料,经过膨化处理后可以替代高值原料使用而不影响饲料的质量,从而降低饲料成本,对开发新饲料资源起到了重要作用。因此,近年来膨化技术在饲料工业中得到广泛应用。  相似文献   

斑节对虾亲环素A （cyclophilinA） 基因的克隆及启动子序列分析     

王卫芳     邱丽华     黄建华     张殿昌     苏天风     杨其彬     江世贵 《中国水产科学》2009,3(3)

通过同源克隆和RACE技术获得斑节对虾(Penaeus monodon)亲环素A(cyclophilin A,CYPA)的cDNA序列.根据已克隆的cDNA序列设计引物,利用染色体步移技术(Cenomic DNA walking)从斑节对虾卵巢组织中克隆了CYPA基因的启动子和基因组DNA序列.测序结果表明,斑节对虾亲环素A(PmCYPA)cDNA全长834 bp,其中开放阅读框(open reading frame,ORF)为495 bp,可编码164个氨基酸;5'非编码区为31 bp,3'非编码区为308 bp.从斑节对虾基因组文库中扩增的CYPA基因组DNA全长3 181 bp,其中包括启动子区域1 173 bp,1个内含子426 bp,2个外显子序列:分别为101 bp和399bp.在5'UTR上游区域有明显的启动子序列,包含一个GC盒和2个CAAT盒,同时还包含AP1、CRE等调控元件,符合真核生物典型的启动子特征.分析基因的结构表明所克隆的PmCYPA符合PPlase家族成员特征,属于此基因家族成员.  相似文献   

斑节对虾真核生物翻译起始因子3亚基4（btseIF3g）序列分析及组织表达特性     

陈亮  张殿昌  杨丽诗  黄建华  杨其彬  江世贵 《南方水产》2009,5(3):1-9

通过mRNA差异显示(differential display,DD)技术筛选的差异片段,与斑节对虾(Penaeus monodon)混合组织cDNA文库中的EST进行拼接,获得斑节对虾真核生物翻译起始因子3亚基4(btseIF3g)的全序列(GenBank登录号:FJ829364).btseIF3g全长1 041 bp,由72 bp 5′非编码区、90 bp 3′非编码区以及879 bp的开放阅读框组成,推测编码一个长度为292个氨基酸的蛋白.经BLAST分析,btseIF3g C端含有一个RNA识别基序(RNA recognition motif,RRM)的保守结构域(E值为2.72e-25).利用氨基酸序列进行系统发育分析表明,btseIF3g与eIF3g属于同一分支.采用荧光定量PCR(Real-time PCR)方法对250日龄的雌、雄斑节对虾不同组织表达特性研究发现,btseIF3g在眼柄神经节、脑神经、肝胰腺、性腺和肌肉组织中均有表达,在卵巢中的相对表达量极显著(P<0.01)高于其他组织,这一结果提示eIF3g可能与斑节对虾卵巢发育相关.  相似文献   

80%Regent WG等药剂防治纵卷叶螟试验报告     

杨龙根  黄建华  吴玉平 《农业装备技术》2005,31(6):33-34

主要报道了80%RegentWG等药剂对水稻纵卷叶螟和螟虫的药效进行比较,试验结果表明,Regent在同剂量下WG与SC剂型无差别,75%特锐WP50g/667m^2、15%阿维毒EC50mL/667m^2、5%Regent SC30mL/667m^2、80%Regent WG2g/667m^2和3g/667m^2的处理均可在大面积生产上应用,但Regent对纵卷叶螟的速效性稍差,最好应与速效药剂进行复配,防治效果会更佳.  相似文献