红麻6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PDGH)基因克隆及RNAi载体构建          下载免费PDF全文

黄志鹏  赵艳红  明庭会  余明丽  冉珊敏  钱景华  周瑞阳  陈鹏 《南方农业学报》2014,45(12):2110-2116

[目的]克隆红麻不育系和保持系6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PDGH)基因,并构建其RNAi载体,为进一步研究其在红麻花药发育中的功能奠定基础.[方法]根据红麻花药转录组高通量测序数据结果和生物信息学方法获得6PDGH基因全长cDNA拼接序列,分别以红麻不育系(P3A)和保持系(P3B)的花药反转录cDNA及总DNA为模板克隆红麻6PGDH基因全长.依据RNAi载体设计原则,选取红麻6PGDH基因cDNA序列中段389bp的特异片段做为RNA干扰片段,构建红麻6PGDH因的RNAi载体.[结果]克隆获得的红麻不育系(P3A)和保持系(P3B)花药6PGDH基因全长均为1751 bp,均包含1458bp的开放阅读框,编码485个氨基酸残基,无内含子;其碱基序列在不育系和保持系中仅存在两个碱基差异.该基因氨基酸序列(GenBank登录号KF964027)与拟南芥、玉米、大豆、苜蓿、三角叶杨、蓖麻的6PDGH同源性分别为75.07%、84.57%、86.50%、87.24%、91.19%和92.01%.成功构建了红麻6PGDH基因的RNAi载体,获得了干扰表达载体pART27-pKANNIBAL-R1+2.[结论]成功克隆获得红麻6PGDH基因全长序列,构建的干扰表达载体可用于红麻6PGDH基因的功能研究.  相似文献   

水旱轮作条件下花生品种筛选及土壤特性变化分析          下载免费PDF全文

高忠奎  蒋菁  唐秀梅  刘菁  钟瑞春  韩柱强  熊发前  黄志鹏  吴海宁  李战  贺梁琼  唐荣华 《南方农业学报》2018,49(12):2403-2409

[目的]筛选适合水旱轮作的花生品种并探讨水旱轮作对土壤微生态环境及肥力变化的影响,为推广水稻—花生水旱轮作耕作模式及南方可持续生态农业发展提供技术支撑.[方法]2015—2017年在广西北流市西琅镇试验基地对7个不同花生品种与水稻进行水旱轮作种植,田间调查花生的农艺性状及抗病性,收获后测定经济及品质性状,并对土壤的微生物数量、pH、有机质和主要养分等环境生态因子进行分析.[结果]水旱轮作条件下,桂花39株型紧凑,抗病性、抗倒伏性强,耐肥水,有效分枝数较多,单株结果数、单株产量、荚果饱满率和产量均最高,优势明显;其次是桂花99,其侧枝长,总分枝数、有效分枝数多,产量较高,较适合与水稻轮作;桂花36生长势强、出仁率最高,产量较高.与水稻连作相比,水稻—花生轮作土壤的细菌和放线菌数量分别显著提高55.67%和65.13%(P<0.05,下同),真菌数量则显著降低33.98%;水旱轮作可使土壤pH向中性移动,同时土壤的有机质(30.32%)、全氮(3.17 g/kg)、全磷(1.09 g/kg)、全钾(15.18 g/kg)、碱解氮(133.7 mg/kg)、速效磷(23.2 mg/kg)和速效钾(120.4 mg/kg)含量也均高于水稻连作土壤.[结论]桂花39、桂花99和桂花36适合与水稻进行水旱轮作种植,其中以桂花39表现最佳;水旱轮作有助于改善土壤结构、提高土壤肥力及减少花生病害.  相似文献   

添加剂对苏云金杆菌发酵液杀虫效果的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

邱思鑫  黄志鹏  黄必旺  关雄 《中国生物防治》2002,18(2):62-66

从 8 2种添加剂中筛选出 1 2种有较好增效作用的物质进行不同浓度对Bt杀虫效果影响和较佳浓度下的增效倍数测定表明 ,各添加剂的浓度对Bt杀虫效果影响差异显著 ,在 1 0 g/L的剂量以下多数添加剂的增效作用随剂量的增加而增强。添加剂 2号、碳酸钾、硼酸 3种物质的增效作用明显 ,增效倍数分别达 2 .774 3、2 .0 90 0、2 .781 7倍 ;乙酸钙、乙酸钠、硫酸亚铁等9种物质的增效倍数达 0 .4 378～ 1 .972 3倍  相似文献   

大肠杆菌中的表达     

黄天培  陈文  潘洁茹  黄志鹏  关雄 《中国农学通报》2008,24(9)

 在大肠杆菌中表达苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,简称Bt）cry2Ac4基因;笔者以含有Bt WB9菌株cry2Ac4基因的质粒pMD2Ac为模板,利用cry2Ac4基因的特异引物对(ET-F/ET-R)扩增获得该基因,进而将cry2Ac4基因与pET-29a原核表达载体连接;成功构建了重组表达载体并转化大肠杆菌JM109,从阳性转化子中提取重组表达质粒pET-29a-cry2Ac4,再转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS,经IPTG诱导后,对诱导表达产物进行了SDS-PAGE检测;cry2Ac4基因编码的约70kDa蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达。  相似文献   

苏云金芽胞杆菌不同分化发育时期总RNA的有效分离   总被引：1，自引：0，他引：1  

李今煜  黄天培  潘洁茹  洪永聪  黄志鹏  关雄 《中国农学通报》2008,24(2):348-352

将苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,简称Bt）8010在LB液体培养基30℃、230r／min下振荡培养,通过生长曲线测定（OD600）和显微镜观察,分别在8、30、39、42h和46h取样得到营养生长期、孢子囊期和裂解期样品来提取总RNA。通过对试剂提取方法的改进,找到一种方法可以很有效的提取Bt3个不同分化发育时期（营养生长期、孢子囊期和裂解期）的总RNA。提取的总RNA质量很好,可以进行cDNA合成、RT-PCR和转录组学研究等下游实验。  相似文献   

电穿孔法用于大肠杆菌和苏云金杆菌的转化及质粒消除     

黄必旺  黄志鹏  关雄 《福建农林大学学报(自然科学版)》1999,28(1):43-46

利用电脉冲将质粒pHT3101和pHE－4D分别转入了大肠杆菌和苏云金杆菌,结果显示大肠杆菌DNA的转化率（转化子）为104～105·μg－1,苏云金杆菌的DNA的转化率（转化子）为102～103·μg－1．同时利用该法消除了Escherichiacoli菌株TG1和Bt菌株ISP78／11中的pHT3101质粒,消除率分别为88．6％和66．4％．比较了转化和质粒消除的条件并构建了一个工程菌．  相似文献   

TA-BR生物药肥的研制及在茶叶生产中的应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

张灵玲  姚凤銮  黄志鹏  吴光远  王庆森  徐金汉  关雄 《茶叶科学》2004,24(3):219-225

茶树喷施生物药肥后,质量和产量均明显提高,鲜叶亩产量增幅为6.76%~26.90%,酚氨比明显降低,水浸出物、水溶性糖及维生素C均有所增加。同时,生物药肥对茶毛虫、茶尺蠖和茶蚕等茶树主要鳞翅目害虫的防治效果可达90%以上,对天敌安全。  相似文献   

花生的一种高效育种和种植方法     

熊发前  钟瑞春  韩柱强  贺梁琼  刘俊仙  蒋菁  唐秀梅  黄志鹏  吴海宁  刘菁  唐荣华 《农业与技术》2018,(11)

花生是世界上重要的油料作物和经济作物,也是重要的植物食用油来源之一。本文笔者在对花生育种取得突破的途径、花生育种方法进行综述的基础上,提出了花生的一种高效育种和种植方法,大大地提高了花生选种和育种效率,以期为相关花生育种科研人员提供理论参考和技术借鉴。  相似文献   

不同烘烤工艺下烟叶在醇化过程中外观质量和内在成分变化规律研究     

赵高坤  崔国民  黄维  郑智云  黄志鹏 《安徽农业科学》2012,40(26):13097-13099

[目的]找出烟叶在醇化过程中外观质量和烟叶内总植物碱、总糖、总氮和钾离子等化学成分变化规律。[方法]采用不同的烘烤工艺对烟叶进行烘烤,烘烤结束后取样进行醇化试验研究,探索烟叶在醇化过程中外观质量和内在成分的变化。[结果]在醇化过程中,中温中湿烘烤工艺对烟叶颜色和油分稍有影响,对成熟度、身份和色度等外观质量影响较小,其他烘烤工艺对其外观质量均影响较小;3种烘烤工艺对烟叶总植物碱和总糖含量变化影响较小;T2烘烤工艺下烟叶还原糖含量变化呈上升趋势,3种烘烤工艺下烟叶总氮含量变化呈上升趋势;T3烘烤工艺对烟叶钾离子含量影响较大;T2和T3烘烤工艺对烟叶氯离子含量影响较大。[结论]应针对不同的卷烟配方需求,选取适宜的烘烤工艺,使烟叶有较好的外观质量和较优的内在成分,提升全国烟叶卷烟上水平。  相似文献   

苏云金杆菌发酵培养基配方优化   总被引：2，自引：0，他引：2       下载免费PDF全文

陈锦权  关雄  黄志鹏 《农业工程学报》1997,13(1):223-224

苏云金杆菌发酵培养基配方优化＊陈锦权①关雄黄志鹏（福建农业大学）苏云金杆菌（Ｂｔ）是最重要的生物杀虫剂之一，生产上采用深层发酵法生产Ｂｔ杀虫剂，选用材料是以价格便宜的工农业生产副产物作为发酵培养基的主要成分，如豆饼粉、花生饼粉、麸皮、玉米粉、鱼粉、废...  相似文献