嗜水气单胞菌 β-hemA 重组菌的优化培养及其生长曲线的测定   总被引：3，自引：0，他引：3  

方勤美  林天龙  龚晖  陈红燕  陈日升  欧阳岁东 《福建畜牧兽医》2003,25(Z1):6-7

用正交试验探讨温度、培养基、时间三个因素对嗜水气单胞菌β-hemA重组菌E.coliDH5α(PCB)基因产物表达量的影响,通过优化培养,选择最佳培养条件,显著提高了β的溶血素基因(β-hemolysisgene,β-hemA)产物的产量。实验结果表明:该重组菌株在100mlTSB(添加0.05%酵母浸提物,1.8μg/mlZnCl2),37℃培养30h收获,其毒素蛋白含量为3258μg,毒素溶血价为17.44hu/μg,而在LB(100ml)和营养肉汤(100ml)中最高蛋白量和溶血活性分别为1260μg,14hu/μg和1199μg,8.22hu/μg。所选择的三个因子中对毒素蛋白质含量影响最大的是培养基,其次是温度;而对溶血素影响最大的则是温度,其次为时间。最佳生长曲线测定结果表明,在培养基预热至37℃的情况下,PCB6h能进入对数期。  相似文献   

欧洲鳗鳗苗丙线磷中毒的诊治报告     

林天龙  许斌福  龚晖  俞伏松  杨金先  陈强 《水产科技情报》1999,26(2):62-63

环境中的有机磷（１０％丙线磷）进入鳗苗体内后能与胆碱酯酶结合，使该酶的活性下降，出现一系列胆碱反应系统临床表现。碘解磷定可使钝化的胆碱酯酶复活；硫酸阿托品可解除毒蕈碱样症状，掌握好这两种复活剂的用量，可以控制病情  相似文献   

欧洲鳗(精养池)规范化养殖技术操作规程(二)     

涂杰峰  郭根和  龚晖  林香信  钱午巧  林虬 《福建农业科技》1999,(2):41-42

5 主要疾病防治 5.1 仪器设备 养鳗场要配备显微镜、解剖镜及相应的工具和试剂.配备水质测定(pH、NH+4-N、NO2-2-N、溶解氧等)的简易仪器和试剂.  相似文献   

鳗源创伤弧菌的鉴定与血清型分析     

许斌福  龚晖  李素一  方冬兰 《福建水产》2016,(5):351-356

本研究对分离自发病鳗鲡的疑似创伤弧菌进行鉴定及血清型分析,经生化鉴定,从发病鳗鲡中得到7株创伤弧菌;设计了创伤弧菌溶血素基因(vlly)特异性引物,并对分离菌进行了PCR检测,创伤弧菌均可扩增出溶血素基因352 bp的目标片段,而非创伤弧菌未扩增出相应的片段;制备了创伤弧菌抗O抗原血清,凝集反应显示所得到的鳗源创伤弧菌抗O抗原血清不能与人源创伤弧菌1.1758发生凝集反应,菌株FJ03-X2抗O抗原血清可与大部分的鳗源创伤弧菌发生凝集反应。以上研究结果表明,基于溶血素基因设计的PCR引物具有良好的特异性,可用于创伤弧菌检测,鳗源创伤弧菌血清型不同于其他来源的创伤弧菌,菌株FJ03-X2的O抗原具有良好的免疫原性,可作为创伤弧菌疫苗研发的候选菌株。  相似文献   

鱼源气单胞菌的分离鉴定及血清学调查   总被引：6，自引：0，他引：6  

董传甫  林天龙  俞伏松  陈日升  龚晖  陈振海 《水利渔业》2004,24(6):78-81

应用生化鉴定和PCR技术对1999～2001年主要分离自福建省患典型败血症鳗鲡的气单胞菌进行精细的鉴定，结果共得到气单胞菌115株，其中嗜水气单胞菌69株，温和气单胞菌29株，豚鼠气单胞菌2株和未定种气单胞菌15株。45株可被典型分型于5个主要血清型；福建鳖源嗜水气单胞菌优势血清型为O：Ah10501，鳗源气单胞菌分离株主要分布于0：Ahl0501、O：YT-1、0：CHS-3和O：CQ-1等4个血清型。非福建分离株则集中分布在O：Ah9617(0：9)。LPSs免疫印迹法既能用于不同血清型菌株脂多糖的结构分析，又能对常规血清学分型结果进行校正，其结果更直观、准确。  相似文献   

宁德地区大黄鱼内脏结节病的流行病学调查     

许斌福  王凡  陈永聪  黄晓凤  龚晖 《福建畜牧兽医》2017,39(1)

本文调查分析了宁德地区大黄鱼内脏结节病的流行规律。结果表明,该病与水温、养殖密度和饵料有关;恶臭假单胞菌是内脏结节病的病原;该菌对强力霉素、土霉素等较敏感。  相似文献   

鳗源嗜水气单胞菌β—溶血素基因的克隆及表达   总被引：7，自引：2，他引：7       下载免费PDF全文

龚晖 《水产学报》2003,27(2):124-130

应用PCR技术,从1株鳗源嗜水气单胞菌ML316中扩增得到β 溶血素基因AHL316HEM,将AHL316HEM克隆到pGEM TEasyVector,经分析验证后重组到pcDNA3.0中,构建了重组质粒PDLH。转化重组质粒PDLH的大肠杆菌(Escherichiacoli)DH5α能在血琼脂培养皿中形成明显的β 溶血斑,重组菌纯化的胞外产物溶血价为1.28×104HU·mg-1,同时重组菌的胞外产物能被原始菌株的高免血清特异性地识别。结果证实,克隆到鳗源嗜水气单胞菌β 溶血素基因,重组质粒PDLH能够表达具有天然生物学活性的β 溶血素,为构建嗜水气单胞菌核酸疫苗奠定了基础。  相似文献   

欧洲鳗败血症的诊治   总被引：2，自引：0，他引：2       下载免费PDF全文

龚晖  杨金先  许斌福  俞伏松  陈强  林天龙 《水产科技情报》2001,28(3):115-116

鳗鲡是水产大省福建的主要养殖对象 ,是福建省的四大出口支柱产业之一。我国于 2 0世纪90年代初开始大规模引进欧洲鳗 ,由于异地饲养及养殖池老化等原因 ,欧洲鳗疾病发生率逐年上升 ,其中以败血症感染率最高 ,危害最大。据统计 ,福建省的鳗鲡养殖场 ,1 998年欧洲鳗败血症的感染率在 5 0 %左右 ,死亡率 5 %～ 1 0 % ;1 999年的感染率在 70 %左右 ,死亡率 8%～ 1 5 % ;2 0 0 0年 4月至 7月的感染率达 80 %左右 ,死亡率 5 %～3 0 % ,仅福州长乐地区 2 0 0 0年因败血症而死亡的欧鳗就达 3 5 0万尾。由于对该病的流行病学不甚了解 ,欧洲鳗发病后…  相似文献   

创伤弧菌外膜蛋白的分离及其抗原性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

田丁  林天龙  许斌福  龚晖 《福建农业学报》2008,23(4)

分别采用Sarkosyl和PMSF法分离、提取鳗源创伤弧菌FJ03-X2的外膜蛋白,并应用SDS-PAGE和Western-blotting分析比较两种方法提取的外膜蛋白的组分和抗原性。SDS-PAGE分析结果表明,Sarkosyl法分离的主要外膜蛋白分子量集中在14～66 kDa之间;而PMSF法分离的主要外膜蛋白分子量分布在14～92 kDa之间。在两种方法中,分子量38 kDa、36 kDa的外膜蛋白均为高丰度蛋白。两种方法提取的创伤弧菌外膜蛋白经SDS-PAGE后,用兔抗创伤弧菌FJ03-X2血清进行Western-blotting,结果显示,兔抗FJ03-X2高免血清能识别绝大多数外膜蛋白组分,说明FJ03-X2菌株的外膜蛋白具有良好的抗原性。其中,分子量分别为66kDa、47 kDa、44 kDa、38 kDa、36 kDa、34 kDa的外膜蛋白呈强阳性反应,是主要的免疫原组分。同时,经比较分析认为PMSF法提取创伤弧菌外膜蛋白的效果更好。  相似文献   

重组小瓜虫抑动抗原表达产物的纯化及其免疫学特性分析     

柯翎  陈如敬  杨金先  陈强  刘晓东  龚晖 《福建农业学报》2008,23(1):6-10

培养表达小瓜虫抑动抗原的重组四膜虫(Tetrahymena thermophila)G1株,诱导表达小瓜虫的抑动抗原,采用非离子型去污剂Triton X-114提取虫体膜蛋白,然后通过亲和层析法纯化抑动抗原。采用ELISA、SDS-PAGE和Western Blotting分析所提取的抑动抗原的纯度及免疫学特性。结果表明:通过亲和层析能够得到重组四膜虫所表达的G1抑动抗原蛋白,它与相应血清型小瓜虫抑动抗原的分子量和免疫原性相近,其分子量为44 kDa(还原条件)或36 kDa(非还原条件)。  相似文献