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将含不同浓度三七总皂甙(PNS)的饲料(0、10、50、250 mg·kg-1)连续14 d投喂大黄鱼,检测肝、脾、头肾组织部分免疫相关基因的表达,以及血清部分免疫因子的活性,结合人工注射感染变形假单胞菌的抵抗力,评估口服PNS对大黄鱼免疫功能的影响。实验结果显示,各浓度组大黄鱼血清超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LZM)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(ALP)活性与对照组相比无显著差异;高浓度组(250 mg·kg-1)大黄鱼脾组织粘病毒抗性蛋白(Mx)的相对表达水平显著高于对照组,中浓度组(50 mg·kg-1)脾组织和低浓度组(10 mg·kg-1)头肾组织的Mx相对表达水平略高于对照组,但差异不显著;各浓度组各组织肿瘤坏死因子α链(TNF-α)的相对表达水平与对照组无显著差异,但均低于对照组;各浓度组各组织中白细胞介素10(IL-10)和主要组织相容性复合体Ⅱ类α链(MHCⅡ-α)的相对表达水平与对照组无显著差异。感染变形假单胞菌后各浓度组大黄鱼的死亡率与对照组无显著差异。结果表明,饲料中添加10~250 mg·kg-1的PNS连续投喂14 d未能明显增强大黄鱼免疫机能。 相似文献
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欧鳗源嗜水气单胞菌β-溶血素基因序列分析 总被引：3，自引：1，他引：3
对克隆的欧鳗源嗜水气单胞菌β一溶血素基因AHL316HEM进行序列和结构分析表明，AHL316HEM基因读码框架全长为1482bp，编码长度为493个氨基酸的蛋白，分子量为54．2kD，等电点为5．625，读码框架内有一个EcoRI酶切位点。AHL316HEM从起始位点至第23个氨基酸残基形成一明显疏水区，可能构成信号肽，其抗原位点大部分都在亲水区，不具穿膜性。同源性分析表明，AHL316HEM基因编码的氨基酸序列与已报道的嗜水气单胞菌溶血素基因(accessionNo．BAA83088)的同源率为98％，与斑点气单胞菌溶血素基因(accessionNo．U40711)、温和气单胞菌溶血素基因(accessionNo．AF443393)的同源串分别为84％和72％，与霍乱弧菌溶血素基因(accessionNo．AF540655)、副溶血弧菌溶血素基因(accessionNo．VIBTRH2A)、金黄葡萄球菌β—溶血素基因(accessionNo．S72497)的同源性分别为7％、5％和4％。这一结果提示，气单胞菌属内各菌种的溶血素基因可能有共同的起源。 相似文献
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用十二烷酰肌氨酸盐抽提结合超速离心纯化，制备了19株典型嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila)和1株温和气单胞菌（A.sobria)的主要外膜蛋白（MOMP）。根据SDS-PAGE图谱，将其中的14株菌分为3个MOMP组，I组的主要蛋白带为40kD和43kD，Ⅱ组的主要蛋白带为40kD和50kD,Ⅲ组的主要蛋白为40kD、46kD和50kD.MOMP组和血清型间没有严格的关系。用兔抗嗜水气单胞菌体抗原为第一抗体进行免疫印迹实验。结果显示，所有被试菌株都能产生强阳性反应，其中40kD的蛋白带为大多数菌株所共有，且具有相似的免疫原性，是构成菌体抗原的重要免疫原。用0.2mol/L甘氨酸缓冲液（pH4.0)处理上述菌株培养物，结果仅有嗜水气单胞菌ZY01-g3能够分离到丰富的S层样蛋白，其分子量约为52kD，而分子量约为52kD，而其他菌株未能分离到典型的S层样蛋白，表明S层蛋白的分布有限。 相似文献
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喹乙醇 (Olaquindox)又名倍育诺 (Bay On Ox)、喹酰胺醇、快育灵 ,属喹口恶啉类化合物 ,具有广谱抗菌、促进动物生长、提高饲料转化率的作用 ;同时又具有用量较少、价格便宜、不易产生耐药性等优点 ,故在畜禽养殖中得到广泛应用。主要用作饲料添加剂 ,一般推荐用量 :家畜 5 0～1 0 0 mg/g,家禽 2 5～ 3 5 mg/g、鱼类 5 0～ 80 mg/g[1 - 3] 。近年来 ,喹乙醇被作为抗菌促生长药物推广应用到水产动物养殖业 ,但喹乙醇的有效剂量与中毒剂量相差很小 ,尤其是在用户不了解喹乙醇有效成分含量的情况下 ,一旦操作失误 ,极易引发中毒事件。一、事… 相似文献
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一株牛蛙源虹彩病毒的分离及鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
用鲤鱼表皮瘤细胞系(epithelioma papulosum cyprini cell line,EPC)从福建省某美洲牛蛙养殖场分离到一株病毒FJ049。感染病毒的EPC呈现细胞圆缩、颗粒增多、脱落等特征性病变。间接免疫荧光检测结果表明,感染FJ049的EPC细胞与虹彩病毒单克隆抗体反应并出现特异性的胞浆荧光。采用PCR对虹彩病毒主衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因保守区域进行扩增,扩增出531 bp的特异性基因片段。MCP基因同源性和遗传进化分析结果表明分离株FJ049与沼泽绿牛蛙虹彩病毒RGV9808的核苷酸同源性最高,为99.8%,属于虹彩病毒科蛙病毒属。 相似文献
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鳗鲡疱疹病毒的分离与鉴定 总被引：4，自引：3，他引：1
为获知鳗鲡"脱粘败血病"与病毒的关系,实验用蔗糖密度梯度离心的方法从发病的欧洲鳗鲡内脏器官组织匀浆液中纯化了病毒粒子,负染后利用电镜观察;进一步用EO细胞对病毒进行了分离、培养,并对感染病毒的细胞进行超薄切片,电镜观察;然后,提取病毒DNA,利用鳗鲡疱疹病毒的PCR检测方法对其进行了鉴定。结果显示,接种匀浆上清液的EO细胞出现细胞融合的病变效应;分离病毒的病毒粒子具囊膜,大小约为200 nm;从感染病毒的细胞上清液DNA中扩增出特异性条带,序列测定与比对分析表明,该序列与鳗鲡疱疹病毒欧洲株(AngHV-1)的序列完全一致。研究表明,利用EO细胞分离了一株鳗鲡病毒,经形态观察和DNA分析,确认该病毒为鳗鲡疱疹病毒,命名为AngHV-FJ。该研究为深入开展鳗鲡疱疹病毒的致病机制及鳗鲡"脱粘败血病"的防控研究奠定了重要基础。 相似文献
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含嗜水气单胞菌气溶素的免疫刺激复合物的制备及其对欧洲鳗的免疫效果 总被引：1，自引：0，他引：1
将嗜水气单胞菌气溶素(AerA)基因定向连接到pET-32a(+)表达载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）,SDS-PAGE分析表明,硫氧还蛋白-气溶素融合蛋白（Trx-AerA）表达量占重组菌总蛋白量的65.5%。将上述融合蛋白与商品化的QuilA混合,分别添加Mega-10、卵磷脂、胆固醇获得Trx-AerA ISCO Ms。其中同时添加Mega-10、卵磷脂、胆固醇组蛋白质回收率最高为10.46%,仅添加QuilA组蛋白回收率为1.82%,两者差异显著（P＜0.05）。分别采用Trx-AerA、Trx-AerA ISCOMs、Trx ISCOMs经腹腔注射免疫欧洲鳗,免疫30d后,每个实验组取5尾实验鱼采集血清,按1：200稀释通过ELSIA法检测抗体水平,同时采用菌数为2.0×106CFU的嗜水气单胞菌ZN1株进行攻击,测定免疫效力。结果显示：Trx-AerA免疫组相对保护率为0%（3/15）,Trx-AerA ISCOMs免疫组为83.3%（13/15）,Trx ISCOMs免疫组为50%（9/15）; 3个免疫组针对气溶素的特异性抗体水平OD450值分别为0.19,0.52,0.36,Trx-AerA ISCOMs免疫组、Trx-AerA免疫组显著高于Trx ISCOMs免疫组（P＜0.05）。结果表明影响嗜水气单胞菌免疫效力的除了气溶素的抗体水平外,ISCOMs等也能够增强非特异性免疫保护应答。 相似文献
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近年来淡水纤毛虫嗜热四膜虫成为新的重组亚单位疫苗生产平台。为了进一步提高重组四膜虫的筛选效率,使其能更广泛地应用于重组亚单位疫苗制备,本研究利用基因工程手段,改造了原有的表达载体,把带有巴龙霉素抗性的neo基因换成嘌呤霉素抗性表达盒,从而提高重组四膜虫的筛选效率,达到优化表达载体的目的,同时将常用的氯化镉诱导的MTT1启动子替换成HSP70启动子,实现热诱导表达,为嗜热四膜虫表达平台在重组亚单位疫苗的进一步应用奠定基础。 相似文献