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为了检测确定2019年5月河南某规模化猪场一栋保育仔猪发病猪群的病原,本研究从送检的发病猪关节液中分离获得1株细菌。通过细菌纯化培养、革兰氏染色、形态学观察及猪链球菌gdh基因PCR扩增,确定该分离菌株为猪链球菌。用猪链球菌分型引物对该菌株进行PCR扩增分型鉴定及软件比对分析,结果表明该分离菌株为猪链球菌14型,与猪链球菌JS14株(GenBank登录号:CP002465.1)同源性为100%。毒力基因检测结果表明,该菌株的同时携带有epf、mrp、sly、fbps、orf2毒力基因,属于高致病性菌株。小鼠致病性试验结果也证明该菌株是一株高致病性猪链球菌。药物敏感性试验结果显示,该菌株对β内酰胺类和喹诺酮类药物敏感,对氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类和磺胺类高度耐药,表现出多重耐药现象。对该菌株进行5大类24种耐药基因检测,该菌株同时携带有blaTEM、aadA1、strA、strB、aacC2、aphA1、tet(B)、gyrA、parC、sul2耐药基因。该研究为后续进一步开展猪链球菌14型流行特点和致病机制研究奠定了基础,为猪链球菌14型临床防控提供了理论依据,同时具有重要的公共卫生意义。 相似文献
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随着知识经济和经济全球化的发展,知识产权成为建设创新型国家的重要支撑。高校作为国家科技创新体系中的重要组成部分,每年的专利申请量和授权量逐年增加,成为衡量高校科研实力和创新能力的重要指标之一。文章以云南省22所高校专利产出为研究对象,利用SooPAT专利搜索引擎中的专利分析,对1985年《专利法》实施以来云南省本科院校申请的专利从专利数量、年代分布、类型及发明授权专利、合作申请机构、技术领域等方面进行统计,从量化角度对高校科技创新能力进行分析,并针对高校专利现状提出对策建议。 相似文献
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旋毛虫肌幼虫RNA的提取及目的基因的PCR扩增 总被引:9,自引:0,他引:9
用改进的AGPC法成功地提取出旋毛虫肌幼虫总RNA。每0.1ml压积虫体可获得100μg的RNA,其A260与A280及A260与A230的比值均接近于2,变性琼脂糖凝胶电泳显示,旋毛虫肌幼虫总RNA缺少大部分真核生物所具有的28S rRNA.通过比较研究,筛选出理想的虫体处理方法。用聚合酶链式反应直接从总RNA中进行目的基因的扩增,得到一分子量为0.7kd的DNA。通过限制性内切酶对其消化鉴定, 相似文献
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苏北垦区豆田杂草分属15科,36属,41种,恶性杂草有稗,苍耳等9种。在大豆整个生育期间通常出现1~2个萌发高峰,主要集中在6月中旬~7月下旬。杂草种子于8~10月成熟。种子在土壤中的埋深及出苗期,直接影响杂草的出苗和繁殖。杂草与大豆的相互竞争,以在大豆播种一个月后最为剧烈。0~2cm和6~25cm耕层中贮葳的杂草种子最多。 相似文献
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表达猪Viperin蛋白重组腺病毒的构建及其对PRRSV复制的抑制作用 总被引:1,自引:0,他引:1
为研究猪Viperin蛋白对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制的抑制作用,通过RTPCR方法扩增猪Viperin基因,并克隆入腺病毒穿梭载体p Ad Track-CMV,经菌液PCR、酶切鉴定后进行测序。将PmeⅠ内切酶线性化的重组穿梭载体质粒(p Ad Track-s VIP)电转化大肠杆菌BJ5183,与腺病毒骨架载体p Ad Easy-1进行同源重组,提取重组后的腺病毒质粒,经内切酶PacⅠ线性化后转染HEK-293A细胞,装配成完整的病毒粒子r Ad-s VIP。重组腺病毒r Ad-s VIP感染细胞后,可见绿色荧光蛋白的表达。RT-PCR、Western blot检测结果表明,重组腺病毒r Ad-s VIP可正确表达猪Viperin蛋白,且表达的猪Viperin蛋白具有良好的反应原性,对PRRSV的复制具有明显的抑制作用。 相似文献
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猪接触性传染性胸膜肺炎(porcine contagious pleuropneumonia,PCP)又称坏死性胸膜肺炎,是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种高度接触传染性、致死性呼吸道传染病。以急性出血性纤维素性肺炎和慢性纤维素性坏死性胸膜炎为主要特征。各种年龄、性别的猪对本病均易感,急性者死亡率高,慢性者常能耐过。猪传染性胸膜肺炎放线杆菌有15个血清型,不同血清型之间没有或仅有较弱的交叉保护作用,这给猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的诊断防治和免疫预防带来了很大的困难。因此建立一种快速血清型分子鉴定方法尤为重要。为了快速、简便的建立猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型分子鉴定的方法,本研究所从临床发病疑似病例猪肺脏和气管中分离到的放线杆菌,首先经过血清型鉴定,确定部分血清型为2型,为了确定血清型鉴定的准确性,在此基础上,采用分子鉴定的方法,对这些菌株进行鉴定,确定分离到的11株菌为猪胸膜肺炎放线杆菌血清2型。这为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型分子鉴定及防治提供了理论依据,为今后临床血清型定型提供了一种简便方法。 相似文献