家鸡Leptin成熟肽cDNA的克隆、重组蛋白表达及纯化   总被引：4，自引：0，他引：4  

施振旦  邵西兵  方梅霞  于迎春  刘颖  陈楠 《中国兽医学报》2004,24(3):258-260

从 18周龄鸡卵巢组织中抽提总 RNA,使用六聚体随机引物反转录后 ,用鸡 L eptin(瘦素 )特异性引物扩增出鸡L eptin编码区第 5 2～ 4 6 0 bp的长度为 4 0 9bp的 c DNA片段。根据鸡 L eptin的 3′端第 4 6 0～ 4 92 bp序列设计了 3条部分相互重叠并且顺序串联延伸的下游反义引物 ,并在最后 1条引物 3′端连接上 Eco R 切点 ;在以上用于反转录扩增的 5′端引物的 5′端连接一 Bam H 切点。用该 5′端引物分别与 3个 3′端引物配对 ,利用反转录扩增出的 4 0 9bp的L eptin c DNA片段作为第 1模板进行扩增 ,扩增产物再作为模板与下一引物对再次扩增。经 3次扩增得到编码鸡 L ep-tin成熟肽的全长 4 5 1bp的 c DNA序列。将该 4 5 1bp的 L eptin c DNA序列经 Bam H 和 Eco R 双酶切后 ,克隆入表达质粒 p RSET A的 Bam H 和 Eco R 两酶切位点之间 ,构建成表达质粒 p L ep- SCAU。转化有重组表达质粒 p L ep-SCAU的大肠杆菌 BL 2 1(DE3)在 L B培养基中培养后 ,经 IPTG诱导表达出相对分子质量为 2 0 10 0的鸡 L eptin融合蛋白和少量 4 0 2 0 0的 L eptin融合蛋白。L eptin融合蛋白的表达在 IPTG浓度为 0 .0 5 mmol/ L 时达到最高 ,占总菌体蛋白的 32 .6 %。用 Ni- NTA凝胶从 7L 发酵培养菌裂解液中纯化出 180 m g左右  相似文献   

大肠杆菌新型菌毛(F1987)的基因定位     

房海  陈翠珍  于凤鸣  张晓君  巩元芳  马建军 《中国兽医学报》2004,24(6):558-560

对动物产肠毒素性大肠杆菌 (ETEC)的一种新型菌毛 (F1987)进行了相应基因的定位研究 ,通过对表达该新型菌毛 (F1987)相应 ETEC菌株的培养、质粒提取、对大肠杆菌受体菌株 DH5α的转化及阳性转化子筛选与相应菌毛表达的检定等 ,初步表明该新型菌毛 (F1987)的基因定位于质粒上  相似文献   

3周龄断奶仔猪胰酶发育规律的研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

于旭华  冯定远  汪儆 《中国畜牧杂志》2004,40(2):8-10

以 3周龄断奶仔猪为试验材料 ,研究了断奶对仔猪胰酶活性的影响。试验表明 ,3周龄断奶可以显著降低仔猪胰脏中胰淀粉酶、胰蛋白酶、胰糜蛋白酶和胰脂肪酶的活性 ,且在断奶后 2周继续维持断奶时水平。断奶降低了小肠内容物中胰淀粉酶和胰脂肪酶的活性 ,但空肠和回肠胰蛋白酶、胰糜蛋白酶的活性在断奶后并未下降。  相似文献   

洛南县秦川牛改良山地黄牛调查报告     

管君堂  王国防  宋新良  余永治  宋波 《中国牛业科学》2004,30(4):59-62

秦川牛是我国著名地方良种黄牛 ,我县从 2 0世纪 5 0年代开始引进秦川种公牛改良当地黄牛 ,2 0世纪 70年代末推广牛的冷配技术 ,引进秦川种公牛冷冻精液颗粒、细管 ,坚持本交与人工授精相结合。全县累计引进秦川牛 670 0多头 ,改良配种 9.0 1万头 ,产改良牛 6.5 8万头。秦川牛的引进 ,丰富了我县黄牛遗传基因库 ,优化了牛群整体结构 ,改良效果明显 ,社会经济效益显著  相似文献   

大熊猫犬冠状病毒的分离与鉴定   总被引：11，自引：2，他引：11  

胡桂学  高凤山  高玉伟  夏咸柱  柏亚铎  余春 《畜牧兽医学报》2004,35(2):202-207

以犬肾传代细胞(MDCK)从1只病死大熊猫肝脏中分离到1株病毒,命名为DXMV。电镜观察磷钨酸负染的病毒细胞培养物，发现冠状病毒样粒子，超薄切片上可见细胞浆内病毒包涵体。理化学和生物学鉴定结果表明，DXMV核酸类型为RNA，对氯仿、乙醚敏感，可耐受1％胰蛋白酶的作用，具有一定的耐酸性和耐热性，可在MDCK、FCWF、F81细胞中增殖，无血凝性和血吸附特性。血清中和试验结果表明，DXMV可被犬冠状病毒阳性血清中和。采用犬冠状病毒间接荧光抗体法染色DXMV细胞飞片，可在细胞浆内见到特异性荧光。以冠状病毒通用引物和犬冠状病毒特异性引物，可从大熊猫肝脏和不同代次的病毒细胞培养物中扩增出与预期值251bp和515bp大小相同的核苷酸片段。由此说明，该病毒为犬冠状病毒，大熊猫可被犬冠状病毒感染。  相似文献   

鸭疫里氏杆菌形态特征的电镜观察   总被引：8，自引：0，他引：8  

韦强  鲍国连  季权安  俞坚群  盛楚江  章红兵 《畜牧兽医学报》2004,35(3):314-317

自鸭传染性浆膜炎的病死鸭中分离鉴定的鸭疫里氏杆菌(RA)Ⅰ、Ⅱ型两个菌株，用负染法和超薄切片法制备样品，于透射电镜下进行观察。结果观察到约占1／3的RA具有特殊的形态结构：在细菌的顶端或侧面有1～2个与菌体相连的芽状赘生物，有的也能从菌体上脱落下来。它在超薄切片中的大小约为菌体的1／3～1／5，能观察到其内部也具有类似菌体内部的结构。且具有类似菌体的“细胞壁”，类似于核体部分的结构位于“细胞壁”的一侧。而用相同的方法制作的鸭大肠杆菌(E．cozi)对照样品，却见不到这种特殊的形态结构。说明这种形态特征可能是RA特有的。  相似文献   

浙江地区不同品种紫花苜蓿不同刈割期二茬性状表现   总被引：2，自引：2，他引：2  

王亚琴  孙红霞  鲍明道  陈维虎  李德安  石吉天  俞照正  罗志豹  刘永刚 《草业科学》2005,22(9):41-44

对不同秋眠级别的紫花苜蓿Medicago sativa品种进行适应性试验,研究不同品种不同刈割期株高、分蘖数、根系、茎叶比及生物学产量间的变化,为生产推广提供指导.  相似文献   

草地生态系统碳循环研究进展   总被引：16，自引：3，他引：16  

钟华平  樊江文  于贵瑞  韩彬  胡中民  岳燕珍  梁飚 《草地学报》2005,13(Z1):67-73

随着全球气候变化和陆地生态系统碳循环研究的发展,碳循环正成为草地生态系统研究的热点.本文在介绍其研究发展过程、主体内容和方向的同时,对目前的研究动态和研究方法进行系统的概述,重点分析了目前国内外草地生态系统碳循环过程研究、机制研究、研究方法及模型的发展动态,并对今后草地生态系统碳循环和相关研究提出了建议.  相似文献   

青海牦牛肉食用品质及安全性的分析研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘海珍  焦小鹿  范涛  郝云晴  逯来章 《中国牛业科学》2005,31(6):20-21,58

对年龄2周岁左右的12头青海牦牛肉的食用品质及安全性指标进行了系统研究。结果表明：牦牛肉食用品质较好，肉质安全，无污染。具有肌红蛋白含量高、亲水率高、多汁性好，香味浓郁，肉质细嫩，口感适宜等特性。肉中肌红蛋白含量极显著高于黄牛（P＜0．01），肉中重金属元素和有毒有害物质限量均符合GB18406．3和NY5044的要求，是生产优质牛肉制品的原料，也是一种具有较高生物学价值的安全的肉食品，具有很大的开发价值。  相似文献   

液相色谱-电喷雾质谱联用检测蜂蜜中四种硝基呋喃类代谢物   总被引：9，自引：0，他引：9  

蒋原  丁涛  沈崇钰  陈惠兰 《畜牧与兽医》2005,37(3):12-15

介绍了高效液相色谱电喷雾多级质谱(LC/MSn) 同时快速、准确测定蜂蜜中呋喃西林、呋喃唑酮、呋喃它酮和呋喃妥英4种硝基呋喃类抗生素代谢物。硝基呋喃类代谢物在酸性条件下经过邻硝基苯甲醛衍生化, 液相萃取后经色谱分离, 利用二级质谱进行定性和定量。加标样品平均回收率达到64% ~79%, 定量下限(LOQ) 为0 1~1μg·kg-1, 检测限(LOD) 达到0 05~0 5μg·kg-1。该方法测定结果满足欧盟(EU)对进口动物源性食品中硝基呋喃类抗生素的残留要求。  相似文献