猪胚胎多能性干细胞的分离培养   总被引：3，自引：0，他引：3  

况玲冯书堂  余四九牟玉莲 张勇 《中国兽医科技》2004,34(7):55-59

收集妊娠26．0～29．0d的猪胚胎，分离培养原始生殖细胞(PGCs)，在STO细胞饲养层上生长，形成了多能性干细胞(EG)。发现其具有干细胞的显著特性，并能在体外定向分化为神经细胞、上皮细胞和胚泡细胞。试验使用A、B、C3种不同的培养基培养PGCs，结果在形成EG细胞集落的数量和EG细胞分化上有着明显的差距，说明血清的质量和浓度以及细胞因子对干细胞的生成和增殖有着重要的影响。  相似文献   

猪原始生殖嵴细胞(PGCs)建系因素的研究   总被引：4，自引：3，他引：4  

冯书堂  董晓  刘立新  牟玉莲  况玲  陈红平  张莉  张勇  张青峰 《畜牧兽医学报》2004,35(5):477-480

从五指山猪(WSZP)近交系第8～13代培育群中，先后选用21头5～10月龄青年母猪，分别于授精后25～30d采集胎儿106个，进行原始生殖嵴(PGCs)细胞分离、培养等建系技术研究。以DMEM F10(1:1)为基础培养液，按添加或不添加生长因子，将培养液分为A、B、C3种，并以STO细胞作饲养层，在38℃、5.0％CO2和湿润的气相中进行培养建系。结果获得胚胎生殖嵴细胞(EG)细胞系6个细胞株，其中1个EG细胞株传至11代、2个传至5代、1个传至4代、2个传至3代冻存。并进行了AKP染色、体外分化、冷冻-解冻复苏和嵌合体制作等鉴定研究。研究发现：不同胚龄对EG细胞建系具有一定影响，不同培养液对EG细胞建系效果不同，STO细胞饲养层的质量是建株、传代、冷冻-解冻复苏的关键因素之一。EG细胞系的初步建立，为今后筛选进入种系的EG细胞系、实施体外基因操作提供了可能。  相似文献   

小型猪近交系新品种的培育与开发利用   总被引：1，自引：0，他引：1  

冯书堂  李奎  刘岚  高倩  程英  牟玉莲 《农业生物技术学报》2015,23(2)

小型猪近交系是中国农业科学院北京畜牧兽医研究所以2头五指山猪(Sus scrofa)为系祖,历时15年,采用“近亲交配”、提高营养水平、同期发情以及笼架等饲养技术,逐步克服后代畸形率高、弱仔率高、成活率低等3大阶段性难题,育成国际上首个近交系猪.本文介绍小型猪近交系的培育过程、近交系研究鉴定、新遗传资源种质特性,以及开发利用.该研究成果填补了国内外近交系猪的研究空白,为大型哺乳近交系动物培育理论和应用研究提供了新的视角.  相似文献   

绵羊精原干细胞移植受体内源性生殖细胞的消除研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

窦红伟  赵兴绪  马月辉  冯书堂  员新旭  曹文广 《贵州农业科学》2009,37(3)

试验拟建立绵羊精原干细胞移植受体内源性生殖细胞的消除技术.将8只5月龄小尾寒羊公羊随机分为4组,各组第2次处理后3周,公羊睾丸活体采样,石蜡切片、HE染色验证处理效果.结果表明,白消安处理公羊可以完全消除内源性精原干细胞和其他生殖细胞.LHRH、LH疫苗处理的公羊,只能使部分精子发生丧失和生殖细胞消除.白消安是精原干细胞移植受体绵羊内源性生殖细胞最有效的消除技术.  相似文献   

五指山猪近交系群体中DRA和DRB基因的SSCP检测   总被引：10，自引：0，他引：10  

孙俊丽  牟玉莲  顾茂松  刘小林  冯书堂 《安徽农业科学》2005,33(8):1458-1461

为确定五指山猪(WZSP)近交系群体SLA!ⅡDRA、DRB基因的等位基因数及其特性,利用PCR扩增SLA!ⅡDRA、DRB基因的第2外显子序列,经单链构象多态性即SSCP检测其等位基因数,选择纯合子个体的PCR产物直接测序。对所获得的序列与Genbank中所有相应的序列进行比对和聚类分析,特别是SLA!DRB!C、SLA!DRB!D、HLA!DRB*09012、HLA!DRB*1201、HLA!DRA*0101等位基因。结果表明:在WZSP近交系群体中,DRA、DRB各有2个等位基因且发现1个DRB新等位基因。DRA第2外显子有很强的保守性,而DRB基因呈现出高度的多态性,在核苷酸水平同源性为85%以上,氨基酸水平同源性为70%以上。该试验成功地检测了WZSP近交系SLA!DRA、DRB基因的等位基因及其特性,为建立WZSPSLA!DR基因抗原的分子分型及特异单倍型猪的培育研究奠定基础。  相似文献   

富含ω-3多不饱和脂肪酸克隆猪制备的关键技术研究     

潘登科  陈红星  冯书堂  李奎  邓继先 《中国畜牧兽医》2007,34(5):22-25

作者综述了制备富含ω-3多不饱和脂肪酸克隆猪的研究意义和国内外的研究现状，并介绍了自己的研究进展。用化学合成的方法获得了C briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1，并构建了哺乳动物细胞表达载体。通过显微注射的方法制备了转基因小鼠，sFat-1基因能够在转基因小鼠中产生更多更长链的而且更有价值的DHA以及DPA。在确认sFat-1基因功能的基础上，将载体转染到猪胎儿成纤维细胞，利用阳性的细胞克隆通过核移植方式制备富含ω-3多不饱和脂肪酸克隆猪。  相似文献   

生长因子EGF、bFGF对猪孤雌胚体外发育的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘吉  潘登科  张莉  牟玉莲  张勇  杨述林  王子荣  冯书堂 《畜牧兽医学报》2007,38(1):36-39

在胚胎发育的不同阶段，分别在培养基中添加EGF和bFGF，研究EGF和bFGF对猪孤雌胚体外发育的作用。结果表明：在1细胞阶段添加EGF或bFGF，添加EGF能够显著提高孤雌胚的卵裂率（P〈0．05）；2～4细胞阶段添加EGF和bFGF，添加EGF组和添加bFGF组的囊胚率都显著高于对照组（P〈0．05），而添加bFGF组的囊胚率和囊胚细胞数都略高于对照组和添加EGF组。说明EGF和bFGF有利于猪孤雌胚的体外发育，而且，bF-GF能够通过提高囊胚细胞数而提高猪孤雌胚的质量。  相似文献   

五指山小型猪对猪病毒瘟的敏感性试验     

裴建武  吴福林  高金源  刘桂芳  冯书堂 《中国兽药杂志》1998,(1)

本试验证明,２～４月龄猪瘟抗体阴性的五指山小型猪对猪瘟石门系病毒具有良好的敏感性。  相似文献   

利用外源激素控制妊娠母猪白天分娩     

冯书堂  王吉英 《河北畜牧兽医》1992,8(1):3-4

  相似文献   

五指山小型猪近交系白细胞抗原Ⅰ类3 基因的研究     

孙俊丽  牟玉莲  刘小林  冯书堂  王素荣 《中国农业科学》2007,40(9):2053-2061

 【目的】为探讨五指山小型猪（WZSP）近交系群体中SLAⅠ3 (SLA-3) 位点等位基因分布结构及其特性。【方法】利用4对引物，采用RT-PCR扩增了32头WZSP SLA-3基因部分外显子1、外显子2和大部分外显子3序列。根据家系和扩增结果，选择8头个体的PCR产物克隆测序。【结果】获得9个不同的核苷酸序列。与GenBank中所用SLA-3基因的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行比较分析，确定这9个序列均为SLA-3位点上的新等位基因，但这些等位基因间核苷酸变异很少；氨基酸序列比较发现猪和人之间有很高的保守性。同时，构建了23个SLA-3的等位基因和1个HLA-A等位基因核苷酸序列的系统树。【结论】WZSP在SLA-3位点和其它猪品种有明显的差异，拥有其独特的遗传资源。从分子水平为WZSP SLA-3基因的分子分型及特异单倍体猪的培育和异种器官移植实验用动物的研究提供理论依据。  相似文献