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鸡Rab7b在细胞晚期内吞体定位和结合恒定链的分子特征 总被引:1,自引:1,他引:0
Rab蛋白是介导胞内活性蛋白转运的分子家族。恒定链(invariant chain,Ii)具有协助抗原肽转运、B细胞成熟和作为细胞因子的受体等免疫学功能。前期研究发现,鸡(Gallus gallus)Rab5a在细胞早期内吞体中与Ii结合,但不清楚是否还有其他转运蛋白有该特性。基于Rab7b分子定位于晚期内吞体,并与胞内分子转运相关,本研究探索了鸡Rab7b与Ii结合的分子结构特征。首先,用自行设计的引物扩增了鸡和小鼠(Mus musculus)Rab7b基因,并进行了氨基酸同源性比对分析;构建了含鸡Rab7b及其67位氨基酸突变体Rab7bQ67L的原核和真核重组质粒。其次,将含红色荧光蛋白和目的基因的重组质粒转染鼠巨噬细胞系Raw264.7,培养后用绿色荧光素(FITC)标记的鼠抗晚期内吞体蛋白1(LAMP1)抗体染色,观察目的蛋白在内吞体的定位。进一步将鸡Rab7b和Rab7bQ67L分别与Ii共转染293T细胞,观察它们与Ii的共定位。最后用拉下法和免疫印迹检测鸡Rab7b及Rab7bQ67L与Ii的结合。结果表明,所克隆获得的鸡Rab7b基因与预期大小一致,其开放阅读框为624 bp,编码208个氨基酸。鸡和鼠的Rab7b蛋白质结构相似性为74%。尽管鸡Rab7b和突变体Rab7bQ67L均能结合Ii,但只有Rab7b可以定位于晚期内吞体,而突变体却改变了该定位特性。综上所述,鸡Rab7b与Ii不仅在晚期内吞体共定位,而且还能互相结合;鸡Rab7b的第67位氨基酸影响其在细胞内定位而不影响与Ii结合。综上表明,Rab分子参与了Ii在细胞内细胞器的转运,为进一步研究Ii在细胞内的转运机制提供了新的途径。 相似文献
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将健康的围产期奶牛30头随机均分为3组。其中Ⅱ组为对照组,Ⅰ组和Ⅲ组分别为试验组;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3组于产前28d开始分别饲喂NRC标准减少20%日粮组(能量摄入80%)、NRC标准日粮组(能量摄入100%)、NRC标准增加20%日粮组(能量摄入120%),产后各组奶牛均饲喂标准日粮,至产后56d结束,观察不同干物质摄入水平对奶牛产乳量及乳成份的的影响。试验结果表明:奶牛产后干物质摄入量、产奶量为Ⅰ组高于Ⅱ组、Ⅱ组又高于Ⅲ组,经统计分析组间差异极显著(<0.01)或差异显著(<0.05);乳中蛋白质、乳脂率和非固体物质为Ⅰ组高于Ⅱ组、Ⅱ组又高于Ⅲ组(>0.05)。可见,围产期健康奶牛不同能量水平与干物质摄入量、产奶量、乳成份等生产性能之间存在着密切的关系。 相似文献
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提出了判定“弦振动研究”实验数据的两种方法:其一是对照砝码质量与弦长的理论数据表和弦的线密度与弦长的理论数据表,其二是对照砝码质量与弦长关系曲线和弦的线密度与弦长关系曲线. 相似文献
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对两种血液相容性无机生物材料的最新研究进展进行了综述.着重介绍了类金刚石薄膜(Diamondlike carbon,DLC)、氧化钛薄膜医用抗凝血材料近年来的研究进展,并对血液相容性研究中存在的问题进行了分析. 相似文献
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提出了判定“弦振动研究”实验数据的两种方法:其一是对照砝码质量与弦长的理论数据表和弦的线密度与弦长的理论数据表,其二是对照砝码质量与弦长关系曲线和弦的线密度与弦长关系曲线. 相似文献