猪IL-10 SYBR Green Ⅰ Real-time PCR检测方法的建立          下载免费PDF全文

朱希旺  杜以军  李俊  陈智  于江  张玉玉  夏焱春  周明明  王金宝 《家畜生态学报》2014,35(8)

白介素-10(IL-10)是一种具有免疫抑制作用的多能细胞因子.能够引发猪免疫抑制效应的多种病毒在感染宿主时均伴随有明显的IL-10上调,其中就包括猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),然而并不是所有的PRRSV毒株都能上调IL-10.为了详细探讨PRRSV免疫抑制与IL-10上调之间的关系以及PRRSV感染上调IL 10的具体分子机制,本研究针对猪IL-10以及看家基因β actin的基因序列分别设计一对特异性引物,构建了各自含有IL-10、βactin引物扩增序列的重组质粒为阳性标准品,建立了以2△△ct为基础的SYBR GreenⅠrealtime PCR检测方法.该方法线性关系良好;敏感性高,两种基因的检测下限均为1×101 copies/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性良好,批内变异系数小于2％,批间变异系数小于3％;目的基因及内参基因的扩增效率较高,分别为92.7％、97.8％.综上所述,该方法可以用于猪IL-10 mRNA水平的表达分析.  相似文献   

多重RT-PCR检测PRRSV和CSFV及PRRSV ORF5基因遗传变异分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

张金强  吴家强  孟斌  郭文龙  王希辉  李坤  于江  刘少宁  张玉玉  王金宝 《中国兽医学报》2011,31(5)

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)的基因组序列设计了2对特异性引物,建立了同时检测PRRSV和CSFV的多重RT-PCR方法.2008年1月至2009年12月期间,采集山东各地71个不同规模猪场及农村散养户212份病料,采用建立的多重RT-PCR技术同时检测PRRSV和CSFV的感染状况.检测结果显示,病料中高致病性PRRSV占57.1%(121/212),CSFV占29.2%(62/212).应用RT-PCR方法扩增山东不同地区16株PRRSV的ORF5基因,并进行了序列分析.结果表明,16株PRRSV的ORF5基因核苷酸同源性为97.0%～100.0%;与参考变异毒株JXA1、传统毒株VR2332核苷酸同源性分别为98.0%～99.5%和86.4%～87.7%.推导的氨基酸序列分析表明,16株毒株GP5蛋白氨基酸不存在缺失,但存在位点突变.12株在非中和表位29位点与准种进化34位点发生了突变,分别由V→A和N→S;1株在非中和表位185位点发生突变,由A→V;这与2007年流行的PRRSV毒株JXA1、HUN等不同.  相似文献   

新疆林业实现可持续发展的六大理由     

于江 《新疆林业》2002,(5):22-22

1是新疆经济社会发展中的一个特殊行业和产业林业在改善生态环境、维护生态平衡、保护人类生存与发展中起着决定性作用，决定了林业可持续发展是社会经济可持续发展的基础。新疆气候干旱，植被稀少，自然灾害频繁，生态质量不高，生态系统的抗逆性较差，抵御自然灾害的能力较低，这就决定了新疆林业是国民经济与社会发展的基础产业和重要的公益事业的特性，肩负着优化环境和促进发展的双重使命，林业在国民经济和社会发展中的地位和作用是其他行业不可代替的，兼有生态、社会、经济三大效益。正如王乐泉书记所说：“对新疆十分脆弱的生态环…  相似文献   

储油罐呼吸阀的概念设计     

于江 《油气储运》1999,18(6):26-27,55

指出了对呼吸阀设计概念认识问题，探讨了呼吸阀的控制要求，主要设计依据、开启特性及功能延伸等设计概念，提出呼吸阀设计应真正从保证油罐安全密闭储油出发，以油罐呼吸可能产生的最大气体流量为依据，改善呼吸阀的开启特性，使呼吸阀具有在线检测等功能，以此建立呼吸阀设计新思路。  相似文献   

副猪嗜血杆菌ompP2基因在猪肺泡巨噬细胞中的表达     

于江  杜以军  李俊  丛晓燕  孙文博  时建立  陈智  陈蕾  吴家强  王金宝 《动物医学进展》2016,(2):11-14

为了进一步研究副猪嗜血杆菌(HPS)ompP2基因的功能,根据已发表的副猪嗜血杆菌核苷酸序列,设计并合成1对引物,PCR扩增HPS LZ株外膜蛋白ompP2基因,获得大小为1 158bp的核苷酸片段,该片段纯化后克隆至pEASY-Blunt载体,转化后鉴定,再与真核表达质粒pCI-neo经过酶切和连接反应,转化感受态大肠杆菌Trans-T1,双酶切鉴定,筛选阳性重组质粒并测序。通过脂质体法将pCI-neoompP2转染猪肺泡巨噬细胞,通过RT-PCR和Western blot方法检测重组质粒是否表达。结果显示,成功构建了含ompP2基因的副猪嗜血杆菌真核表达载体pCI-neo-ompP2,提取转染该质粒的猪肺泡巨噬细胞的mRNA,进行RT-PCR扩增,在1 000bp~2 000bp之间可见1条明显的条带。Western blot发现在42ku处出现目的条带。试验结果为后期研究副猪嗜血杆菌感染猪肺泡巨噬细胞的机理奠定了基础。  相似文献   

紧紧围绕新疆林业跨越式发展大局不断深化新时期离退休老干部工作     

于江 《新疆林业》2003,(5):30-31

新疆林业的跨越式发展是一项庞大的系统工程,需要多种因素的系统集成和共同的作用,最广泛的最充分地调动离退休老干部的积极性,围绕林业大局创造性地开展工作是我们的神圣使命。1从战略的高度重视和做好离退休老干部工作我区提出分三个阶段(2003~2007年为转折调整阶段,2008~2012年为快速发展阶段,2013~2020年为向可持续发展的过渡阶段),以实现林业跨越式发展为目标,不断深化林业体制改革,推进林业经济结构战略性调整,加快现代林业建设步伐,为我区全面建设小康社会提供可靠的生态保障。面对新的形势、新的要求,老干部工作怎样跟上形势的发展,…  相似文献   

内蒙古锡林郭勒盟地方良种肉羊选育工作的思考     

于江  毕力格巴特尔  吴志林 《畜牧与饲料科学》2009,30(6):94-95

肉羊业是内蒙古锡林郭勒盟畜牧业的重要组成部分,也是畜牧业主导产业.笔者就锡林郭勒盟地方良种肉羊的发展现状、发展肉羊产业所取得的成就以及在发展过程中所存在的差距和不足进行了阐述,并提出了相应的发展措施和建议.  相似文献   

山西省大豆技术发展及栽培技术     

薛志强  于江 《农机推广与安全》2012,(20):64-65

大豆是山西主要栽培作物之一，目前播种面积26．8万hm^2左右，占全国大豆面积的3％，总产35万～40万t。山西大豆科学技术研究在国内占有重要地位。目前已成功地转育出抗孢囊线虫4号生理小种的600余份黄种皮材料，其中新品系1259获得国家发明4等奖；成功地转育一批进化程度高的抗旱材料。  相似文献   

不断加强管护所站建设，全面提升森林管护水平     

于江  余德林  董卫新  张勇 《新疆林业》2008,(5)

天山东部国有林管理局所辖11个山区国有林场(哈密林场、木垒林场、奇台林场、青木萨尔林场、米泉林场、板房沟林场、乌鲁木齐南山林场、呼图壁林场、玛纳斯南山林场、沙湾林场、乌苏林场),林区东西长1 000公里、南北宽10～180公里,林区横跨塔城、昌吉、乌鲁木齐、哈密4个地(市)、13个县(市)、80多个乡镇、300个村庄,常住人口270多万,林区所在的四个地州市的在职职工年工资收入2万多元,社会生产总值470亿元,工业总产值、农林牧渔及服务业总产值、全社会固定资产投资均超过200亿元.  相似文献   

优质中熟甜油桃--旭光温室栽培技术     

于江 《新疆农垦科技》2004,(1):22-23

旭光系高抗裂果的中熟甜油桃新品种,由安徽省六安市果树研究所从外引品种中发现的"杂株"中选出.2001年春引入阿克苏地区,经过3年的栽培观察,旭光中熟甜油桃填补了此地区6月中旬水果淡季的空白,且品质极优,市场价格较高,经济效益显著.现将其栽培要点总结如下,供参考.  相似文献