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柑橘黄龙病是对柑橘产业最具毁灭性的病害, 目前没有可用的有效药剂和抗病品种, 分子检测对黄龙病有效防控至关重要。本研究对国内外常用的常规PCR和巢式PCR检测引物进行评价, 针对多拷贝的nrdB和16S rDNA基因, 构建质粒标准品并筛选适用于绝对定量PCR的最佳质粒。结果表明, 使用Es Taq MasterMix对感染 Candidatus Liberibacter asiaticus (CLas)的柑橘样品进行常规PCR检测时, 在评价的16对引物中, OI1/OI2c、Las606/LSS和HLBF468/R877灵敏度最高, 推荐同时使用检测黄龙病菌含量低的样品;各组巢式PCR检测引物有其适用扩增体系, 部分引物用Es Taq MasterMix扩增时出现非特异性扩增, F1/B1→F3/B3则适用Es Taq MasterMix体系, 且最高可稳定特异检出105倍稀释感染CLas柑橘总DNA样品（2×10-3 ng/μL）, 是灵敏度最高的引物组, OI1/OI2c→S3/S4在Es Taq MasterMix和Ex Taq DNA聚合酶体系中均可稳定特异检出104倍稀释感染CLas柑橘总DNA样品（2×10-2 ng/μL）, 是适用扩增体系最广的引物组;构建的5个绝对定量PCR质粒标准品中, pnrdB83扩增效率最接近100%, 且在2次重复试验中波动最小, 稳定性最强, 并且作为标准品对黄龙病待测样品进行绝对定量时, 各样品在2次重复试验中的拷贝数差值最小, 是本研究筛选的最佳质粒。本研究的结果将为柑橘黄龙病菌的定性和定量分子检测提供参考。 相似文献
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研究不同的纳米材料(纳米保鲜网套、纳米单果包装袋、纳米保鲜果蜡、纳米保鲜液)在纽荷尔脐橙常温贮藏过程中的保鲜效果,分别对其外观指标、理化指标和抑菌机理进行分析.结果表明,纳米果蜡(NLT)和纳米保鲜液(NYT)较对照有一定的防治效果,前者好果率较对照高17.15个百分点,后者好果率达到90％,虽然两者对柑橘果实贮藏期颜色没有产生显著影响,但在贮藏中可使可滴定酸稳定在0.75％～0.90％之间,可溶性固形物含量在12.0％以上,固酸比值稳定在13∶1和18∶1之间,Vc保持在40～60 mg/kg之间,并显著抑制了失水率的上升,降低了果实的呼吸强度,较好地保存了果实品质.通过对纳米材料的抑菌效力测定,纳米铜、纳米银及纳米铜银混剂等处理对青霉菌均有一定的抑制作用,其中有效成分20 μg/mL的纳米铜、20 μg/mL的纳米铜和纳米银的混剂抑菌效果最好,76 d抑制率高达99.8％,减缓了柑橘人工接种青霉菌的发生和发展,降低采后损失.但在纳米保鲜网套和纳米单果包装袋等复合材料中须进一步提高纳米离子的有效浓度,提高保鲜效果,并进行产品的开发利用. 相似文献
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以湖北省地方特色柑橘桃叶橙为研究对象,开展了资源调查、搜集及评价工作.从品质分析角度阐述了当前桃叶橙已经成为一个品种群体,果实大小、种子数量和可溶性固形物含量等性状变化较大,影响了桃叶橙的鲜食品质,不利于桃叶橙产业未来的发展.通过测定并从中优选了24份单株资源,并针对育种目标进行了资源分类,为桃叶橙选育工作奠定基础.AFLP分子鉴定从DNA水平充分证明了参试样品发生了遗传物质的变异,同时也初步探明了各单株与桃叶橙8号、18号和139号的遗传进化关系. 相似文献
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