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猪日本乙型脑炎病毒(JEV)是引起以母猪流产为主要特征的繁殖障碍性疾病病原之一,笔者拟构建JEV的DNA型复制子载体,并利用该载体表达外源基因。以JEV毒株SA14-14-2为基础,去除病毒结构蛋白基因prM和部分E基因而保留全部非结构蛋白和非编码区序列,插入FMDV2A和丁肝病毒核酶序列构建复制子表达载体pAC-JEV,实时定量PCR、间接免疫荧光、Western blotting方法检测JEV自身蛋白(NS3)表达,验证复制子的自主复制能力。在pAC-JEV的结构蛋白C基因下游插入EGFP基因、猪流感病毒的HA和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的GP5基因构建重组复制子pAC-JEV-EGFP、pAC-JEV-HA、pAC-JEV-GP5和NS5基因缺失载体pAC-JEV-ΔNS5,该复制子载体转染BHK-21,荧光显微镜直接观察EGFP表达,Western blotting方法检测外源蛋白质(GFP、GP5、HA)表达情况。结果表明:随着转染时间延长,复制子转染细胞内NS3的表达逐渐增加,表明所构建的JEV复制子表达载体具有自主复制能力。EGFP mRNA转录水平和EGFP蛋白质荧光信号随着转染时间的延长逐渐增加,并且荧光信号可持续8d以上,携带猪流感病毒的HA和猪繁殖与呼吸综合征病毒的GP5基因的复制子载体转染BHK-21细胞后,HA和GP5能有效表达,说明复制子具有表达外源蛋白质的能力。该复制子表达载体的成功构建,为深入研究JEV各蛋白质的功能、各蛋白质与细胞内蛋白质相互作用关系以及基于复制子载体的疫苗开发等提供了技术平台。 相似文献
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种公猪的营养需要量研究 总被引：2，自引：0，他引：2
种公猪的繁殖性能对养猪生产至关重要,而营养失衡又是造成种公猪繁殖性能低下的主要因素。结合当前的研究,综述种公猪的营养需要,主要为能量、蛋白质、维生素和矿物质需要。 相似文献
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猪圆环病毒2型（porcine circovirus 2, PCV2）,是感染猪Sus scrofa domestica的一种单链DNA病毒。建立一种快速、灵敏的检测方法,对于PCV2感染猪的筛选和疾病预防非常重要。根据PCV2 ORF2基因保守区,设计了荧光定量聚合酶链式反应（PCR）引物,利用SYBR Green作为荧光染料建立了一种定量检测PCV2的PCR方法。结果表明:该方法具有灵敏度高、特异性强和重复性好的优点,每微升的最低检测限低至101拷贝DNA。利用该方法对34份PCV2阳性临床样本进行检测,检测符合率为100%,明显高于普通PCR方法的50.0%。因此,本研究建立的PCV2实时荧光定量PCR检测方法为该疾病的预防和控制提供一种有效的检测工具。图4表4参26 相似文献
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猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)给养猪业造成了重大的经济损失,建立经济、快速的检测方法尤为重要。本研究旨在利用巢式PCR技术,建立高灵敏度PCV2检测平台,以加强对猪圆环病毒病的防控。根据PCV2 ORF2基因保守区,设计内、外2对巢式PCR引物,通过优化PCR反应条件,建立巢式PCR检测方法,并对猪场临床样本进行检测。结果显示,本研究建立的巢式PCR检测方法灵敏度高、重复性强,最低检出量为10拷贝/μL,检出率达97.3%。本研究建立的巢式PCR检测方法为快速、高效地检测PCV2以及为猪圆环病毒病的防控提供有力手段。 相似文献
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脲酶抑制剂作为一类特殊的饲料添加剂在畜牧业生产中逐渐被人们认识。在畜牧业发达的国家脲酶抑制剂的应用已较为广泛,我国20世纪90年代开始脲酶抑制剂在畜牧方面的应用性研究,在反刍动物生产中研究较多,而在单胃动物生产中应用研究较少。本文综述脲酶抑制剂的种类、作用机理及其在单胃动物生产中的应用。1脲酶抑制剂的种类及作用机理1.1脲酶抑制剂的种类脲酶抑制剂是指能够直接或间接抑制脲酶活性的一类物质。有关脲酶抑制剂的研究大多数是在已发现的土壤脲酶抑制剂的基础上进行的,目前发现的脲酶抑制剂见表1(单安山等,2002)。脲酶抑制剂基… 相似文献
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为研究早期断奶及谷氨酰胺添加对仔猪血清游离氨基酸及其代谢产物的影响。分别选取哺乳、断奶和饲喂谷氨酰胺的小母猪用于试验,采用色谱分析、主成分分析、偏最小二乘法判别分析等方法,对仔猪的生长性能、氨基酸含量进行分析。结果发现,血清游离氨基酸中,断奶组的精氨酸、组氨酸、缬氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、丝氨酸和酪氨酸含量较哺乳组含量显著降低(P<0.05),断奶组的异亮氨酸、蛋氨酸、苯甲基丙氨酸、苏氨酸和丙氨酸含量较哺乳组含量显著上升(P<0.05);谷氨酰胺组的苏氨酸和甘氨酸含量较断奶组含量显著降低(P<0.05),谷氨酰胺组的亮氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸和缬氨酸含量较断奶组含量显著上升(P<0.05);氨基酸代谢产物中,断奶组的γ-氨基正丁酸、牛磺酸、瓜氨酸、肌肽、乙醇胺和羟赖氨酸含量较哺乳组含量显著降低(P<0.05),断奶组的α-氨基己二酸、胱硫醚、鹅肌肽、1-甲基组氨酸、3-甲基组氨酸、磷酸乙醇胺、磷酸丝氨酸和尿素含量较哺乳组含量显著上升(P<0.05);谷氨酰胺组的鸟氨酸、鹅肌肽和磷酸乙醇胺含量较断奶组含量显著降低(P<0.05),谷氨酰胺组的α-氨基己二酸、α-氨基正丁酸、肌肽、乙醇胺、羟赖氨酸、磷酸丝氨酸和尿素含量较断奶组含量显著上升(P<0.05)。结果表明,合理饲喂谷氨酰胺有助于游离氨基酸及其代谢产物恢复到正常水平。主成分分析显示,3个试验组代谢物的表型存在显著差异(P<0.05)。偏最小二乘法判别分析模型表明,苏氨酸、缬氨酸、半胱氨酸、鹅肌肽、磷酸乙酸胺、乙醇胺和羟赖氨酸等是较为重要的氨基酸及其代谢产物。由此可见,仔猪在早期断奶阶段机体的血清的氨基酸含量发生明显变化,且添加谷氨酰胺能明显调节仔猪血清游离氨基酸含量。 相似文献
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在规模化养猪业快速发展的同时产生了大量臭气,影响周围居民生活环境,危害人畜健康。目前,规模化猪场臭气治理技术主要集中在饲养管理技术、营养技术与集中收集处理技术。作者查阅了大量文献,联系实际生产,分析了臭气的主要成分、生成途径及臭气产生的主要影响因素,着重描述了氨气、硫化氢和粪臭素的危害;介绍了低蛋白质饲粮、低硫饲粮、低可发酵碳水化合物饲粮和不同类型的饲料添加剂对猪场臭气产生的影响,并将其对猪肠道臭气产生的控制机制进行了简要归纳;提出了改进饲养管理方法和智能收集处理系统对猪舍内臭气扩散过程的控制;概述了猪舍末端气体、固体和液体污染物的臭气集中管控处理技术,并对源头减排、过程控制、末端治理综合除臭技术的应用及臭气减排智能化管控技术进行了展望,旨在为规模化猪场臭气减排提供参考。 相似文献
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[目的]探究不同生物有机肥施用量对稻田土壤Cd形态和糙米Cd含量的影响.[方法]采用盆栽试验研究了不同有机肥增施量对水稻主要生育期内土壤pH、有机质和Cd赋存形态的动态变化以及糙米中Cd含量的影响.[结果]与对照相比,25～45 g/kg有机肥增施量条件下,水稻分蘖期土壤pH显著提高0.40～0.42,有机质含量显著增加1.74～3.1 mg/kg,有效态Cd下降15.7％～40.7％;孕穗期土壤pH显著提高1.08～1.14,有机质含量显著增加7.48～9.68 mg/kg,有效态Cd下降13.6％～38.8％;扬花期土壤pH显著提高1.30～1.53,有机质含量显著增加8.38～9.19 mg/kg,有效态Cd下降10.0％～36.7％;成熟期土壤pH显著提高0.97～1.13,有机质含量显著增加6.54～8.81 mg/kg,有效态Cd下降9.2％～36.8％;水稻成熟后的糙米中Cd含量显著下降67.7％～72.3％.随着有机肥施用量增加,土壤pH、有机质含量以及糙米中Cd含量并无明显的变化.[结论]水稻种植过程中增施生物有机肥能有效提高酸性土壤的pH,增强土壤的酸碱缓冲能力,并显著提升土壤中的有机质含量,促使土壤中Cd由生物活性较强的弱酸提取态向可还原态转化,从而达到抑制水稻对Cd的吸收,显著减少糙米中Cd积累的目的. 相似文献
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试验旨在研究单月桂酸甘油酯对蛋鸡生产性能、蛋品质和肠道屏障功能的影响。选用66周龄罗曼灰蛋鸡20 000只，随机分为2组，每组10个重复，每个重复1 000只。对照组饲喂基础日粮，试验组在日粮中添加1 000 mg/kg单月桂酸甘油酯，试验期21 d。结果表明：与对照组相比，单月桂酸甘油酯可降低蛋鸡料蛋比和次品蛋率（P<0.05），提高产蛋率、平均蛋重、蛋白高度、蛋黄颜色和哈氏单位（P<0.05）；降低了蛋鸡空肠隐窝深度，提高了空肠绒隐比（P<0.05）；单月桂酸甘油酯添加组血清及空肠黏膜白细胞介素-2、白细胞介素-6、白细胞介素-β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等促炎细胞因子含量低于对照组（P<0.05），抑炎细胞因子白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)含量高于对照组（P<0.05）；日粮添加单月桂酸甘油酯降低了空肠黏膜Toll样受体2、Toll样受体4、髓样分化因子88、IL-1β和TNF-α的基因表达量（P<0.05），提高了IL-4、黏蛋白2(Muc-2)和闭合蛋白（Occludin）的基因表达量（P&l... 相似文献
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<正>宁南县位于四川省凉山彝族自治州东南部,素有"南国风光小天府、金沙江畔俏明珠"之称。多年来,我县依托丰富的光热资源优势,狠抓蚕桑、烤烟、冬季马铃薯、林业、畜牧五大富民工程,形成了农村经济支柱产业循环互动、良性互补 相似文献