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戴汉川;伍晓雄;聂芬;赵娜;张维民;曾翠平;龙良启 《农业生物技术学报》2006,14(5):677-682
利用RT-PCR技术扩增出草鱼(Ctenopharyngodon idellus)的leptin基因，将leptin基因克隆至真核表达载体pPIC9K，电穿孔转化GS115菌株, 经G418筛选和甲醇诱导后，对表达产物进行SDS-PAGE琼脂糖凝胶电泳和Western blot分析。结果表明，草鱼leptin基因cDNA序列由438个核苷酸组成，编码146个氨基酸组成的多肽（GenBank登陆号AY551335），与鲤鱼(Cyprinus carpio)leptin基因相比， 核苷酸和氨基酸的同源性为99%； 与人、猪和鼠相比，核苷酸同源性分别为84%、86%和95%, 氯基酸的同源性分别为84%、82%和96%；与河豚(Takifugu rubripes)相比，氨基酸具有较大的差异，仅有9％的同源性，表明leptin在物种的进化上具有一定的差异；实现了草鱼leptin基因在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的表达，表达蛋白的分子量约为16 kD， Western blot 分析表明，表达产物具有一定的免疫学活性。 相似文献
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采用酵母偏爱密码子合成5条编码猪胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因的引物,利用重叠PCR技术获得含210bp猪IGF-Ⅰ成熟蛋白基因的拼接产物。将该基因插入分泌表达载体pPIC9K中,转化巴斯德毕赤酵母菌(Pischia pastoris)。经表型鉴定、PCR分析及G418筛选得到Muts型多拷贝整合菌,以1.5%甲醇诱导培养后,经SDS-PAGE检测表达产物,在7.5kD处出现一特异蛋白条带,目的蛋白表达量达410mg/L。Dot blot检测表明,重组蛋白可与抗IGF-Ⅰ多克隆抗体反应。 相似文献
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４２周龄伊莎褐色蛋鸡２０００只,随机分成４组,饲料中分别添加０．００％,０．０３％、０．０５％、０．０７％的和美酵素进行饲喂试验。结果表明,添加和美酵素组的产蛋率显著高于对照组（Ｐ〈０．０５）添加量以０．０３％经济效益最佳。 相似文献
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高温环境在饮水中添加庶糖、电解质等成分,观察对仔猪生长的影响。结果表明,饮水中添加含糖电解质能显著促进仔猪生长,提高饲料报酬和饲养效益。 相似文献
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某鸡场为降低生产成本而自配肉鸡料饲养肉鸡。结果饲养的三批共 90 0 0只艾维茵肉鸡生长特别缓慢 ,鸡群出现群发性的恶性拉稀 ,每天死亡率 0 .5 %左右 ,经实验室化验结合临床症状和病理剖检诊断为慢性食盐中毒。1 临床症状 鸡群精神一般 ,体质较差 ,羽毛粗乱无光泽 ,生长发育严重不良。但仔鸡食欲良好 ,每次喂料时积极争抢槽位 ,但抢到槽位后仅吃几粒碎玉米 ,绝大多数饲料剩在食槽内。鸡群饮欲反常 ,饮水量剧烈增加。鸡群普遍恶性拉稀 ,拉水样稀便 ,呈喷射状拉出 ,垫料严重浸湿 ,污水四处流淌。有的病鸡表现为角弓反张姿势 ,有的两肢无力… 相似文献
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克隆了猪MYL4基因的cDNA序列,并利用生物信息学方法进行验证。所得cDNA序列全长1105bp,包含一个完整的开放阅读框,编码197个氨基酸。序列分析表明,该基因与已报道的狗、人、黑猩猩和恒河猴等物种的MYL4基因高度同源,氨基酸序列同源性分别为98.4%、95.9%、95.4%和95.4%。该基因编码的蛋白具有EFH和FRQ1保守功能域。荧光定量分析该基因在猪胚胎骨骼肌（妊娠33 、65 和90 天）中的表达规律,发现MYL4基因在通城猪和长白猪中呈波浪式表达模式,在妊娠第33 天时中外猪品种间无显著差异,但在65 和90 天时长白猪中显著高于通城猪。 相似文献
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利用酵母双杂交系统筛选猪Calsarcin-1基因相互作用蛋白 总被引：2，自引：0，他引：2
【目的】利用酵母双杂交系统研究与猪Calsarcin-1相互作用的蛋白,了解Calsarcin-1在猪骨骼肌纤维类型形成和信号通路的调控功能。【方法】首先用长白猪Calsarcin-1基因构建既无自激活性又无毒性的pGBKT7-CS1诱饵载体;然后从猪的骨骼肌组织样中提取mRNA,利用SMART技术合成并纯化双链cDNA;最后通过酵母双杂交系统的共转化法筛选与Calsarcin-1相互作用的蛋白,在GenBank中比对分析相互作用基因,分析Calsarcin-1在骨骼肌中的功能。【结果】构建了pGBKT7-CS1诱饵载体,获得具有完整3′端的猪骨骼肌单链cDNA,并合成双链cDNA。筛选出4个与Calsarcin-1相互作用的蛋白,经与人的基因比较分析,发现Calsarcin-1与α-1肌动蛋白和α-3辅肌动蛋白互作,与骨骼肌Z线附近结构形成有关;与肌集钙蛋白-1和肌钙蛋白T3互作,影响钙离子的调控。【结论】分析所筛选出的蛋白功能,推测Calsarcin-1通过结合这些蛋白,维持细胞结构的稳定,影响相关蛋白的钙离子结合能力,从而参与钙离子调控;而钙离子浓度的变化将影响到其它控制肌纤维分化的因子,或其它调控通路,共同调节快慢肌纤维的形成与转化。 相似文献
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酶制剂在肉用仔鸡饲养中的应用及某些生理生化指标的分析研究 总被引：3，自引：0，他引：3
酶制剂在肉用仔鸡饲养中的应用及某些生理生化指标的分析研究湖北农学院荣俊，伍晓雄，胡修军，肖运才，杨待建消化酶是动物消化道内存在的一类高效的生物活性物质，它能促进饲料中营养物质的消化吸收。幼年动物由于消化道的发育尚不完善，消化道产生的消化酶在量和催化活... 相似文献