猪传染性胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白基因的克隆和表达     

邵美丽刘思国  王春来郭设平宫强  佟恒敏 《中国兽医科技》2006,36(1):25-28

以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）血清7型25-4株基因组DNA为模板，用PCR扩增外膜蛋白（OMP）基因特异片段，并克隆于pMD18-T中，经酶切及核苷酸序列分析鉴定后，亚克隆于原核表达栽体pGEX-6P-1，成功构建了重组表达载体pGEX-omp；以此转化大肠埃希氏菌BL21（DE3），经SDS-PAGE鉴定，表达的可溶性融合蛋白分子质量约为61 ku，命名为GST-OMP。以GST亲和层析柱纯化并利用Xa因子酶解，获得切掉标签的OMP。经ELISA检测，该OMP蛋白能够与兔抗APP的阳性血清反应，具有很好的免疫活性。GST-OMP蛋白的成功表达为APP OMP相关分子生物学功能的研制奠定了基础。  相似文献   

“白痢宁”中草药添加剂对雏鸡白痢的防治试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

张秀英  王新  佟恒敏  靳锐 《东北农业大学学报》2001,32(1):44-47

“白痢宁”制剂是由中药白头翁、苦参、丁香、黄芪等 7味中草药按一定比例配制而成 ,有散剂和口服液二种剂型。对雏鸡白痢的防治试验结果表明 ,“白痢宁”的散剂、口服液对人工感染的雏鸡白痢均有较好的防治作用 ,其预防保护率分别为 93.30 %和 97.70 % ,治愈率分别为91.30 %和 90 .90 % ,其效果与氟哌酸相当 ,优于痢特灵。这二种剂型均适合集约化鸡场群养群防和生产绿色食品的要求  相似文献   

氨苄青霉素在马体内的代谢动力学     

李涛  解启英  王振隆  佟恒敏  高贵山  姜宝才  王洪淑  徐桂琴 《东北农业大学学报》1986,(1)

本文报告了氨苄青霉素在健康成年马体内的代谢动力学过程。选用了合适的动力学模型描述了氨苄青霉素的药动学特点。计算出氨苄青霉素的药动学参数如下:消除半衰期(t(1/2)β),2.23±0.37(小时),吸收半衰期(t(1/2)Kα),0.15±0.09(小时),峰时(tp),0.46±0.23(小时),峰浓度(Cmax),8.19±1.13(μg/ml),有效血浆浓度维持时间Tcp(ther),4.54±1.46(小时)。还根据单剂量给药的参数值,推算出多剂量给药的参数。  相似文献   

猪传染性胸膜肺炎重组亚单位疫苗在小鼠体内的免疫机制及其保护效力   总被引：2，自引：0，他引：2  

邵美丽  刘思国  王春来  王勇  宫强  尹训南  郭设平  刘建东  佟恒敏 《中国农业科学》2007,40(4):821-827

 【目的】欲构建具有较好交叉免疫保护效果的多组分重组亚单位疫苗，从而为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。【方法】 利用分子克隆和重组表达技术获得了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌6种主要毒力因子rApxI、rApxII、rApxIII、rApxIV、rApfa和rOMP。并设立以灭活苗（5×108cfu）为试验I组，以重组蛋白rApxI、rApxII、rApxIII和rOMP为试验II组，以rApxI、rApxII、rApxIII、rApxIV、rApfa和rOMP为试验III组，以PBS为空白对照组。分3次免疫BALB/c小鼠，每次间隔2周，第3次免疫后的第7天以APP1型（5×109cfu）和APP2型（5×1010cfu）进行攻毒保护试验。【结果】试验II组的4种抗体水平（ApxI、ApxII、ApxIII和OMP）和脾淋巴细胞诱生IL-2水平显著高于其它3组(P<0.05)，脾淋巴细胞增殖水平也一直高于其它3组(P>0.05)。且试验II组对APP1型保护作用（9/10）明显高于试验I组（6/10）、试验III组(5/10)和对照组（0/10），而对APP2型保护作用（无肺脏损伤）也明显优于其它3组（典型肺部损伤），显示出细胞免疫和体液免疫水平与免疫攻毒保护之间存在着正相关性。【结论】试验II组通过激活体液免疫和细胞免疫，对不同血清型APP的攻击提供了很好的交叉保护作用。  相似文献   

磺胺二甲基嘧啶在马体内的代谢动力学     

李涛  王振隆  佟恒敏  乔桂林 《东北农业大学学报》1986,(4)

本文选用高效液相色谱(HPLC),测定磺胺二甲基嘧啶(SM_2)在6匹健康成年马体内动力学。色谱柱采用反相 ODS 柱(46mm ID×250mm)。紫外检测器波长为275nm,流动相由50%甲醇与50%无离子水组成,并用36%乙酸校正 pH 至4.0,流速为0.5ml/min。SM_2的平均保留时间约为8分钟,内标物的保留时间平均9.9分钟。血药浓度—时间数据,符合多室模型,用夏普 PC—1500袖珍计算机处理数据。主要动力学参数如下:分布相半衰期(t_((1/2)α))为1.41±1.01(hr),消除相半衰期(t_(1/2)β))为12.92±4.17(hr),曲线下面积(AUC)为245.14±61.35,总表观分布容积(V_a)为7.59±1.77(100ml/kg),中央室表观分布容积(V_c)为3.49±0.61(100ml/kg),总清除率(Cl_B)为0.4314±0.13(100ml/kg·hr)。计算出多剂量给药参数如下:给药后24小时稳态下最高(C∞)max。平均(?)与最低(C∞)min 浓度分别为26,10.45与4.49(mg%);累积系数(R)为1.33,先导剂量为133(mg/kg)。本文提出,多剂量给药间隔时间为24小时。  相似文献   

磺胺嘧啶在成年绵羊体内的药物代谢动力学研究     

佟恒敏  李涛  王振隆  丛霞 《东北农业大学学报》1994,25(1):38-41

报道了磺胺嘧啶在５头健康成年绵羊体内的药物代谢动力学过程。于给药后不同时间采集血液样本，并用重氮──偶合比色法分析了游离磺胺嘧啶血液中的浓度．药代动力学的结果显示，４只绵羊的血药浓度──时间数据适合放开式二室模型，１只绵羊的血药浓度──时间数据符合开放式三室模型。研究选用ＭＣＰＫＰ自动化药动学程序进行药代动力学结果计算，药动学能数：分布半衰期为０．６６±０．３２（ｎ），消除半衰期为５．５５±１．６２（ｈ），中央室消除速率常数（Ｋｅｌ）为０．３３６８±０．１０（ｈ－１），总表现分布容积（ＶＢ）为７．４６±１．９８（Ｌ／ｋｇ），总清除率（Ｌ／Ｂ）为０．４９５０±０．２７（Ｌ／ｋｇ／ｈ），曲线下面积（ＡＵＣ）为０．４６±０．１８（ｍｇ／Ｌ·ｈ）。  相似文献