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为实现对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)野毒株与gE基因缺失疫苗株的快速、敏感、特异的鉴别诊断,本试验针对PRV gD和gE基因设计了2套特异性引物和TaqMan探针,建立了PRV野毒株与gE基因缺失疫苗株的TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法,对引物和探针浓度、退火温度等进行了优化,对方法进行敏感性、特异性、重复性试验,并进行临床样品检测。结果显示,建立的针对gD、gE基因的TaqMan实时荧光定量PCR方法线性相关系数(R2)分别为0.996和0.980,均呈良好的线性关系;检测限分别为39.4和12.1拷贝/μL;与圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒均无交叉反应;重复性试验结果显示,针对gD基因的批内和批间变异系数分别为1.43%~1.86%、1.10%~2.07%,针对gE基因的批内和批间变异系数分别为0.98%~1.41%、1.12%~1.86%。应用建立的TaqMan实时荧光定量PCR与普通PCR分别对11份临床疑似感染样品进行检测,阳性率分别为36.4%和27.3%。结果表明,该方法敏感性高、特异性强、重复性好,可作为伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株的早期鉴别诊断和定量检测的有效手段。 相似文献
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空肠弯曲杆菌是一种在世界范围内普遍存在的人畜共患病病原,生存条件严苛.研究发现,该菌在一定条件下可以形成一种能够抵抗外界环境不良影响生物膜,这也是该菌能够在恶劣环境中存活并产生耐药性的重要原因.文章选取临床分离空肠弯曲杆菌为研究对象,建立其生物膜体外模型,通过PCR、扫描电镜等一系列方法对空肠弯曲杆菌生物膜进行鉴定.正交试验法对培养基、温度以及空气条件三种因素对空肠弯曲杆菌生物膜形成影响进行研究.结果表明,体外生物膜形成最佳条件为MHB培养基、37℃和常规空气条件. 相似文献
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乳腺炎是造成乳品工业经济损失最重要的原因之一〔1〕。以美国为例,每年治疗乳腺炎的耗费为每头牛181美元,全国每年要拿出20亿美元用于治疗和预防乳腺炎〔2〕。我国孙福先、单先贵、杨章平等〔3,4,5〕报道隐性乳腺炎阳性率达85.7%,导致乳腺炎的主要病原体有金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎杆菌和链球菌,其中金黄色葡萄球菌是导致奶牛乳腺炎的最主要的病原体〔6〕。 本文论述了金黄色葡萄球菌感染的特点,就近年来国内外对金黄色葡萄球菌隐性乳腺炎的早期临床诊断方法及血清图谱分析的研究加以综述,以期为乳腺炎的早期诊断及疫苗生产… 相似文献
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卵巢在繁殖中起着至关重要的作用,如果卵巢机能受到损害,将会引起排卵延迟或不排卵,更有甚者将会引起卵巢机能减退,导致动物暂时性或永久性不育.研究表明,在热应激下奶牛优势卵泡发育提前,到正式排卵时已经老化,从而影响受胎率.适宜的温度对卵子的生成是必需的.然而不同程度热应激对哺乳动物卵巢组织本身影响的报道却很少见.研究从个体及器官的水平揭示热应激下主要生殖器官卵巢的病理变化,评定热应激对雌性动物卵巢的损伤程度.有试验结果表明,热应激对小鼠的影响和损伤和对其他家畜的影响和损伤是相符的,由于小鼠对热应激非常敏感,经济价值低廉,故将其确定为试验的最佳受试动物. 相似文献
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为探讨亚硒酸钠染毒对小鼠免疫功能的影响,将试验动物分为阴性对照组(0.00mg/kg体重.d)、亚硒酸钠低剂量组(0.14mg/kg体重.d)、中剂量组(0.54mg/kg体重.d)和高剂量组(2.16mg/kg体重.d)。连续灌胃30d后处死小鼠,分别用巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验与溶血空斑试验检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能与抗体形成细胞的数量。结果显示,亚硒酸钠染毒使小鼠巨噬细胞的吞噬功能与抗体形成细胞的数量显著降低,且与染毒剂量具有相关性。表明亚硒酸钠染毒可抑制小鼠非特异性免疫功能,呈现明显剂量效应关系。 相似文献