猪圆环病毒1型北京株全基因组克隆及序列分析     

邵小雪  郭星  周双海  冉多良  汤世坤 《北京农学院学报》2009,24(4):35-38

参照GenBank上猪圆环病毒1型（PCV1）全基因组序列设计1对引物,用PCR技术从北京一猪场的临床发病猪病变组织中扩增和克隆获得1株PCV1全基因组序列,并进行序列测定和分析。全基因组序列结果显示,该株PCV1基因组全长为1759bp,与国内外其他各株PCV1的核苷酸同源性为99．4％。主要开放阅读框（ORF）序列结果显示,该分离株与国内外其他PCV1毒株间的ORF1与ORF2的核苷酸同源性分别在97．5％～99．8％和92．7％～100％。虽然各个PCV1分离株之间的全基因组与主要ORF的核苷酸同源性均很高,但仍然呈现出一定的地域相关性。  相似文献   

PRRSV新疆株N基因的克隆及原核表达     

王传锋  马伟  张伟  薛英  吴星星  冉多良 《新疆农业大学学报》2009,32(6):51-54

根据GenBank上已发表的毒株,设计了一对引物扩增PRRSV新疆株N基因片段;将N基因克隆到pMD18-T,在亚克隆到pGEX-6p-1原核表达载体上,构建重组质粒pGEX-6p-N;在37℃条件下,经终浓度为1mmol／L的IPTG诱导表达4h后,获得了可溶性融合蛋白;经SDS-PAGE电泳检测和Western blotting分析,该融合蛋白分子量约为39kDa,与预期结果一致,并能与PRRSV阳性血清发生特异性反应,且非特异性背景很低。  相似文献   

鸭瘟病毒囊膜糖蛋白gH的原核表达和免疫印迹   总被引：1，自引：0，他引：1  

金映红  冉多良  叶伟成  王一成  袁秀芳  卢立志  陈方华  张存 《浙江农业科学》2008,(3):368-371

根据鸭瘟病毒包膜糖蛋白H（gH）基因序列设计3对引物,PCR扩增的基因片段分别定向插入到原核表达载体pET28,构建了3种原核表达质粒pET-gH、pET-gH1347和pET-gH1707,并转化宿主菌BL21（DE3）。结果显示,去除了gH跨膜区和信号肽的gH基因片段（pET-gH1347和pET-gH1707）获得了表达,而全基因片段（pET-gH）未获得表达。Western-blot表明2种表达产物均能与鸭瘟病毒阳性血清发生特异性反应。鸭瘟病毒gH蛋白的成功表达,将有助于开展该基因功能的研究和血清学检测方法的建立。  相似文献   

马疱疹病毒1型gB糖蛋白线性B细胞表位的预测与鉴定     

李静  刘建华  付强  宋焕堂  范斌  胡月  冉多良 《中国畜牧兽医》2017,44(5):1484-1490

试验旨在应用生物信息学技术综合分析马疱疹病毒1型（equine herpesvirus 1,EHV-1） gB糖蛋白,预测B细胞表位,筛选出具有潜在诊断价值的线性B细胞表位。将EHV-1 gB糖蛋白的基因序列输入DNAStar软件中的Protean工作区中,经参数综合比较分析筛选潜在的B细胞表位,克隆、表达预测表位的基因片段,利用表达的融合蛋白作为抗原与马疱疹病毒阳性血清反应。经预测分析,gB糖蛋白的B细胞表位可能位于第6-10、23-32、53-65、72-98、111-120、152-166和173-180位氨基酸区域。本试验成功构建并原核表达含7个潜在B细胞表位的融合蛋白。Western blotting试验结果显示,其中5个融合蛋白能被马疱疹病毒阳性血清识别。本试验利用生物信息学技术结合分子生物学技术成功筛选到5个潜在的B细胞表位,为EHV-1表位诊断、表位疫苗抗原的设计奠定了技术基础。  相似文献   

TaqMan荧光定量PCR检测猪流行性腹泻病毒方法的建立与初步应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘邓  袁秀芳  冉多良  徐丽华  牛登元  王朝文  王一成 《中国兽医寄生虫病》2010,18(1):28-34

根据GenBank中公布的猪流行性腹泻病毒Ⅳ基因序列,设计了一对特异性引物和探针,扩增长度为186bp的片段。以克隆Ⅳ基因的质粒作为阳性标准品,建立了一种快速检测猪流行腹泻病毒含量的TaqMan荧光定量PCR方法。该方法在10^9-10^1copies／μL范围内具有良好的线性关系,可检测到初始模板中10copies／μL的质粒DNA,以猪圆环病毒、猪乙脑病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒为模板时,均检测不到荧光信号,而重复性实验中其变异系数均小于2％,表明此方法具有很好的特异性和重复性。应用此方法对采集的60份,陆床样品进行检测,其阳性检出率为92％,而用常规RT-PCR方法进行检测,阳性检出率仅为80％。表明荧光定量RT-PCR方法的敏感性明显高于常规PcR检测方法。  相似文献   

阿勒泰地区动物布病疫情风险评估   总被引：1，自引：0，他引：1  

贺磊  李金平  吕春华  冉多良 《新疆畜牧业》2010,(3):25-27

阿勒泰地区一直是新疆动物布病疫情相对偏高的地区,本文对这一地区布病流行病学进行信息的分析,做出该地区在某一特定时间段发生动物布病疫情的风险评估,对当地的布病防控有着积极的意义。  相似文献   

新疆沙湾县新生仔猪大肠杆菌流行株的分离鉴定及防治研究     

张金生  冉多良  徐敏 《新疆畜牧业》2010,(9):34-35

<正>新生仔猪的大肠杆菌性腹泻是由产肠毒素性大肠埃希氏菌引起的一种仔猪腹泻病[1],目前,已经发现的肠道致病性大肠杆菌主要有肠毒素性大肠杆菌﹑肠致病性大肠杆菌﹑肠出血性大肠杆菌﹑肠侵袭  相似文献   

吡喹酮新型注射剂在小鼠体内的杀虫效果与虫体的消亡规律     

张磊  汪勇沛  平宪卿  朱传刚  林娇娇  冉多良 《上海畜牧兽医通讯》2010,(1):54-55

血吸虫病的危害极其严重,现有的防治办法首选是化学治疗,临床应用最多的方式是吡喹酮片剂或粉剂的口服,考虑到给动物投药不便,以及吡喹酮对反刍家畜的应用副作用较多和生物利用率低,研制了吡喹酮注射剂,应用人工感染血吸虫的小鼠,实验吡喹酮注射液的杀虫效果,发现吡喹酮新制剂的治疗达到口服相同剂量吡喹酮同样的减虫效果,  相似文献   

一起獭兔暴发巴氏杆菌病的诊治   总被引：1，自引：0，他引：1  

冉多良  白莉 《中国兽医杂志》1995,21(8):30-31

一起獭兔暴发巴氏杆菌病的诊治冉多良，白莉，李建强，姚新奎（新疆八一农学院动医系，乌鲁木齐８３００５２）－、流行情况新疆八一农学院三坪农场笼养獭兔１０００余只，１９９４年１月中旬饲养员发现獭兔的死亡数由每天２～３只，增到３５只左右，部分死亡獭兔临死前无...  相似文献   

马链球菌马亚种FNEB蛋白的截短表达及其免疫保护性研究     

徐全圆  石明  杨夷平  李娜  刘建华  加尔肯  冉多良 《中国预防兽医学报》2015,(2):132-135

为研究马链球菌马亚种FNEB蛋白的免疫保护性,本研究采用PCR方法从马链球菌马亚种新疆分离株中扩增FNEB基因部分片段,克隆于原核表达载体p ET-30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和western blot分析显示,重组蛋白大小约60 ku,具有良好的抗原性。将纯化的重组蛋白免疫小鼠后,以马链球菌马亚种新疆分离株进行攻毒,结果显示该重组蛋白对免疫组小鼠具有保护力,保护率为65%。本研究克隆了马链球菌马亚种的FNEB截短基因并表达了相应重组蛋白,免疫小鼠后能够提供较好的保护,为重组FNEB蛋白亚单位疫苗的研制奠定基础。  相似文献