中职校德育课教学实效性的反思与对策     

冯力 《广西农业机械化》2010,(6):33-35

德育课要做到知识学习与能力培养和行为养成相统一,切实增强针对性、实效性和时代感。德育课教学成效如何,直接关系到所培养人才的素质。笔者根据中职校德育课的培养目标,针对当前中职学校德育课教学实效性不佳的状况,分析、反思德育课教学的现状和成因,提出提高中职校德育课教学实效性的对策。  相似文献   

反向遗传操作研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴波平  时洪艳  陈建飞  冯力 《东北农业大学学报》2008,39(1):134-138

反向遗传操作(又称感染性克隆)为在DNA水平上研究RNA病毒的基因组结构及功能和病毒宿主相互作用提供了重要手段。文章综述了反向遗传操作的研究策略,包括全长克隆的获得、体外转录和病毒的挽救,概括了反向遗传操作在病毒分子生物学研究、疫苗的研制、基因治疗和重组载体中的应用,分析了当前反向遗传操作研究中存在的问题。  相似文献   

猪肠道组织RIG-I的表达及其在猪传染性胃肠炎病毒致病机制中作用的初步研究     

王文哲  李亮  何豪杰  薛美  冯力 《中国预防兽医学报》2023,(2):161-168

为探究天然免疫分子维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)在猪肠道组织中的表达情况，评价其在猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)致病机制中的作用。本研究经原核表达重组RIG-I蛋白(rRIG-1)并采用SDS-PAGE切胶纯化该蛋白，将其免疫大白兔制备兔RIG-I多克隆抗体，采用间接ELISA检测抗体效价。结果显示获得了效价可达1∶64 000的兔RIG-I多克隆抗体。利用该抗体经western blot检测SPF猪各肠道组织中RIG-I的表达。结果显示，制备的多克隆抗体可与猪各肠道中的RIG-I反应，且RIG-I在SPF猪空肠中的表达量最高。利用该抗体经western blot检测TGEV感染的ST细胞及猪空肠中RIG-I的表达水平。结果显示，TGEV感染后ST细胞中RIG-I的表达水平极显著高于空白对照细胞(P<0.01)；与正常SPF猪空肠相比，TGEV感染的SPF猪空肠组织中RIG-I蛋白的表达水平明显提高。表明TGEV感染后能够刺激细胞内源性及感染猪肠道组织中RIG-I蛋白的表达水平。将本研究构建的重组质粒p CAGGS-RIG-I-flag和RIG-I干扰RNA (siRIG-I)分...  相似文献   

NLRP1炎性小体的激活机制     

何豪杰  薛美  冯力 《畜牧兽医学报》2023,54(2):494-503

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白1（NLRP1）是NOD样受体（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors，NLRs）家族的成员，是人们发现的第一个能形成炎性小体的蛋白。NLRP1的激活可引起半胱氨酸蛋白酶-1前体（pro-caspase-1）的活化并进一步促进炎性因子的成熟和释放，在天然免疫中发挥着重要作用。NLRP1的结构在不同种属间存在差异，目前能引起NLRP1激活的机制，主要包括通过蛋白酶体途径降解并激活NLRP1、通过抑制DPP9激活NLRP1以及弓形虫和部分代谢抑制剂激活NLRP1等。某些病毒蛋白或RNA也能够激活NLRP1，其具体激活机制以及NLRP1在抗病毒感染中发挥的作用尚未明确，还有待于进一步研究。  相似文献   

猪丁型冠状病毒S1-CTD相互作用宿主蛋白的筛选和鉴定     

汤荣锋  范前进  郭龙军  张鑫  石达  时洪艳  陈建飞  冯力 《畜牧兽医学报》2022,53(7):2260-2267

猪丁型冠状病毒纤突蛋白S1亚基C端结合域(S1-CTD)是诱导中和抗体产生的主要区域，为研究与其相互作用的宿主蛋白，采用HEK-293T真核表达系统表达并纯化了S1-CTD，提取了猪回肠上皮细胞膜蛋白，通过免疫共沉淀筛选了可能与S1-CTD相互作用的蛋白并进行质谱分析，发现32个疑似相互作用的宿主蛋白。构建其中可能与S1-CTD互作的蛋白KIF1 binding protein (KIFBP)的真核表达质粒，通过免疫共沉淀和激光共聚焦验证上述宿主蛋白与S1-CTD是否存在相互作用，结果表明KIFBP和S1-CTD之间存在相互作用，共同转染时在细胞质共定位。进一步研究表明，过表达KIFBP能够有效降低病毒RNA水平和病毒滴度，其中mRNA水平降低了约70%，病毒滴度降低了10^1.6TCID₅₀。综上，本研究筛选并鉴定出一种与PDCoV S1-CTD相互作用的宿主蛋白KIFBP，为了解PDCoV的致病机制提供了理论基础。  相似文献   

果汁等温结晶过程冰晶生长的相场法模拟   总被引：1，自引：1，他引：0       下载免费PDF全文

陈梅英  冯力  欧忠辉  陈锦权  卓艳云 《中国农业大学学报》2013,18(6):192-197

针对冷冻浓缩过程冰晶夹带造成果汁可溶性固形物损失而限制其推广使用的问题,采用国内外描述相变微观结构的相场模型,将果汁体系视为水和溶质二元系统,从微观上模拟冰晶生长的演变过程。探讨扰动对晶体二次分枝生长的影响,修正各向异性的模数,并通过改变各向异性强度系数,获得冰晶模拟的各向异性强度系数合适取值,进一步分析结晶模拟时间对模拟结果的影响,与试验结果进行验证。结果表明:扰动通过诱发侧向分枝的生长,从而影响晶体形貌;各向异性会影响冰晶生长形貌,各向异性强度系数太小,分枝不明显,太大,会造成冰晶非对称生长;模拟结果与试验结果两者吻合较好。  相似文献   

猪氨基肽酶N病毒结合受体核心区对TGEV在ST细胞中复制影响的研究     

史鑫琪  季朝阳  陈晓彤  张子博  张鑫  郭慧娟  田璐  王洪峰  陈洪岩  王靖飞  冯力  夏长友  孟庆文 《中国预防兽医学报》2023,(1):1-8

为研究与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)结合的猪氨基肽酶N (pAPN)受体核心区对TGEV复制以及细胞功能的影响，本研究检索并分析p APN与TGEV的结合位点，结果显示，敲除p APN aa668～aa963对其酶活性无影响。因此，利用CRISPR/Cas9技术构建p APN与TGEV结合位点敲除细胞系，经PCR和western blot鉴定结果显示，正确构建一株敲除p APN aa668～aa963的ST细胞系，即敲除p APN 15-21外显子，命名为KO-ST-15。采用CCK-8和细胞划痕方法检测KO-ST-15细胞的增殖和细胞迁移活性，结果显示，敲除p APN 15-21外显子对ST细胞增殖和迁移活性均无显著影响。利用RT-q PCR和IFA检测KO-ST-15感染TGEV后病毒复制拷贝数和N蛋白的表达，结果显示，敲除p APN 15-21外显子可极显著抑制TGEV在ST细胞系中的复制(P<0.001)。利用RT-q PCR检测KO-ST-15感染TGEV后炎症相关基因转录水平变化，结果显示，TGEV感染后KO-ST-15中的IL-6、IL-8和NLRP3 (NOD-...  相似文献