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本研究旨在分离猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异株,通过悬浮培养工艺制备成高效价的PEDV灭活疫苗。2017年从中国多个规模化猪场采集腹泻病死仔猪的小肠及其内容物200份,通过RT-PCR方法进行PEDV检测并测序,筛选一株PEDV变异株,将其在2 L反应器里悬浮培养的Vero细胞上进行病毒分离与传代培养,收获的病毒液鉴定后测定TCID50,经甲醛灭活后加入氢氧化铝胶佐剂配制成PEDV灭活疫苗,对其物理性状、稳定性、黏度、无菌等进行检验,检验合格后免疫妊娠母猪及所产仔猪,对其安全性和免疫效力进行研究。结果显示,200份病料中有86份为PEDV阳性,将筛选的PEDV变异株病料在Vero细胞上传至第5代时出现细胞病变,传至第10代收获病毒液,经鉴定后确定为PEDV变异毒株,并命名为PEDV-GF10株。收获的病毒液浓缩后测得病毒滴度可达1×108.0 TCID50/mL。疫苗检验合格后在母猪产前40和25 d时试验组后海穴肌内注射4 mL疫苗,空白组不免疫,结果显示试验组与空白组母猪的生产情况无明显差异,所产3日龄仔猪分别免疫不同剂量后体温无显著差异,表明该疫苗对母猪和仔猪均安全性良好。随机挑选试验组与空白组母猪所产3日龄仔猪各20头,分别口服4 mL PEDV-F10病毒培养物,空白组母猪所产仔猪在攻毒24 h后PEDV发病率为100%,抗体均为阴性;试验组母猪所产仔猪只有10%出现了轻微的腹泻症状,仔猪获得了高达90%保护率,且仔猪被动免疫后抗体能持续至35 d以上。以上结果表明,PEDV-GF10变异株通过悬浮细胞培养后病毒滴度显著提高,研制的PEDV-GF10株灭活疫苗安全有效,能够对中国的PEDV变异株达到有效防控,为国内PED防控提供了理论依据。 相似文献
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猪链球菌(Streptococcus suis)是一种重要的人畜共患病致病菌,可导致猪患败血症、脑膜炎、肺炎、关节炎及突发性死亡,也可由猪传染给人,引起人体重症链球菌感染并致死。猪链球菌的鉴定及分型方法很多,但都或多或少存在着一定的缺陷。对猪链球菌的鉴定及分型方法进行了比较,并提出了合理的分型与鉴定步骤。 相似文献
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大姚县从2008年实施云南省现代农业玉米产业技术体系项目四年以来.采取专家联系指导、农业部门股所长带头办样板、技术员入户指导、示范户带动辐射,重点突出选用良种、适时播种、合理密植、科学施肥,及时防治病虫害等措施.项目以“百亩核心区、千亩展示片、万亩示范区”为主要项目实施内容.通过科学技术综合集成推广运用,粮农节本增产增收得到实惠,经济效益、社会效益和生态效益显著. 相似文献
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文章从"固定小班"概念出发,对小班固定的现势性、区划条件、难点、初步方案等进行了探讨,供参考。 相似文献