排序方式： 共有81条查询结果，搜索用时 15 毫秒
61.
[目的] 构建表达绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的重组猪痘病毒（recombinant Swinepox virus,rSWPV）,制备抗GFP单克隆抗体。[方法] 首先合成3'-端含His标签的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）序列EGFP-His,用双酶切方法将其插入到基础质粒载体pSW中,构建重组转移载体pSW-EGFP-His;采用脂质体转染的方法使该载体与SWPV（SWPV-JX20G株）同源重组,经蚀斑纯化获得rSWPV-EGFP-His。重组病毒进行PCR和SDS-PAGE鉴定,扩增并纯化EGFP-His蛋白免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选分泌抗GFP特异性抗体的杂交瘤细胞,制备腹水,对抗GFP单克隆抗体进行效价及特异性鉴定。[结果] PCR和SDS-PAGE结果显示,成功构建并纯化到rSWPV-EGFP-His,该病毒感染PK15细胞可稳定表达EGFP-His蛋白,蛋白大小约27 ku,为可溶性表达,镍柱纯化的EGFP-His蛋白溶液呈明显的绿色。EGFP-His蛋白免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠血清抗体效价高达1：256 000。采用杂交瘤技术制备了9株能稳定分泌抗EGFP-His单克隆抗体的杂交瘤细胞株,间接ELISA和Western blotting结果显示,9株单克隆抗体中的7株针对GFP的线性表位,另外2株单克隆抗体针对GFP的构象表位。[结论] 本研究成功制备了EGFP-His蛋白和9株抗EGFP-His的单克隆抗体,为后续建立GFP的免疫学检测方法提供了必备材料。 相似文献
62.
【目的】确定江西省某猪场哺乳仔猪发生腹泻的病因。【方法】对送检的仔猪小肠样品进行猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)和猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)的RT-PCR检测,将阳性样品接种MA104细胞传代进行PoRV的分离;对分离毒株进行电镜观察、间接免疫荧光试验、PoRV VP4和VP7基因序列测序和动物回归等试验。【结果】猪小肠病料样品经终浓度15 μg/mL的胰酶处理37 ℃孵育2 h,接种MA104细胞,能在细胞上增殖传代,第6代开始表现稳定的细胞病变;电镜观察可见病毒粒子直径大小为61~70 nm,平均大小为65 nm,呈带有短纤突且外缘光滑的形似车轮状的粒子,具有轮状病毒粒子典型的形态特征;间接免疫荧光试验和RT-PCR检测均为PoRV阳性,确定该分离株为PoRV。分离株VP4和VP7基因序列分析显示,VP4基因型与P[23]基因型相似性最高,VP7基因型与G5基因型相似性最高,根据A群轮状病毒最新分类方法,分离株属于G5P[23]型。动物回归试验结果显示,经口感染该分离株的1日龄初生仔猪于感染后24 h左右陆续出现水样腹泻、呕吐等临床症状,并能在粪便中检测到PoRV。【结论】通过MA104细胞连续传代,从江西某猪场的腹泻仔猪小肠样品成功分离到1株PoRV,该分离株属于G5P[23]型PoRV,为哺乳仔猪发生腹泻的病原。 相似文献
63.
素质教育是我国现代化建设发展过程中对学校以及社会、家庭提出的更高要求和艰巨任务.素质教育的提出与实施,不仅在理论上丰富了具有中国特色的教育理论内容,而且在实践上弥补了原有教育存在的许多缺陷.面对复杂多变、竞争激烈的现代社会,人的素质是决定成败的重要因素之一.人的素质包括思想素质、专业素质、人文素质、心理素质和身体素质等诸多方面,情绪智力是心理素质中的重要方面,也是影响成败的重要心理因素.但这恰恰是我国长期以来教育的薄弱环节,有的学校和家庭甚至忽视了情绪智力的作用和培养,本文就情绪智力的作用以及在学校教育中如何进行情绪智力的后天培养等问题作初浅论述. 相似文献
64.
房间里摆满了卤蛋、鸡爪、方便面还有香烟,但这不是杂货店而是大学寝室。笔者昨天获悉,有些大学的大学生纷纷在寝室里售卖小食品,而这种便捷的"寝室超市"也深受大学生欢迎。 相似文献
65.
<正> 为适应经济改革形势需要,不断地为农业科技、经济、社会发展开发智力,开发智力资源,近年来我校从培训适用人才,解决农业建设中的科学技术问题,解决多年来存在的农业教育、科学与经济社会脱节问题,进行了一些有益的探索,积累了一些有用的经验。 相似文献
66.
为了提高股票价格预测精度,提出一种改进支持向量机的股票价格预测模型。该模型利用粒子群算法的全局寻优能力对支持向量机参数进行优化,以提高股票价格的预测精度,采用具体股票价格数据对模型性能进行测试。结果表明,改进支持向量机能够对股票价变化趋势进行预测,是一种有效、高精度的股票价格预测模型。 相似文献
68.
哺乳期仔犬一般是指初生至45日龄的小犬．它们的生理机能尚不健全，各组织器官的适应能力和抗病力都很差，如果饲养管理不当，会导致其生长发育不良，成活率低，从而造成较大的损失。所以，应高度重视哺乳期仔犬的培育。 相似文献
69.
农产品质量安全影响因素研究综述 总被引：3，自引：1，他引：2
农产品质量安全是政府和全社会关注的焦点。通过文献分析,梳理了基于政府保障视角的农产品质量安全宏观影响因素和基于供应链保障视角的农产品质量安全中微观影响因素,包括法律法规体系、标准体系、检验检测体系、监管体系、供应链组织模式、信息传递、收益分配、认知与意识、知识与技术以及信誉。建立了农产品质量安全影响因素模型,评述了宏观因素与中微观因素的相关关系,并指出进一步研究的方向。 相似文献