福寿螺多功能纤维素酶基因egx的克隆及其体外功能性表达     

黄妙容  刘德武  吴珍芳 《中国农业科学》2011,44(17):3641-3648

 【目的】克隆福寿螺多功能纤维素酶基因egx,并在大肠杆菌和哺乳动物细胞中进行表达分析。【方法】通过RT-PCR的方法,从福寿螺胃组织总RNA中克隆福寿螺多功能纤维素酶基因egx序列,连接克隆载体pMD18-T,再通过Eco RⅠ和NotⅠ两个酶切位点分别与表达载体pET-32a（+）及pcDNA3.1（+）连接,构建原核、真核表达载体,并在E.coli BL-21（DE3）和猪肾细胞PK15中进行表达,最后采用DNS法测定表达产物酶学活性。【结果】RT-PCR扩增得到1 326 bp的序列,包括1 185 bp的编码序列和部分侧翼序列,编码序列与已报道的福寿螺多功能纤维素酶基因cDNA序列相似性为99%,氨基酸序列相似性为100%。原核细胞表达产物经包涵体复性后,对羧甲基纤维素钠、2-羟乙基纤维素、羟乙基纤维素、微晶纤维素、木聚糖的水解活性分别为：24.78、15.67、18.42、600.91和175.43 U•mg-1;而在PK15细胞中重组酶对以上5种底物的活性分别为：0.84、0.78、1.01、14.62和4.23 U•mL-1。【结论】克隆出了福寿螺多功能纤维素酶基因,并能在大肠杆菌和哺乳动物细胞中成功地表达。  相似文献   

β4-defensin-i1和DGAT2-i6基因与奶牛产奶性能的相关分析     

许惠  谈成  魏建生  刘德武  闫俊亮 《中国奶牛》2010,(10):3-5

本试验以382头荷斯坦牛DNA样本和产奶量记录为试验材料,用PCR-RFLP方法对与产奶性状有关的主要候选基因β4-defensin-i1和DGAT2-i6进行多态性分析,并对标记位点基因型与产奶量进行了相关分析。结果表明:在所研究的两个基因中,BB基因型个体305d产奶量显著低于AA型和AB型个体(P0.05),AA和AB基因型个体间产奶量差异不显著(P0.05)。  相似文献   

POU1 F1基因多态性与南方荷斯坦牛产奶量的相关性分析     

谈成  许惠  侯明俸  刘德武 《中国奶牛》2010,(12):1-3

采用PCR-RFLP技术研究了364头荷斯坦牛POU1 F1基因第二外显子的TaqⅠ酶切位点(e2-TaqⅠ)和第六外显子的HinfⅠ酶切位点(e6-HinfⅠ)多态性,并分析了两个位点多态性与泌乳量的关系。结果表明,实验群体中这两个多态位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态,e2-TaqⅠ位点等位基因G/A的频率为0.2706/0.7294,e6-HinfⅠ位点等位基因G/A频率为0.3228/0.6772。性状关联结果表明,两个位点的基因型与第一、二胎泌乳量相关性不明显。  相似文献   

宇佐美曲霉木聚糖酶在哺乳动物细胞中的分泌表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

张茂  邹娴  林纯  刘德武  吴珍芳  蔡更元 《中国畜牧兽医》2012,39(1):23-27

本试验旨在从宇佐美曲霉菌株GIM3.36中克隆得到木聚糖酶基因xyn的成熟肽编码序列(555 bp),并将其克隆到真核表达载体pcDNA6/His^TM A中的不同位置,分别得到重组质粒pcDNA-spna和pcDNA-spnb,重组质粒经过酶切、测序鉴定其读码框的正确性。在脂质体介导下将重组质粒转染猪肾细胞(PK15),通过RT-PCR证实其在PK15细胞中表达,并在细胞培养液中测定木聚糖酶酶活,结果显示,重组质粒pcDNA-spna转染细胞后表达的酶活力最高为8.53 U/mL,较pcDNA-spnb表达的酶活(6.87 U/mL)高24%,实现了微生物基因在哺乳动物细胞的分泌表达,为xyn基因在转基因方面的利用提供了依据。  相似文献   

2015 年广东肉牛产业发展形势与对策建议     

曾祥华  李芳  孙明华  万忠  刘德武 《广东农业科学》2016,43(6):7-11

对2014年广东肉牛产量、区域分布、进出口、价格变化、科技发展等现状进行分析,找出当前肉牛产业存在良种普及率低、配套体系不健全、产业链不完善、组织化程度不高等问题,为此提出广东肉牛产业发展要加强组织领导、完善优惠扶持政策、引进推广先进生产管理模式、提高动物防控体系、加强市场培育和引导等对策建议,并对广东2016年肉牛价格进行了预测.  相似文献   

不同品系杜洛克三元杂交猪商品猪胴体及肉质特性遗传分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

全建平  杨明  丁荣荣  杨林雪  刘敬顺  刘佳  顾婷  刘德武  蔡更元  吴珍芳  杨杰  郑恩琴 《华南农业大学学报》2016,37(6):46-51

【目的】对美系杜洛克三元杂交猪与台系杜洛克三元杂交猪的胴体性状和肉质性状进行准确评估,并分析不同杂交组合、性别对胴体及肉质性状的影响。【方法】共选取同一批次杜洛克三元杂交猪203头,其中美系杜洛克三元杂交猪118头,包含50头阉公猪和68头母猪;台系杜洛克三元杂交猪85头,包含57头阉公猪和28头母猪。统一饲养至(110±5)kg,在同一屠宰场屠宰,并测其宰前活体质量、胴体净质量、眼肌面积、背膘厚、眼肌厚度等胴体性状指标和肉色、大理石纹、PSE(Pale,soft,exudative)值、电导率等肉质性状指标,并进行统计分析。【结果】台系杜洛克三元杂交猪除瘦肉率以外的胴体性状均极显著优于美系杜洛克三元杂交猪(P0.01),且台系杜洛克三元杂交猪肉色主观评分、电导率、a*值也显著高于美系杜洛克三元杂交猪(P0.05);而美系杜洛克三元杂交猪的PSE值、剪切力均优于台系杜洛克三元杂交猪(P0.05)。就性别而言,阉公猪较母猪具有更高的背膘(P0.01)和更低的瘦肉率(P0.05);此外,台系杜洛克三元杂交猪母猪具有更高的电导率和L*值(P0.05),而美系杜洛克三元杂交猪阉公猪的大理石纹则显著高于母猪、且眼肌面积更小(P0.05)。【结论】台系杜洛克三元杂交猪胴体性状整体上优于美系杜洛克三元杂交猪,而美系杜洛克三元杂交猪的肉品质部分优于台系杜洛克三元杂交猪。就性别而言,上述2种群体母猪的胴体性状整体优于阉公猪。  相似文献   

初乳不同饲喂方式对荷斯坦母犊健康及生长性能的影响     

王坤  李耀坤  柳广斌  孙宝丽  魏建生  肖帆  陈海坡  周阳  刘德武 《黑龙江畜牧兽医》2018,(4)

为了探索初乳不同饲喂方式对荷斯坦母犊健康及生长性能的影响,确定最佳的初乳饲喂方式,试验选择初生荷斯坦母犊30头,随机分为A、B、C 3组,A组在出生后0.5,6小时分别灌服4 L和2 L初乳;B组在出生后0.5,6小时均灌服3 L初乳;C组在出生后0.5,6,12小时均灌服2 L初乳。犊牛出生后第2天开始按照常规饲养方法饲养至30日龄。统计犊牛体温、呼吸频率、被动免疫、患病及生长发育状况。结果表明:与A组比较,B组犊牛在第一次灌服初乳后0.5小时呼吸频率显著降低(P0.05),体温极显著升高(P0.01),第一次灌服初乳后6小时内站立次数极显著降低(P0.01),30日龄内患病率降低40%,且未出现个体死亡;与C组比较,B组犊牛的被动免疫质量显著升高(P0.05),30日龄内患病率降低30%,15日龄内体斜长增长量和30日龄内平均日增重均显著升高(P0.05)。说明B组的初乳饲喂方式对机体应激小,舒适程度较高,犊牛的健康状况和生长性能优良。  相似文献   

华南地区不同耐热性荷斯坦奶牛血液生化指标比较   总被引：1，自引：0，他引：1  

廖迎新  刘德武  李耀坤  王坤  廖高峰  柳广斌 《黑龙江畜牧兽医》2018,(3)

正应激是机体受到各种内外环境因素及社会、心理因素刺激时所出现的全身性非特异性适应反应,又称为应激反应。引发应激的因素——应激源有多种,主要有寒冷、酷热、潮湿、强光、雷电、气压、噪音、营养缺乏、感觉剥夺、刺激过量、心理社会因素等。热应激的应激源为高热高湿。热应激是指在高环境温度中的机体对热环境机体提出的任何要求所做的非特异性的生理反应的总和,表现为热喘息、心率加快、体内氧  相似文献   

初生和有效乳头数与生产性状之间的相关性分析     

叶健  蔡更元  刘德武  吴珍芳  郑恩琴 《中国畜牧杂志》2018,(8)

本研究旨在评价在独立淘汰方法下初生和终测(有效)乳头数性状是否受到其他生产性状选择的影响。实验选取某大白猪核心育种场约6年的乳头数性状和主要生产性状数据,利用DMU软件和单/双动物模型计算乳头数性状的遗传力及其与主要生产性状之间的遗传相关,并作遗传趋势图。结果表明:在独立淘汰法下,初生乳头数可能因表型收集不准确而存在隐患;初生和有效乳头数遗传力分别为0.38和0.23,为中等遗传力性状;总产仔数和健仔数与乳头数性状呈弱遗传负相关(约-0.15左右),对产仔数性状高强度选择会对乳头数呈不利影响;对背膘厚和体长的选择会对乳头数有利。因此,从长远来看,在母系猪育种中,可能会由于对产仔数性状的高强度选育使母猪泌乳性能降低,提高仔猪饲养难度。  相似文献   

猪群工艺管理新技术——我国的养猪生产模式及现代养猪生产工艺技术     

刘德武  陈君梅  吴珍芳  郑恩琴 《猪业科学》2011,(12):28-33

近年来,随着我国国民经济的迅速发展和人民生活水平的不断提高,推动了养猪业的持续稳定增长,养猪业已成为我国国民经济的重要组成部分。  相似文献