鸡传染性贫血病毒VP1和VP2基因共表达载体的构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈降华  周庆丰  刘忠华  李文平 《动物医学进展》2009,30(11):68-71

根据GenBank中收录的鸡传染性贫血病毒(CIAV)基因组序列,设计了扩增CIAV VP1和VP2基因的特异性引物,运用PCR技术从发病鸡肝组织DNA中扩增得到VP1、VP2基因,并将其克隆至pMD18-T载体.核苷酸测序结果显示,其序列与发表的序列同源性达到99.8%.将VP2基因克隆到pMD18-T载体,并对Vp3基因起始密码子进行定点突变,得到突变基因mVP2.将mVP2、VP1先后克隆至pIRES载体,并转化大肠埃希菌JM109,提取质粒通过酶切鉴定显示,成功获得了共表达质粒pIRES-VP1/mVP2.  相似文献   

锌胁迫对国槐幼苗生长及生理特性的影响     

刘东超  李慧  徐瑞瑞  黎俊伶  刘忠华 《中国农学通报》2021,37(16):18-25

为探讨国槐(Sophora japonica)对重金属锌的耐受能力,以水培的3月龄国槐幼苗为试验对象,探讨不同浓度(1、50、200、350、500 μmol/L)锌处理对其生长发育、叶绿素荧光参数、丙二醛含量和抗氧化酶活性的影响。结果表明,在锌胁迫下,国槐幼苗生长量指标呈现明显的“低促高抑”现象,同时,根系对锌胁迫较为敏感;不同浓度锌处理使叶绿素荧光参数变化显著,F₀和Φ_NPQ随锌浓度增加呈先减少后增加的趋势,而F_v/F_m、Φ_PSII及SPAD值则呈相反的变化趋势。在锌胁迫后7、14、21、28天,丙二醛含量随处理浓度增加呈先减少后增加趋势,同时随胁迫时间的增加而增加;抗氧化酶活性均随锌处理浓度的增加呈先增加后减少的变化趋势,当胁迫时间延长时,超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性逐渐下降,过氧化物酶活性在处理21天达到峰值后开始下降。研究认为,国槐幼苗能够适应一定浓度的锌胁迫环境,在浓度不高于200 μmol/L的锌环境下有较强适应能力,在高于200 μmol/L的锌胁迫下会受到锌毒害。  相似文献   

皱皮木瓜品种的遗传多样性和SSR指纹图谱分析     

李慧  徐瑞瑞  刘东超  李圣波  刘忠华 《分子植物育种》2021,19(22):7519-7529

为研究山东省皱皮木瓜品种间的亲缘关系远近,本研究利用PCR结合毛细管电泳法对60份皱皮木瓜种质资源进行遗传多样性分析及指纹图谱构建.所选用的10对多态性高、带型稳定的引物共扩增出55个多态性位点;观测杂合度和期望杂合度的平均值分别为0.392和0.590;Shannon信息指数和Nei's遗传多样性指数的平均值分别为1.184和0.585;PIC值在0.238～0.819之间,平均值为0.547;聚类分析结果显示,遗传相似系数变幅为0.55～0.96,说明60份皱皮木瓜品种具有较为丰富的遗传多样性.在遗传相似性系数0.662处可将所有供试材料分为3大类.对60个皱皮木瓜品种进行指纹分析,发现具有特征谱带的品种共19个;采用6对引物组合(Nak2,Nak3,Nak5,Nak6,Nak7和Nak10)的方式构建了能够有效区分60个皱皮木瓜品种的指纹图谱.引物Nak5具有较强的鉴别力,在进行图谱构建及分子鉴定中可优先采用.本研究可为皱皮木瓜的遗传资源管理、良种鉴定提供理论基础,同时为品种选育提供参考依据.  相似文献   

乙醇浸提法提取槐角愈伤组织中异黄酮的研究     

溥丽华  刘忠华  魏振园  王晋飞 《种子》2012,31(1):1-4

以国槐槐角培养出的愈伤组织为试材,以槐角苷为标准品,利用紫外可见光分光光度法研究乙醇浸提法提取国槐槐角愈伤组织中异黄酮的工艺条件。在单因素试验的基础上,设计了L9(34)(4因素3水平)的正交试验。研究结果表明:乙醇浸提法提取槐角异黄酮的最佳工艺条件为:提取温度75℃;提取时间9 h;提取乙醇浓度60%;提取的液料比70∶1,槐角异黄酮的最大提取量为:12.045 mg/g。  相似文献   

翅荚木干形分析及材积估测     

潜伟平  刘忠华  周德中  黎敬云 《林业实用技术》1999,(3)

翅荚木是我国南方新发掘的一种特有的珍稀树种。运用主分量分析方法，建立该树种生长过程的平均干形曲线方程，其拟合精度较好，复相关系数Ｒ＝０９９８８；由此推算出的材积公式，计算的材积精度较高。  相似文献   

金黄地鼠体外受精的初步研究     

刘忠华  陈震宇  李子义  孙兴参  贺桂馨  宋鹏  谭景和 《黑龙江动物繁殖》1996,(1)

实验用ＴＹＨ、Ｔ６两种培养液做为精子获能培养液和受精培养液进行了金黄地鼠的体外受精。用经获能培养的精子分别与具卵丘和去卵丘的卵子进行受精培养。结果在ＴＹＨ中分别得到了２７．５％和３３．３％的受精率。在Ｔ６中得到了４７．２％和２６．３％的受精率；用未经获能培养的精子分别与具卵丘和不具卵丘卵子进行受精培养，结果在ＴＹＨ中得到了４１．８％和７．１％的受精，在Ｔ６中得到了４８．５％和５７．７％的受精率。实验结果说明：（１）适用于小鼠体外受精的培养液Ｔ６和ＴＹＨ并不适合于金黄地鼠，其主要原因是不能使精子有效获能；（２）卵丘细胞的存在有使受精率提高的趋势；（３）来自不同公鼠的精子的受精能力差异很大，进行体外受精时必须严格挑选公鼠  相似文献   

重庆市多穗柯生长区土壤有机质含量和养分含量的差异分析     

朱嘉磊  袁金凤  牛亚洁  刘忠华  沈应柏 《水土保持通报》2015,35(6):36-40

[目的]研究多穗柯在重庆市生长环境的土壤养分和有机质含量的差异,为该区野生甜茶的资源管理提供参考。[方法]采集多穗柯生长区土壤样品,对土壤样品化学性质进行测定。[结果](1)经过不同地区土壤剖面有机质含量比较,重庆市奉节龙池乡华吉村多穗柯生长区土壤表层有机质在各个地区含量最多,为3.95g/kg,并对多穗柯茶生长区土壤化学性质具有很大的影响。(2)各个地区多穗柯生长区土壤剖面化学性质存在显著性差异,尤其是土壤全N含量在土壤表层和深层存在及其显著性差异。(3)土壤全N含量在重庆梁平龙胜乡龙胜村样地表层出现最大值,达到了0.94g/kg;土壤速效钾含量也是在重庆市梁平龙胜乡龙胜村样地表层出现最大值,达到了115mg/kg;土壤速效磷含量在重庆北碚东阳镇艾路村样地出现最大值,为4.7g/kg。[结论]依据多穗柯甜茶生长区土壤肥力状况差异,结合样地实际情况分析表明,重庆市梁平龙胜乡龙胜村地区的土壤肥力水平在各个调查样地是最优的。  相似文献   

八聚体结合转录因子4在哺乳动物早期胚胎发育中的研究进展     

齐子成  刘忠华 《中国畜牧兽医》2021,48(10):3715-3725

  相似文献   

猪肌肉生长抑制素基因启动子的克隆与鉴定     

姜丹丹  牟彦双  李慧  王加强  刘忠华 《畜牧与兽医》2011,43(9)

利用PCR方法从猪基因组DNA中扩增了1.2 kb的肌肉生长抑制素(myostatin)基因启动子序列。并进一步以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,构建了真核表达载体MSTNPro-EGFP;通过转染C2C12小鼠骨骼肌成肌细胞和猪成纤维细胞,对猪myostatin基因启动子的转录调控活性进行鉴定。结果表明:猪myostatin基因启动子可以启动GFP在C2C12细胞中的转录和表达,而将猪MSTNPro-EGFP载体转染猪胎儿成纤维细胞后并未观察到GFP的表达,说明myostatin基因表达的肌肉特异性源于启动子的转录特异性。  相似文献   

鹅肝脏蛋白质提取与双向电泳分离技术研究     

刘忠华  杨晓勤  张军  段修军  王健  董飚  龚道清 《中国家禽》2011,33(21)

利用TCA-丙酮沉淀一裂解液溶解法提取朗德鹅肝脏蛋白质,然后采用常规双向电泳技术对提取的蛋白质进行分离,利用PDQuest软件分析电泳图谱,统计蛋白质点及比较凝胶重复性.试验得到(712±15)个蛋白质点,蛋白主要集中在pI 4.0～7.0和43.0～97.4 ku,重复胶的匹配点数为694个,蛋白质点匹配率为96％,蛋白量的相关系数为0.875.本研究建立了朗德鹅肝脏蛋白双向电泳技术,双向电泳图谱中蛋白位点的分辨率和重复性较高,为进一步研究其蛋白质组学奠定了基础.  相似文献