牛分枝杆菌特异性PCR检测方法的建立及初步应用   总被引：12，自引：0，他引：12  

刘思国  王春来  宫强  王牟平  彭永刚  张秀华  郭洋  郭设平  邵美丽 《中国预防兽医学报》2006,28(1):80-83

根据已发表的牛分枝杆菌的pncA的基因序列，设计和合成了一对可扩增294bp目的片段的引物，建立了特异性检测牛分枝杆菌的PCR方法。对牛分枝杆菌国际参考株和国内分离株成功扩增出294bp的特异性基因片段；对人结核分枝杆菌、副结核分枝杆菌、鸟胞内分枝杆菌和草分枝杆菌DNA的PCR扩增结果均为阴性。本PCR方法检测的敏感度可达到50pg。对10份牛分枝杆菌培养阳性和10份阴性样品的DNA分别进行了PCR检测，结果10份阳性样品中有9份样品为PCR扩增阳性，阳性符合率为90％（9／10）；而10份阴性样品则PCR扩增全部为阴性，阴性符合率为100％（10／10）。本方法可做为牛分枝杆菌的快速检测和流行病学调查的工具。  相似文献   

鸭病毒性肝炎研究进展   总被引：6，自引：0，他引：6  

王勇  李广兴  刘思国 《畜牧兽医科技信息》2007,(3):7-9

鸭病毒性肝炎(Duck viral hepatitis,DVH)是由鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)引起雏鸭的一种高度致死性传染病。该病发病急,病程短,发病率和死亡率高,严重威胁养鸭业健康发展。1流行病学1.1I型DHVI型DHV最早于1945年由Levine和Hofstad在美国发现,并在1950年用鸡胚分离到I型DHV,此后加拿大、英国、德国、意大利、匈牙利、前苏联、印度、日本  相似文献   

增强猪传染性胸膜肺炎灭活苗对小鼠保护力的研究     

王勇  刘思国  王春来  邵美丽  刘建东  宫强  迟磊  赵昆  郭设平  李广兴 《中国预防兽医学报》2007,29(6):442-447

为了提高猪传染性胸膜肺炎灭活苗的保护力,本研究利用基因重组技术表达了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌6种主要致病因子蛋白:rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ、rApxⅣ、rApfa和rOMP。设立试验Ⅰ组(灭活苗),试验Ⅱ组(灭活苗、rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rOMP),试验Ⅲ组(灭活苗、rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rApxⅣ),试验Ⅳ组(灭活苗、rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rApfa)和空白对照组(PBS),每组26只BALB/c小鼠,分3次免疫,每次间隔2周,每周检测血清抗体水平,在免疫后第2周、第4周和第5周,MTT法检测脾脏T细胞增殖水平及ELISA法测定IFN-γ分泌水平。在第3次免疫后的第7 d,将每组剩余20只小鼠平均分成2组,分别以APP1型菌(5×10~9 CFU)和APP7型菌(1×10~(11) CFU)进行攻毒保护试验。结果表明,向灭活苗中添加重组亚单位成份可以提高机体的细胞免疫和体液免疫水平,并能提高灭活苗的交叉保护率;试验Ⅱ组的ApxⅠ和OMP抗体水平以及细胞免疫水平均显著高于其它各组(p<0.05),对于APP1和APP7型菌的攻毒也提供了明显优于其它各组的保护结果,试验Ⅲ、Ⅳ组的细胞、体液免疫水平及保护率较试验Ⅰ组也有所提高。结果显示出ApxⅠ、OMP抗体水平和细胞免疫水平与攻毒保护率之间存在着正相关性,向灭活苗中加入重组蛋白成份可以提高疫苗的交叉保护,试验Ⅱ组通过激活体液免疫和细胞免疫,对两个血清型APP的攻击提供了很好的保护作用,从而为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。  相似文献   

仔猪注射牲血素引起感染的诊断     

杨  陈红  刘思国 《四川畜牧兽医》1998,(4)

１发病情况某农户自养２头经产母猪,１头于１９９５年３月１０日分娩,产仔猪１２头,仔猪出生后发育情况良好。３日龄时均注射牲血素,仔猪于注射当天晚上死亡２头,发病后注射青霉素无效,第２天下午１２头仔猪均死亡,病猪主要症状,身体变软,牙关紧闭,四肢游动,发...  相似文献   

中国鸡传染性支气管炎病毒的变异   总被引：11，自引：0，他引：11  

江国托  刘思国 《中国畜禽传染病》1998,20(6):321-323

同ＩＢＶ参考株比较,中国ＩＢＶ流行株血清型内和血清型间在基因型和组织嗜性上均已发生变异,研究首次表明ＩＢＶ血清型,基因型及组织嗜性间存在有规律的相关性,病毒免疫原Ｓ１基因的点突变在一定程度上影响病毒的免疫原性。  相似文献   

鸡传染性支气管炎的免疫机制研究进展     

刘思国  江国托 《预防兽医学进展》1999,1(1):17-20

  相似文献   

鸡传染性支气管炎病毒华南分离株核蛋白基因的序列测定及同源 …   总被引：8，自引：4，他引：4  

刘思国  刘明春 《中国兽医学报》1999,19(4):324-326

根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）核蛋白基因序列，设计并合成１对引物。应用这对引物，以ＲＴ－ＰＣＲ特异性扩增出华南分离株（ＨＮ株）的核蛋白基因，基因产物大小为１．５ｋｂ，与设计相符。对ＨＮ株部分核蛋白基因进行序列测定，并与标准毒株Ｈ５２，Ｍ４１，Ｂｅａｕ和Ｇｒａｙ的核蛋白基因进行同源性比较，结果表明，ＨＮ株与Ｈ５２、Ｍ４１、Ｂｅａｕ和Ｇｒａｙ株的核酸同源性分别为８５％、８４％８４％和８  相似文献   

鸡常见病临床验方简介     

刘思国  何平 《新疆农垦科技》2000,(1)

笔者从事鸡病临床诊治多年,积累了较为有效常见鸡病临床验方,现介绍如下.  相似文献   

猪传染性猪胸膜肺炎APXIVA毒素特征的研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

李敏姜国彦  彭永刚刘思国 沈国顺 《畜牧兽医科技信息》2004,(9):11-12

猪胸膜肺炎放线杆菌是引起猪传染性猪胸膜肺炎(APP)的病原菌。猪传染性猪胸膜肺炎是猪的一种重要的呼吸道疾病，发生在多数养猪国家，其重要性在于本病能引起猪的死亡，并对各国的经济造成了巨大的损失。因此，研究者对该病及其病原菌作了广泛而深入的研究，尤其近几年在分子水平对该病原菌的研究取得了可喜进展，对一些致病因子基因的研究给该病的防治与治疗带来了许多帮助。  相似文献   

PCR方法快速检测鸡传染性支气管炎病毒     

刘思国  江国托  康丽娟  刘明春  刘忠贵  卢景良 《动物医学进展》1999,(3)

本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性 Ｐ Ｃ Ｒ 方法。通过对纯化后 Ｉ Ｂ Ｖ核蛋白基因进行直接 Ｐ Ｃ Ｒ及套式 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增表明，两次 Ｐ Ｃ Ｒ 产物的大小为０．７ ｋｂ 和０．５ ｋｂ，与实际设计相符。而对照的 Ｎ Ｄ Ｖ 及 Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 的 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增产物均为阴性。用 Ｉ Ｂ Ｖ Ｈ Ｂ株感染 Ｓ Ｐ Ｆ鸡后，应用我们所建立的 Ｐ Ｃ Ｒ 方法去检测不同时期所采集的肾脏、气管、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏中的 Ｉ Ｂ Ｖ，在 Ｓ Ｐ Ｆ鸡感染 Ｉ Ｂ Ｖ后的２１ ｄ 仍然能够检测到 Ｉ Ｂ Ｖ 的基因组， Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ 杂交试验证明了我们获得的 Ｐ Ｃ Ｒ 产物为 Ｉ Ｂ Ｖ 的核蛋白基因。该 Ｐ Ｃ Ｒ 检测方法比免疫荧光抗体（ Ｆ Ａ）法更具敏感、特异、快速等特点，完全适用于不同来源及不同血清型 Ｉ Ｂ Ｖ 的检测。  相似文献