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生长激素释放肽-6缓释微球的制备及其对动物生长的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
以生物降解材料乳酸乙醇酸共聚物(PLGA,LA-GA 8515)为载体,采用复乳-液中蒸发法制备含生长激素释放肽-6的乳酸乙醇酸共聚物微球,并通过体外药物释放试验评价载药微球的释药特征.结果得到收率、粒径大小和分布及含药量均满意的微球,其中包封率为100%,平均体积径为3.45μm,收率为79%.在37℃、pH7.0的生理等渗缓冲液中,首日释药19.19%,其后以平均日释药3.23%的速度释药25 d.小鼠肌肉注射微球30 d后,累积增重比注射生长激素释放肽-6、生理盐水分别高22.56%(P<0.05)和53.17%(P<0.01).结果表明,生长激素释放肽-6乳酸乙醇酸共聚物微球有望发展成为新型长效制剂. 相似文献
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在对生长激素释放因子(GRF)基因改造和化学合成,并构建了其真核表达载体pCDNA3-GRF(1-32)的基础上.用Lipofectin将上述载体转染CHO细胞进行瞬时表达,采用体外单层垂体细胞培养的方法对表达的GRF(1-32)进行了体外生物活性测定,即先将垂体用酶进行消化,再将消化细胞培养,形成单层细胞,利用其能合成与释放生长激素的能力来检测GRF的活性。结果表明:表达产物可刺激生长激素释放,并且比对照组提高3.8倍, 相似文献
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热应激对小鼠精液品质的影响及其在全球变暖背景下的生态意义 总被引:1,自引:0,他引:1
为了研究全球变暖和局部极端高温气候对雄性小型啮齿类动物繁殖能力的影响,建立小鼠热应激模型,设立5个温度组28、31、34、37和40℃,其中28℃组为对照组。在14d内分别在第1天—第3天、第5天、第7在、第10天和第14天检测小鼠的精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率。结果显示,温度越高,精液质量下降越快;温度在较温和的范围内变动时,精液质量随温度的升高而呈现下降的趋势,但经过一段时间的适应,有所回升;在极端温度(40℃)胁迫下,小鼠的精液质量持续下降而不能得到恢复。这说明,高温影响下,雄鼠的繁殖能力存在适应性生理调节过程,但影响是相当明显的,至少在短期内不能恢复到原来水平。由此可以推断,自然界中,较长的精液品质下降期和恢复期可能打破了与雌鼠发情周期的同步化(如果高温对雌鼠影响不大),在自然界中可能对雌鼠的受孕率产生明显影响。此外,即使雌鼠能在雄鼠精液品质恢复期之前受孕,精子损伤也会明显降低受孕率,还可能产生活力低下、畸形或存在其他生理缺陷的后代,进而影响成活率。 相似文献
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为探讨抗热应激添加剂对热应激状态下小鼠精液品质的影响,选取年龄和健康状况相近的成年雄性鼠150只,按照常温、热应激、添加剂处理后热应激的方式进行分组试验,对各组精液品质等指标进行统计分析。结果表明,3组热应激添加剂在缓解热应激小鼠的精液品质的影响效果上存在显著差异,其中效果最好的为中药组,其次是电解质组,最后是维生素组。从Hsp70mRNA表达量上来看,抗热应激添加剂组明显高于常温对照组。但与热应激组比较,维生素组与电解质组表达量低,而中药组表达量高。 相似文献
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生长激素释放因子在CHO细胞的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
在对生长激素释放因子 (GRF)基因改造和化学合成 ,并构建了其真核表达载体 pc DNA3- GRF(1- 32 )的基础上 ,用 L ipofectin将上述载体转染 CHO细胞进行瞬时表达。提取转染细胞总 RNA,用 RT- PCR和 Dot blotting检测 GRF基因的表达情况 ,用 Western blotting检测转染细胞上清液的表达产物 ,均得到了阳性结果。制备大鼠垂体单层细胞 ,测定表达产物的生物学活性 ,结果表达产物可刺激生长激素释放 ,并且比对照组提高 3.8倍。试验结果表明 ,已构建的真核表达载体 pc DNA3- GRF(1- 32 )能表达出有生物学活性的 GRF。 相似文献
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依据GenBank已发表的猪干扰素α1(poIFN-α1)成熟肽基因序列,胸腺肽α1(THY-α1)蛋白序列及Escherichia coliB密码子使用频率表,优化并人工合成poIFN-α1和THY-α1基因,利用SOE-PCR法在poIFN-α1和THY-α1之间设计1个13肽Linker。将融合基因克隆至pRSFDue-t 1表达载体,转化BL21(DE3)感受态,37℃培养至菌液OD600为0.6~0.8,IPTG(0.5 mmol/L)诱导,20℃培养12h,SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果表明:目的蛋白为菌体内可溶性表达,经强阴离子交换层析和疏水层析纯化获得高纯度poIFNα1-THYα1融合蛋白。 相似文献
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普通质粒载体与Semliki森林病毒复制子载体表达GHRH的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
新一代Semliki森林病毒RNA复制子源自甲病毒属Semliki森林病毒的基因组,它克服了一些现有的DNA和RNA载体表达效率低的缺点。复制子保留了编码病毒复制酶的基因,结构基因被外源基因所取代。复制酶能够使RNA在胞质中高水平的复制以及外源基因高水平的表达。为了评价SFV复制子载体提高外源基因表达的效力,本研究首先对pIRES-neo表达载体用BamHⅠ酶切和去磷酸化,连接LacZ基因,构建了普通真核表达载体pIRES-neo-LacZ。然后采用脂质体介导分别将含报道基因LacZ复制子载体pCMV-rep-LacZ和两个普通表达载体pLNCX-LacZ、pIRES-neo-LacZ转染293细胞;将表达GHRH的复制子载体pCMV-Rep-GHRH和普通载体pIRES-GHRH、pCDNA3-GHRH转染293细胞。分别对不同载体转染细胞表达的β-半乳糖苷酶以及利用RIA 、RT-PCR对表达的GHRH进行了定量分析,结果表明:复制子载体表达外源基因的效率比非复制子载体高2~3倍。本研究为提高外源基因在真核细胞的表达提供了有益的探索。 相似文献
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犬特异性转移因子的制备及其免疫活性检测 总被引:2,自引:0,他引:2
采用冻融-透析法提取了猪脾脏转移因子(TF),并对其理化特性及免疫活性进行了检测。首先,利用环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型,通过MTT法比较犬脾特异性转移因子对免疫抑制小鼠、生理盐水接种小鼠和正常小鼠的淋巴细胞转化的作用。结果表明犬脾特异性转移因子和PHA对免疫抑制小鼠的外周血淋巴细胞转化具有明显的免疫增强作用,与对照组相比差异极显著(P0.01),其中犬脾特异性转移因子免疫增强作用显著高于PHA组(P0.01)。而对生理盐水组和正常小鼠的外周血淋巴细胞转化与免疫抑制小鼠基本一致,犬脾特异性转移因子和PHA对生理盐水组和正常小鼠的淋巴细胞均表现出一定的免疫增强活性,犬脾特异性转移因子免疫增强作用显著高于PHA组(P0.01)。 相似文献