GHRP温控缓释系统的建立及对动物生长的影响     

刘中禄  张永亮  徐丽  刘松财  张明军  刘丽 《中国兽医学报》2009,29(10)

在体凝胶(In situgel)在药学、生物技术领域各个方面的应用,包括药物输送、细胞膜包覆和组织修复等.本试验采用了温敏缓释栽药系统,制备了GHRP-6温敏缓释系统,研究其对动物生长的影响.结果显示,Vc系獭兔肌注GHRP-6温敏缓释凝胶7、14、21、28 d后,2、4 g/L组累积增重效果分别比生理盐水组高25.83%～63.37%;肌注GHRP-6温敏缓释凝胶血清IGF-I浓度:注射7 d后,2,4 g/L组分别比生理盐水组高16.31%(P<0.05),27.98%(P<0.01);注射14 d后,2、4 g/L组分别比生理盐水组高37.43%(P<0.01)、47.17%(P<0.01);注射28 d后,2、4 g/L组分别比生理盐水组高31.71%(P<0.01)、40.14%(P<0.01).试验证明,GHRP-6温敏缓释凝胶能显著增高血清中IGF-I浓度,促进Vc系獭兔生长,血清中IGF-I浓度与Vc系獭兔累积增重呈正相关.  相似文献   

牛Nramp1基因5′调控区序列的克隆及序列分析     

张利博  ;王洪梅  ;王长法  ;李秋玲  ;黄金明  ;仲跻峰  ;刘松财 《兽医大学学报》2009,(9):1174-1178

采用LA—PCR技术扩增牛Nramp1基因2515bp的5′调控区序列,构建了重组克隆载体pEASY—T3-Nramp1,对阳性克隆进行了PCR扩增、限制性酶切鉴定、DNA测序及生物信息学分析。结果表明,试验成功构建了包含Nramp1基因5′调控区的重组质粒。经同源性比对发现,Nramp1基因5′调控区在不同物种中具有一定的保守性,在转录起始位点近端的启动子区域,牛与人、鼠、猪、羊的同源性分别是60．50％,58．52％,72．18％,81．95％。经预测．该调控区富含GR、SP1、c—Ets-1、NF—W2等转录因子结合住点。本研究为进一步确定牛Nramp1基因核心启动子区域及该基因的表达调控奠定了理论基础。  相似文献   

松属植物天然多糖研究进展     

官员  张大伟  刘伟  郝琳琳  刘松财 《安徽农业科学》2012,40(25):12357-12359,12370

文中结合课题组以往对松多糖的研究和国内外研究情况,对松属植物多糖研发进展作一总结,旨在为松多糖的综合利用提供科学依据,并为松属植物活性天然产物的研究与开发奠定基础。  相似文献   

乳铁蛋白基因启动子元件调控效应分析     

金晶  许无恨  李明谦  张鹏  马强  房希碧  官员  张英  于浩  郝琳琳  刘松财 《中国兽医学报》2012,32(4):573-576,582

本试验先后进行2轮载体构建及转染试验,对牛乳铁蛋白基因启动子元件调控效应进行了分析。首先进行第1轮载体构建及转染试验：采用PCR方法,利用4对引物从牛乳铁蛋白基因5′调控区-1 799向3′端依次缺失500bp进行调控序列扩增,将获得的扩增片段替换pEGFP-N1的CMV启动子,构建了4个重组载体,将重组载体转染牛乳腺上皮细胞（BMEC）,经筛选获得稳定的单克隆细胞,测定并比较各组细胞的荧光强度。在以上试验基础上,为进一步精确确定牛乳铁蛋白基因启动子顺式调控元件序列,进行第2轮载体构建及转染试验,方法同第1轮。结果表明,牛乳铁蛋白基因上游调控序列-1 323～-1 372存在负调控元件,-1 372～-1 560存在正调控元件。  相似文献   

犬干扰素α1与胸腺肽α1融合蛋白原核表达系统的建立   总被引：1，自引：1，他引：0  

刘宇鹏  吴琼  张明军  郝林琳  刘慧玉  刘松财 《中国兽医学报》2008,28(12)

依据IFNα1和THYα1的分子结构特征设计了1个连接肽,根据氨基酸序列和大肠杆菌密码子的偏爱性,采用PCR方法合成了三者融合基因,将该基因克隆至pGEX4T-2载体中,构建了pGEX4T-2-IFNα1-THYα1原核表达质粒。将重组质粒转化至BL21(DE3)受体菌中,37℃培养至D600为0.6~1.0时,IPTG(1.0 mmol/L)诱导培养4 h,经SDS-PEGA和Western-blot鉴定,目的蛋白获得高效表达。  相似文献   

马鹿茸不同部位IGF-1含量的比较分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

郝林琳  刘松财  任晓慧  戴建威  王伟  张永亮 《经济动物学报》2005,9(4):201-203

采用醋酸溶液和乙醇提取了6支马鹿茸的主杠尖部、中部、根部3个部位的多肽,进行了IGF-1的SDS-PAGE和Western blot分析,采用RIA法测定了马鹿茸酸粗提物及醇提多肽的IGF-1含量。结果表明,酸粗提物中IGF-1存在游离和与结合蛋白结合两种形式,醇提物中只存在分子量为7.5 ku的游离IGF-1。马鹿茸不同部位酸粗提物和醇提物之间IGF-1含量经RIA法检测表明,主杠尖部、中部、根部3个部位IGF-1含量差异显著,其中尖部IGF-1含量分别比中部和根部高43.10%(P<0.01)、284.83%(P<0.01),中部比根部高168.93%(P<0.01);经醇提后,各部位之间IGF-1含量差异显著,其中尖部IGF-1含量分别比中部和根部高42.33%(P<0.05)、164.04%(P<0.01),中部比根部高85.51%(P<0.05)。该试验为马鹿茸的分段利用提供了内在质量上的依据。  相似文献   

生长激素释放因子(GRF)在动物肌肉组织的表达   总被引：5，自引：0，他引：5  

张永亮  欧阳红生  刘松财  连继勤  冯立文  赵建军  张玉静 《中国兽医学报》2000,20(3):239-242

向大鼠后肢小腿前部注射生长激素释放因子 ( GRF)的表达质粒 pc DNA3 -GRF4 0 μg,于注射后 2 d开始 ,每隔 5d杀 2只取样 ,提取 RNA和 DNA,用 PCR和 RT-PCR检测质粒及其表达。结果表明 ,在 3 0 d时仍为阳性结果。注射部位肌肉组织免疫组化检测结果表明 ,在部分大鼠 ( 1 4/ 2 4 )的肌肉组织中检测到了 GRF分子。给家兔注射 pc DNA3 -GRF质粒 1 0 0μg(第 组注射质粒 ,第 组注射含 1 0 %甘油的质粒 ) ,于注射后 1 d开始采血分离血清 ,用 RIA法测定血清生长激素 ( GH)的水平。结果表明 ,第 组在 5d时 ,GH水平上升2 7.1 %( P <0 .0 5)。本研究结果表明 ,外源 GRF在肌肉组织可获得表达 ,并能提高动物体内的 GH水平  相似文献   

活体电穿孔方法提高外源GRF基因在小鼠肌肉组织中的表达     

齐剑英  刘松财  戴建威  丁景华  杨丽华  江青艳  张永亮 《中国兽医学报》2010,30(7)

向小鼠后肢小腿肌注pGRF表达质粒并加以电穿孔条件,注射剂量分别为5,10,50μg,于注射前及注射后10,20,30d测体质量,并采血分离血清测血清GRF水平。结果显示,5μgpGRF质粒电穿孔组注射后10dGRF分别比对照组、5μgpGRF质粒组升高44.73%(P0.05),12.86%(P0.05);血清中GRF水平升高。30d累积增重,5μgpGRF质粒电穿孔组分别比对照组、5μgpGRF质粒组高11.46%,6.75%(P0.05);10μgpGRF质粒组分别比对照组和10μgpGRF质粒电穿孔组高19.52%(P0.05),19.42%(P0.05)。50μgpGRF质粒组45d累积增重分别比对照组、pGRF质粒电穿孔组高14.00%,12.00%(P0.05)。结果表明,电穿孔处理可提高GRF基因在小鼠肌肉中的表达。  相似文献   

生长抑素与乙肝表面抗原真核表达载体构建及其对Vc獭兔生长的影响   总被引：2，自引：2，他引：2  

戴建威  刘松财  任晓慧  韩烨  郝林琳  张永亮 《中国兽医学报》2006,26(1):1-5

人工合成生长抑素（Somatostatin，SS）基因。与乙肝表面抗原基因融合，插入pMD-18T克隆载体。经序列分析证明，所得目的基因743bp，与设计一致。提取质粒后用Sma I和Nhe I双酶切。克隆入pIRESlneo-CMV表达载体。构建pIRES-HBsAg／SS质粒。用乳酸乙醇酸共聚物包裹后。在Vc獭兔后肢进行肌肉注射。比较与注射生理盐水的对照组的增重差异，结果发现60d后。试验组家兔累积增重比盐水组高61．02％（P〈0．01）。  相似文献   

甜味蛋白(brazzein)基因的人工合成及其在大肠杆菌中的重组表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘松财  张永亮  任晓慧  张明军  柳巨雄  冯立文 《中国兽医学报》2006,26(5):538-540

根据从西非植物Pentadiplandra brazzeana Baillion果实中分离的甜味蛋白brazzein的成熟区氨基酸序列，采用大肠杆菌（Escherichia coli）偏爱的密码子，人工合成了5对寡聚核苷酸序列，经体外连接和PCR扩增后得到了187bp的brazzein的编码序列，将该序列插入pET-28a载体构建成重组表达载体pET-Br。将pET-Br转化至大肠杆菌BL-21细胞，诱导表达后得到了与预计相对分子质量相同的蛋白。该蛋白约占细菌可溶性蛋白的18．9％，分离纯化后通过蛋白复性，得到有微甜味的产物。  相似文献