发酵床垫料中微生物16S rDNA PCR反应条件的建立与优化     

杜东霞  尹红梅  张德元  刘标  许隽  王震  贺月林 《农业环境与发展》2014,(5)

为探讨发酵床垫料中微生物16S rDNA基因扩增实验中诸多因素对实验结果的影响,采用单因素法对16S rDNA基因扩增时PCR反应体系中的5个潜在因素(Mg2+、dNTP、引物、Taq酶、模板DNA)5水平上进行优化实验,并进一步优化了反应程序中的退火温度、循环次数。结果表明:25μL的最佳反应体系为:10×PCR buffer 2.5μL、MgCl22.0 mmol·L-1、dNTP 0.2 mmol·L-1、引物0.2μmol·L-1、Taq DNA聚合酶0.5 U、模板DNA 50 ng;最佳反应程序为:在94℃下进行4 min预变性;随后循环扩增25个循环(包括94℃变性45 s,53.7℃退火30 s,72℃延伸90 s);最后在72℃下延伸10 min。  相似文献   

1株畜禽粪便堆肥脱氨除臭菌的筛选及特性   总被引：1，自引：0，他引：1  

尹红梅  刘标  郭照辉  许丽娟  杜东霞  陈薇 《江苏农业科学》2020,48(17):261-265

为了探索微生物除臭菌对畜禽粪便中氨气的处理效果,采用富集、平板划线分离法,从堆肥样品中共分离出25株菌株,通过氨气选择性培养基筛选出1株高效抑制氨气的菌株,命名为菌株YS1。根据形态学观察、内部转录间隔区(ITS)rDNA序列同源性比对、系统进化分析对菌株YS1进行多相鉴定,初步鉴定该菌株为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。结果表明,菌株YS1接种到硝化培养基后反应96 h,NH~+_4-N含量从100.0 mg/L下降至9.4 mg/L,NH~+_4-N的去除率达90.6%,体系总氮削减率达58.6%。在反硝化培养基中反应96 h,NO~-_3-N的浓度由初始的99.3 mg/L下降为17.6 mg/L,降解率达82.3%,体系总氮削减率达35.4%。溶血性试验表明,YS1菌株无溶血性。  相似文献   

开放式臭氧浓度升高条件下转Bt（Cry1Ab/Ac）基因水稻的光合特性     

李春华  朱建国  刘标  曾青  罗克菊  唐昊冶  刘钢  张国安 《中国农业科学》2012,45(3):426-434

【目的】明确臭氧（O3）浓度升高对转Bt基因水稻（Oryza Sativa L.）光合特性的影响。【方法】利用中国农田开放式O3浓度升高（O3-FACE）研究平台,以Bt汕优63（Bt-SY63） 及汕优63（SY63）为试验材料,采用盆栽种植,分别于处理26 d、47 d和75 d对其光合特性相关生理指标进行测定分析。【结果】随着O3处理时间的延长,Bt-SY63和SY63剑叶净光合速率（Pn）呈现下降趋势,与各自对照相比75 d时分别下降21.1%和15.1%（P＜0.01）,气孔导度（Gs）和蒸腾速率（Tr）的变化趋势与Pn基本保持一致;PSⅡ最大光化学效率、PSⅡ实际光化学效率、光化学猝灭也表现出不同程度的下降;而两品种非光化学猝灭、吸收光能用于PSⅡ天线色素耗散部分的变化则是处理高于对照;叶绿素以及类胡萝卜素含量也呈下降趋势,Bt-SY63可溶性蛋白含量在后期处理高于对照,核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶（Rubisco）的含量未显著减少。【结论】O3浓度升高使Bt-SY63的光合特性相关指标都发生了不同程度的改变且变幅大于SY63,说明Bt-SY63对O3的响应较SY63敏感,在O3胁迫下,Bt-SY63各性状指标的波动性较大。  相似文献   

酿酒酵母JM14对养殖水体中亚硝酸盐去除效果研究     

陈海艳  汪彬  陈薇  刘标 《湖南农业科学》2018,(5)

为了降低养殖水体中的硝态氮,以1株具有氨氮去除能力的酿酒酵母JM14菌株为材料,通过单因素试验,分别研究了初始亚硝酸盐浓度、p H值、培养温度和接种量对其亚硝酸盐去除能力的影响。结果表明:该菌株对亚硝酸盐的去除率在培养96 h时达到最高值,为68.3%;当初始亚硝酸盐浓度为1~10 mg/L时,菌株对亚硝酸盐去除率均保持在59%以上;当亚硝酸盐浓度达到20和30 mg/L时,亚硝酸盐去除率显著降低;菌株去除亚硝酸盐的最适初始p H值范围为6~10,最适培养温度为25~30℃,最佳接种量为≥2%。综合来看,酿酒酵母JM14具有去除水体中氨氮和亚硝酸盐的能力,对环境安全,在水产养殖中具有较广阔的应用前景。  相似文献   

蔬菜大棚冬季轮作金针菇技术     

徐汉亿  丁立彤刘标　刘有兄 《蔬菜》2000

  相似文献   

江苏省棉花育种的现状与发展策略   总被引：5，自引：0，他引：5  

蔡立旺  潘群斌  陈建平  刘标  施庆华  杨明凤  陈丽萌  徐文华 《江西农业学报》2009,21(4)

根据江苏省棉花种植和育种现状,分析近期审定棉花品种的丰产性、纤维品质和抗病性等,提出加强协作、利用生物技术、强化品质育种、同步改进产量要素、注重抗性筛选等发展策略。  相似文献   

转基因抗虫棉对茎部内生细菌多样性的影响     

陈磊  汪峰  张祥志  高国庆  刘标  陈良燕  崔中利  曹慧 《土壤》2011,43(6):961-967

比较转Bt基因抗虫棉与其母本茎部内生细菌多样性,为评估转基因棉花生物安全性提供基础数据.采用平板培养方法对转基因棉花(中棉30,TC)与其母本(中棉16,CC)茎部内生细菌进行分离与计数,用细菌的通用引物扩增细菌的16SrDNA片段,进行RFLP分析.采用培养方法分离与计数所得的棉花茎部内生菌数量为105 cfu/g;...  相似文献   

发酵床垫料中高效纤维素降解菌的分离与筛选     

王震  许丽娟  刘标  杜东霞  尹红梅  贺月林 《农业环境科学学报》2015,32(4):383-387

为获得高效纤维素降解菌,从发酵床垫料中分离出5 株能降解纤维素的微生物菌株,对5株菌进行了透明圈和纤维素酶活性测定。结果表明:5 株菌株均可在纤维素-刚果红平板上快速形成透明圈,其中菌株A3 产酶活性最强,在接种后72 h 达到125.47U·mL^-1。对其16SrDNA 序列进行分析,结合形态学观察和生理生化特征,将该菌鉴定为地衣芽孢杆菌 (Bacillus licheniformis) 。培养时间和温度对菌株的酶活力影响较大,各菌株的产酶最适温度为30~40℃。该芽孢杆菌分解纤维素能力强、适应能力高,在发酵床垫料堆肥中具有潜在的应用前景。  相似文献   

发酵床垫料中微生物16S rDNA PCR反应条件的建立与优化     

杜东霞  尹红梅  张德元  刘标  许隽  王震  贺月林 《农业环境科学学报》2014,31(5):470-475

为探讨发酵床垫料中微生物16S rDNA基因扩增实验中诸多因素对实验结果的影响,采用单因素法对16S rDNA基因扩增时PCR反应体系中的5个潜在因素(Mg²⁺、dNTP、引物、Taq酶、模板DNA)5水平上进行优化实验,并进一步优化了反应程序中的退火温度、循环次数。结果表明:25μL的最佳反应体系为:10×PCR buffer 2.5μL、MgCl₂2.0 mmol·L^-1、dNTP 0.2 mmol·L^-1、引物0.2μmol·L^-1、Taq DNA聚合酶0.5 U、模板DNA 50 ng;最佳反应程序为:在94℃下进行4 min预变性;随后循环扩增25个循环(包括94℃变性45 s,53.7℃退火30 s,72℃延伸90 s);最后在72℃下延伸10 min。  相似文献   

棉叶螨在转Bt基因抗虫棉的棉田动态分布   总被引：1，自引：0，他引：1  

徐文华  陈建平  刘标  孟军  方志翔 《江西农业学报》2011,23(1):97-99,102

通过近2年的系统调查,明确了Bt棉处理棉叶螨的有螨株、红叶株、红叶数、有螨叶和成若螨数量始终高于常规棉对照,但差异均不显著;棉叶螨在在棉花全生育期的发生为害主要有2个时段,1个是在6月上中旬前茬夏熟作物成熟离田期,另1个是在7月底8月初秋熟玉米成熟离田期,两类棉田处理所表现的消长动态也基本相似.另外,棉花前茬茬口不同,...  相似文献