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为快速检测水貂圆环病毒(MiCV),本试验根据MiCV Cap基因序列设计合成特异性引物,建立了水貂圆环病毒SYBR Green II实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法在模板浓度为1.0×106 ~1.0×101 copies/μL范围内呈良好线性关系,相关系数为0.9983。本试验建立的检测方法对水貂阿留申病毒、猪圆环病毒2型、水貂肠炎病毒、犬瘟热病毒和猪伪狂犬病毒进行检测均无特异性扩增,批内和批间CV均小于2%,对重组阳性质粒的检测下限为1.0×101 copies/μL,比普通PCR的敏感度高100倍,对阳性样品DNA的检测下限为2.38×10-2 pg/μL,比普通PCR的敏感度高1000倍。应用该方法对吉林省部分毛皮动物养殖场的水貂、狐狸、貉和环境样品进行检测,结果其阳性率分别为57.23%、48.42%、39.71%和68.48%。上述结果表明,本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法具有良好的灵敏性、特异性和重复性,为MiCV的诊断及流行病学调查提供技术支持。 相似文献
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为了研究吉林省猪圆环病毒3型(PCV3)野毒株遗传变异情况及其衣壳蛋白(Cap)的亚细胞定位特征,本试验对收集到的10株PCV3吉林野毒株进行全基因组序列测定和分析,并构建真核表达载体pcDNA3.1V5/HisA-Cap转染猪肺巨噬细胞(PAM);继而用本实验室已构建的兔源PCV3-Cap多克隆抗体,通过激光共聚焦检测Cap蛋白在PAM中的定位。序列分析结果显示,10株PCV3吉林野毒株与国内外参考株之间的全基因组核苷酸序列同源性为95.8%~99.5%,处于PCV3a和PCV3b两个亚群;基因重组分析结果显示,仅中国参考株MF589102(2016年)、MH445396(2019年)和分离株JL-2在80~303 nt、840~1 196 nt和1 885~2 001 nt处发生3处重组。激光共聚焦检测结果显示,Cap蛋白大部分定位于细胞核,少部分定位于细胞质。结果表明,目前吉林省PCV3比较保守,没有出现较大变异,Cap蛋白在PAM的细胞核和细胞质中均有分布。 相似文献
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为探究水文波动和气候变暖对河流漫滩温室气体排放的影响,选取南京长江绿水湾湿地漫滩表层0~15 cm沉积物为实验对象,利用三维荧光光谱(3D-EEMs)等技术,结合室内培养实验,研究了2种水分状况(淹水和半淹水)和4种温度(5、15、20、30℃)下二氧化碳(CO2)、甲烷(CH4)、氧化亚氮(N2O)排放规律。结果表明:累积CO2排放量随温度及水分含量升高而升高,温度敏感系数(Q10)随温度升高而降低;淹水30℃处理下CO2排放速率在培养25 d后受到抑制而逐渐下降。淹水CH4累积排放量显著高于半淹水,且随温度升高而增加。淹水显著降低了沉积物净硝化速率,5℃半淹水N2O累积排放量显著高于淹水,但30℃淹水N2O累积排放显著高于半淹水。增温有利于加快淹水上覆水溶解性有机质(DOM)的腐殖化进程。研究表明,温度上升、水分含量增加均将导致沉积物排放的温室气体增温潜势(GWP)提高。 相似文献
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为建立适用于多种禾本科植物染色质转座酶可及性测序(assay for transposase accessible chromatin with high-throughput sequencing, ATAC-seq)的细胞核提取和建库体系,本试验以水稻、小麦和结缕草的叶片及根系为研究材料,通过控制变量试验确定最佳的细胞核提取方法:采用液氮研磨样品,初步提核离心速度选取1200×g,2次ORB溶液去除细胞器等杂质,蔗糖梯度缓冲液纯化细胞核。通过构建文库、库检及测序分析发现,所提取的细胞核适用于染色质转座酶可及性测序的建库,可获得高质量测序数据。本试验建立的适用于多种禾本科植物的提核体系为获取禾本科植物染色质开放区域信息以及深入研究基因表达的调控方式奠定了基础。 相似文献
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以北京松山自然保护区内2020年空气负氧离子浓度以及环境因素为研究对象,采用Origin软件运用线性拟合天气状况与负氧离子浓度的相关性,分析各因素对于空气中负氧离子浓度的影响关系。呈正相关的参数包括温度、相对湿度、光合有效辐射以及NDVI。呈负相关参数包括:大气压、风速以及空气污染物(包括NO、NO2以及SO2)。未呈现明显相关性的参数为颗粒物PM2.5浓度以及PM10浓度。通过各参数对于负氧离子浓度影响关系以及空气中负氧离子形成机理,分析空气中的气体离子化、附着、聚集等化学反应对于负离子浓度的影响关系。 相似文献
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为综合评价不同甜瓜品种的品质差异,以天津市西青区设施栽培的‘绿宝石二号’‘羊角蜜’‘博洋九号’3个不同薄皮甜瓜品种果实为试材,对甜瓜的外形性状(果形、大小、质量、果形指数、果皮颜色、果实硬度、果肉厚度、果皮厚度)及品质性状(可溶性糖、可滴定酸、糖酸比、维生素C、可溶性固形物、感官评价)指标进行了测定,并运用主成分分析法对果实品质进行综合评价,建立甜瓜果实品质评价模型,筛选适宜天津市西青区种植的甜瓜品种。结果表明,经因子分析并基于特征值大于1的原则,共提取2个主因子,累计方差贡献率达100%。因子分析综合得分模型显示,薄皮甜瓜综合得分排名为‘羊角蜜’>‘博洋九号’>‘绿宝石二号’,本研究可为天津设施栽培甜瓜品种选择提供依据。 相似文献