检测猪伪狂犬病病毒gE抗体红细胞凝集试验的建立及应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

廖文军  吴健敏  覃绍敏  袁书智  陈凤莲  华俊  谢彬 《中国畜牧兽医》2010,37(2):162-165

以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)—猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病毒gE抗体的红细胞凝集试验。利用方阵滴定试验筛选出最佳抗原工作浓度为55μg/mL,血清最佳稀释度为1∶20,作用时间15 min,与猪瘟(CSF)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪乙型脑炎(JE)、猪布氏杆菌病(Brucellosis)阳性血清和PRV gE缺失疫苗接种的猪免疫血清均不出现红细胞凝集现象,与PRV标准阳性血清反应出现肉眼可见的凝集圈。与美国进口的PRV抗体检测gE-ELISA诊断试剂盒检测结果比较,50份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100%。红细胞凝集试验检测方法具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。  相似文献   

当前鸡传染性法氏囊病流行特点及防制     

韦志锋  吴健敏 《广西农业科学》1997,(5):250-251

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宠物药物香波的试制与应用     

蒋冬福  吴健敏 《中国养犬杂志》1997,8(4):23-24

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鸡传染性法氏囊病快速诊断方法的研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

贺荣莲  吴健敏 《中国兽医杂志》1995,21(6):3-6

本文报道了一种既可以检测ＩＢＤ囊毒抗原，又可以检测ＩＢＤ抗体的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）双抗体夹心法。用本方法检测ＩＢＤ阳性法氏囊样品１２２份，结果检出阳性１２０份，符合率为９８．４％。检测阴性法氏羹样品８８份，均为阴性。本方法与琼脂扩散试验方法比较，共检测人工感染发病的病死鸡法氏囊９７份，结果琼脂扩散检出阳性法氏囊４９份（５０．５１％），阴性４８份（４９．４８％），而用本方法检测结果，全为阳性，检出阳性率为１００％，比ＡＧＰ法检出率高４９．４８％。检测高免蛋黄液的抗体。１６个样品（以２倍递增进行稀释），结果本方法比琼脂扩散试验高１～２个滴度。试验证明该方法特异、敏感，并且快速简便，试验在室温条件下进行，不需要任何仪器设备，用肉眼观察颜色的变化就可判断试验结果，试验反应时间仅需１０分钟左右。  相似文献   

“安的宁”对种蛋白消毒效果试验     

吴健敏  蒋冬福 《中国兽医科技》1992,22(3):34-36

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广西牛羊赤羽病血清流行病学调查及影响因素分析     

任鹏飞  吴健敏  林俊  张怡轩  杜毅超  覃绍敏 《黑龙江畜牧兽医》2018,(20)

为全面了解赤羽病在广西各地区牛和山羊中的流行和分布情况,试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2014年、2015年采集自广西全境14个市的1 428份山羊血清和983份牛血清进行AKAV抗体检测,并对地理、气候因素与AKAV感染分布情况的关系进行探究。结果表明:广西山羊和牛的总AKAV抗体阳性率分别为36.48%和63.89%,且各地区间存在差异。其中山羊AKAV抗体阳性率以梧州市最高,牛AKAV抗体阳性率以贺州市最高,分别为62.50%和87.50%。广西境内牛和山羊感染AKAV的分布情况受到纬度、气温和降雨量等地理、气候因素的影响,较高纬度的桂北地区的抗体阳性率低于较低纬度的桂南地区;气温和降雨量较高的地区的AKAV抗体阳性率均高于气温和降雨量较低的地区。说明广西境内各地区牛和山羊中均存在AKAV隐性感染,应根据其影响因素合理进行防控。  相似文献   

鹅细小病毒PCR-DHPLC检测方法的建立     

饶桂波  ;邵洪泽  ;胡桂学  ;吴健敏 《家畜生态》2014,(5):64-67

为建立一种敏感、自动化,高通量的检测病料中鹅细小病毒（GPV）的PCR-DHPLC检测方法,本研究首先根据GenBank上GPV标准毒株VP3基因序列设计一对引物,建立检测GPV的PCR方法,然后将PCR检测方法与DHPLC法进行有机结合,建立了GPV PCR-DHPLC检测方法。以GPV、鹅副粘病毒、鸭瘟病毒及正常番鸭胚尿囊液进行特异性试验,结果无交叉反应,表明该检测方法具有较高的特异性。对GPV阳性样品检测结果表明该方法的敏感性较高,是常规PCR电泳法的100倍,且具有较好的重复性。对临床上采集的100份疑似病料,分别应用PCR电泳法和本试验建立的PCR-DHPLC方法进行检测,结果阳性符合率为100%。表明该方法具有特异、敏感、快速、重复性好、可高通量检测等优点,可用于临床样品的大批量检测。  相似文献   

猪内源性反转录病毒5''非编码区启动子活性的分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

丁芳  吕茂民  马玉媛  吴健敏  田克恭  毕丁仁  章金刚 《中国农业科学》2007,40(2)

[目的]构建以缺失不同功能区的猪内源性反转录病毒(PERV)5'非编码区(5'UTR)为启动子的萤光素酶表达载体,分析5'UTR的转录调控规律.[方法]将含有不同功能域的PERV的UTR克隆至萤光素酶表达载体上,转染瞬时表达细胞Cos-7,检测萤光素酶的表达.[结果]缺失R区的5'UTR显示出很强的启动子活性,U3重复区序列缺失的5'UTR启动子活性显著下降.UTR显示出较之LTR强的启动子活性.缺失整个U3区的UTR比仅缺失U3重复区的UTR启动子活性强.[结论]在R区有转录因子的结合位点可引起转录活性下降;U3重复区序列表现出增强子的活性.在5'UTR的下游序列中,包括引物结合区(PBS)和前导序列(Leader)可能有某些转录因子的结合位点引起转录增强,同时在U3重复区的上游和下游序列可能存在某些转录因子的结合位点可减少5'UTR的转录活性.  相似文献   

竹鼠源细小病毒分离鉴定及全基因组序列分析     

唐海波  姜佳佳  陈凤莲  杨锦兰  白安斌  刘金凤  覃绍敏  吴健敏 《中国畜牧兽医》2023,(7):2843-2853

【目的】了解并掌握广西地区竹鼠细小病毒(Bamboo rat parvovirus, BRPV)的生物学特性及遗传变异情况,为BRPV的防控提供理论依据和技术支撑。【方法】用养殖场患病死亡的竹鼠病料制备组织上清液,采用Vero细胞同步接毒法进行病毒分离,通过细胞病变观察、PCR、透射电镜观察及血凝试验等方法鉴定,设计合成特异性扩增引物对BRPV全基因组序列进行测序分析。【结果】分离获得的病毒可在Vero细胞上稳定生长增殖,感染细胞变长、变梭或成拉丝状;病毒纯化后经电镜观察可见呈立体对称、无囊膜、直径20～25 nm的病毒粒子;经PCR鉴定、凝集试验及全基因组测序表明,分离株为BRPV。本研究共获得3株BRPV(GenBank登录号：MF497824、MF497825、MF497826),毒株基因组全长约4 758 bp,全基因组序列比对发现,其与蝙蝠源细小病毒关系较近。BRPV基因编码氨基酸遗传特征与其宿主特异性有很强的相关性,NS1基因编码氨基酸变异与蝙蝠及大鼠源细小病毒更接近,与其处于同一分支,核苷酸相似性为96.9%～97.6%,氨基酸相似性为97.5%～98.4%。其中第257...  相似文献