猪带绦虫TSOL18特异性单克隆抗体的制备及其体外杀虫作用的研究     

郭爱疆  吴润  贾万忠  刘斌  闫鸿斌  骆学农  才学鹏 《畜牧兽医学报》2010,41(2)

本研究目的在于制备抗猪带绦虫TSOL18单克隆抗体,并分析单抗对六钩蚴的杀伤作用。采用SephadexG-100纯化在毕赤酵母中表达的猪带绦虫六钩蚴TSOL18蛋白;纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术建立能分泌抗TSOL18单克隆抗体的细胞株;通过ELISA叠加试验进行mAb的抗原表位分析;采用间接ELISA法测定TSOL18单克隆抗体特异性及腹水效价;采用抗TSOL18单克隆抗体对激活的猪带绦虫六钩蚴进行体外六钩蚴杀伤试验,观察单抗对猪带绦虫六钩蚴活力的影响。结果成功获得12株稳定分泌抗TSOL18单克隆抗体的杂交瘤细胞株,识别2个不同抗原表位,不同抗原表位的2株单克隆抗体腹水效价分别为1×102、1×106。抗体体外六钩蚴杀伤试验结果证明,在有补体的情况下,多抗和单抗作用6 d后,六钩蚴结构模糊,边缘不清晰。表明单抗对六钩蚴有一定的杀伤作用。  相似文献   

Ⅰ型鸭肝炎病毒RNA聚合酶基因的克隆及原核表达     

王超  付玉志  张伟伟  陈宗艳  李传峰  杨宗伟  吴润  刘光清 《中国兽医寄生虫病》2011,19(2):20-25

根据Ⅰ型鸭肝炎病毒（Duck hepatitis virus,DHV-Ⅰ）ZJ-Ⅴ株基因组序列（GenBank登录号：EF382778）,设计了一对扩增RNA聚合酶基因（RNA-dependent RNA polymerase,RdRp）的特异性引物,以ZJ-Ⅴ株基因组为模板,扩增DHV-Ⅰ的RdRp基因。运用DNAStar软件对ZJ-Ⅴ株病毒与GenBank上已发表的其他不同DHV毒株的RdRp基因序列进行同源性比较和遗传进化分析,结果表明,ZJ-Ⅴ株与A型DHV-ⅠR85952株（DQ226541）的同源性为97.1%,亲缘关系最近,与2株台湾新型（B型）DHV之间为76.9%和77.0%,与C-GY株和4株韩国新型（C型）DHV株之间为76.2%~76.5%,亲缘关系较远。将RdRp基因克隆至原核表达载体pET-32a（＋）,获得重组表达质粒pET-RdRp,转化宿主菌E.coli BL21（DE3）,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示RdRp蛋白分子量约为65 kDa,Western blot检测证明RdRp蛋白能与Ⅰ型鸭病毒性肝炎阳性血清产生特异性免疫反应,具有良好的免疫学活性。本文为进一步研究DHV-Ⅰ的复制机理奠定了基础。  相似文献   

4味中草药的体外抗TGEV试验     

卫文强  吴润  刘磊 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2015,43(12):23-28

【目的】探讨黄芪、黄芩、大黄、金钱草体外对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的抑制作用。【方法】采用传统的水提法制备黄芪、黄芩、大黄、金钱草等中药的提取液,测定其对PK-15细胞的最大安全质量浓度。采用细胞病变观察法确定4味中草药对TGEV致PK-15细胞病变的抑制作用,并通过MTT法计算药物的最小抗病毒质量浓度和抑制指数。【结果】黄芪、黄芩、大黄、金钱草的最大安全质量浓度分别为50,12.50,6.25和6.25mg/mL。黄芩、黄芪能抑制TGEV对PK-15细胞的吸附,抑制指数分别为8和4;大黄、金钱草能直接灭活TGEV病毒,抑制指数均为8。【结论】黄芩、黄芪、大黄、金钱草体外对TGEV均有抑制作用。  相似文献   

对某鸡场鸡舍卫生质量的检验   总被引：2，自引：0，他引：2  

吴润  宋建国 《中国兽医杂志》1996,22(4):21-22

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禽流感病毒血凝素保守氨基酸对其受体结合位点的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

贾红玲  苏艳  吴润 《中国预防兽医学报》2008,30(7)

采用PCR定点突变技术,对H5N1亚型禽流感病毒的血凝素HA基因受体结合位点相关的保守氨基酸分别进行以下位点的定点突变：35位K→R、45位D→N、98位Y→F、193位K→R和267位A→T,构建突变表达载体pCI-HA,转染293T细胞进行瞬时表达。流式细胞检测结果显示：193位K→R的突变体的HA的表达显著增加;98位Y→F突变体的HA的表达受到显著抑制。同时,血球吸附试验表明,同一HA突变体吸附鸡红细胞和马红细胞时,显示出不同的红细胞吸附能力。因此,受体结合位点相关的193位和98位的保守氨基酸不仅对受体结合位点结构域的形成有影响,它们还在决定AIV感染的宿主特异性中具有重要的作用。  相似文献   

甘肃某牦牛场奇异变形杆菌的分离鉴定及小鼠致病性试验     

侯晓  徐结  张雪婧  何卓琳  吴润  蒲万霞 《动物医学进展》2019,40(10)

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兔出血症病毒VP60抗原优势区和Th细胞表位融合蛋白的原核表达及免疫效力测定     

孟春春  程英杰  李传峰  王玢瑸  缪秋红  陈宗艳  吴润  刘光清 《中国预防兽医学报》2014,(3):239-242

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珠芽魔芋“3414”肥料效应试验初报     

李车书  沈远明  王永健  汪仕武  邓远祥  吴润  张德才  郑兴飞  胡中立 《湖北农业科学》2012,(3):466-468,472

在湖北主要魔芋产区恩施市开展"3414"肥效试验,初步研究了不同氮磷钾配方施肥对珠芽魔芋(Amorphophallus bulbifer)产量的影响,并成功拟合建立了产量三元二次和一元二次肥料效应方程。结果表明,合理的氮磷钾肥施用量可显著提高魔芋产量,施肥量不足或过量施肥会导致魔芋产量降低;在试验地力土壤条件下,珠芽魔芋最高产量为40 863.4 kg/hm2,此时N、P2O5、K2O的施用量分别为295.1、76.5、193.5 kg/hm2;珠芽魔芋最佳经济产量为40 863.0 kg/hm2,N、P2O5、K2O的施用量分别为290.1、75.5、189.0 kg/hm2。  相似文献   

Sangrovit对临床多抗菌株的抑制作用及对肉鸡生长促进的饲养试验     

苏红  白华  骆延波  公衍文  徐克斯  曾建国  吴润  刘玉庆 《饲料工业》2012,33(7):27-33

为了考察Sangrovit(含血根碱1.5%,白屈菜红碱0.75%)对242株临床高抗多抗菌株的抑制作用以及对肉鸡的促生长作用。用琼脂扩散法测定临床菌株对各种抗生素的抑菌圈和抗药性分离率;用96点阵二倍稀释法测定血根碱和小檗碱对各菌株的MIC值。通过饮水添加Sangrovit进行14.6万只AA肉鸡的大规模饲养试验,评价其促生长作用。药敏检测结果表明临床分离菌株存在普遍的多重抗药性,其中包括MRSA、ESBL阳性的大肠杆菌和肺炎克雷伯菌、泛抗药性的鲍曼不动杆菌以及NDM-1鲁氏不动杆菌。血根碱、小檗碱对临床高抗菌株均有显著的抑制作用,血根碱对金黄色葡萄球菌、肠球菌的抑制作用最强,MIC值最小可达到2μg/ml,最大不超过128μg/ml;优于小檗碱,达到抗生素的抑菌浓度,且血根碱与现有抗生素不存在交叉抗药性。基于上述结果 Sangrovit可代替饲料中抗生素,作为饲料添加剂进行肉鸡的饲养试验,21日龄前按日粮中添加50 mg/kg,21日龄后添加25 mg/kg的Sangrovit,能改善消化性能,持续提高采食量和日增重,出栏重平均提高60 g,料肉比降低0.03,欧洲效率指数提高13.74。Sangrovit对临床各种抗性机制的多抗菌株有较强的体外杀菌力,是代替抗生素,减少病原菌抗药性和药残,促进肉鸡生长的良好添加剂。  相似文献   

SPF级DBA/2小鼠繁殖性能及生长发育指标的测定     

席晓霞  吴润  田永刚  张景科  张文慧 《山东畜牧兽医》2009,30(8):11-12

在SPF环境下,对本中心饲养的SPF级DBA/2小鼠繁殖性能及生长发育指标进行测定.选择10～11周龄的DBA/2小鼠48只(雌雄各半),雌雄1:1,兄妹交配繁殖,统计其繁殖性能和生长发育指标.结果表明,7～10周龄体重增长雌雄间差异极显著(P﹤0.01);平均产仔数1、2胎之间差异极显著(P﹤0.01).第2、3胎窝产仔数和离乳育成率均较高,第4胎次之,第1胎的窝产仔数和离乳育成率均最低,因此在饲养繁殖过程中一般选择繁殖性能较好的第2、3胎留种.  相似文献