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利用电击转化法将表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的原核表达载体pTurboGFP-B转化到产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)F4ac中,获得表达绿色荧光的菌株ETEC F4ac-GFP。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)结果显示,转化菌株表达绿色荧光蛋白编码基因,且可以在蓝光仪和荧光显微镜下清晰地观察到转化菌株发出绿色荧光;将ETEC F4ac-GFP与IPEC-J2细胞系进行体外粘附试验,在细胞水平验证了转化菌株荧光表达的稳定性与可靠性,且ETEC F4ac导入荧光质粒后不改变其对宿主细胞的胞粘附能力。CCK-8(Cell Counting Kit-8)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果表明,ETEC F4ac导入荧光质粒后不改变其对宿主细胞的毒力。本研究为深入探究ETEC F4ac致病机理提供了工具菌株。 相似文献
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235.
芦花鸡是我国的优良地方家禽品种,在产肉和产蛋方面均具有较高的附加值。然而,芦花鸡至今仍没有饲养标准,无法进行标准化饲养,品种资源开发潜力受到极大限制。为了标准化饲养芦花鸡,首先在生长期(0~20周龄)不同生长阶段(0~6、7~14、15~20周龄)分别设定5个不同粗蛋白水平和5个不同代谢能水平日粮进行饲养试验、代谢试验和比较屠宰试验,并采用析因法研究了能量和蛋白质需要量,建立需要量析因模型;随后以汶上芦花鸡原种鸡场为核心辐射的周边32个商品化鸡场,进行能量和蛋白质需要量析因模型矫正,得到矫正后的需要量析因模型20个(蛋白质析因模型10个,能量析因模型10个);最后通过设置3个赖氨酸水平,同一理想蛋白质模式下多种必需氨基酸梯度,进行30万只以上大群生产试验,得到不同生长阶段氨基酸需要量参数。最终评估了不同性别和不同生产目的下的各种营养物质需要量参数,制定了需要量参数表。 相似文献
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为分析不同品种公猪精液品质及受精能力的差异,测定临沂某猪场的沂蒙黑猪、江泉黑猪和杜洛克3个品种12~36月龄公猪精液品质及受精能力的各项指标。采用单因素方差分析和多重比较方法,比较不同品种各项指标均数的差异性,校正品种效应后,计算各项指标间的相关系数。结果表明,江泉黑猪与沂蒙黑猪在采精量、精子密度、有效精子总数和稀释份数上无显著差异,但均显著高于杜洛克;江泉黑猪与杜洛克在精子活力上无显著差异,但均显著高于沂蒙黑猪;3个品种公猪的精液在稀释后,每份精液的有效精子数无显著差异,受胎率也无显著差异;江泉黑猪在采精量、有效精子总数、稀释份数上表现出较高的杂种优势,杂种优势率在3.8%~5.5%。相关性分析结果表明,原精的有效精子总数与稀释份数呈显著正相关(r=0.99,P<0.01),采精量与原精的有效精子总数和稀释份数均呈显著正相关(r=0.92,P<0.01);采精量与原精的精子密度、稀释后的精子密度、直线运动精子数、有效精子数存在中等程度的负遗传相关(r=-0.37~-0.21),但对受胎率无显著影响(r=-0.06);除了原精的精子密度与受胎率呈中等程度的正相关外(r=0.... 相似文献