应用SELDI-TOF-MS技术对患脂肪肝奶牛血浆差异蛋白的分离鉴定及生物学分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

徐闯  朱奎玲  陈媛媛  杨威  夏成  张洪友  吴凌  舒适  沈泰钰  于洪江  许秋实  张子扬 《中国农业科学》2016,49(8):1585-1598

【目的】脂肪肝是围产期奶牛主要代谢性疾病之一,50%产后奶牛受其影响。产后奶牛生产力降低、繁殖性能低下、免疫功能减弱、肝功能衰竭和过早死亡都与脂肪肝有关。表面增强激光解析/电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）是一种对生物样本蛋白质研究的新型高敏感性蛋白质组学方法,文章旨在探讨脂肪肝奶牛血浆蛋白质组学特征。【方法】于黑龙江某集约化养牛场选择产后7-28d,1-2胎次荷斯坦奶牛40头。清晨空腹尾静脉采血10mL,应用肝素抗凝（150U）迅速离心（3 000 r/min,5 min）分离血浆,置于-80℃冰箱冷冻保存。依据血浆甘油三酯（TG＞0.20 mmol·L^-1）, 血浆β-羟丁酸（BHBA＞1.2mmol·L^-1）浓度和临床症状,将其分为试验组（T）20头和健康对照组（C）20头。应用SELDI-TOF-MS技术测得血浆蛋白质谱,利用Ciphergen Protein Chip Software (Version 3.1.1)对在试验组和对照组所有样品中得到的峰图进行分析,得到原始数据。将两组之间的数据峰值做wilcoxon sum rank test统计检验,用计算出的P值判断峰在两组中是否有显著差异。以0.01作为P值的阈值,筛选出P值小于0.01的差异峰。在得到的差异峰中,将差异峰的m/z值与Swissport蛋白数据库中多肽的理论荷质比 (mass to charge ratio,m/z)进行比较,找到最相似的蛋白作为差异峰可能检测蛋白的预测结果。【结果】与对照组相比,试验组奶牛血浆蛋白质谱存在39个差异峰,在得到的39个差异峰中,将差异峰的m/z值与Swissport蛋白数据库中多肽的理论荷质比值进行比较,最终获得26个可预测的差异峰,预测蛋白11种。结果显示,相对于C组,11种预测蛋白在T组中均表达下调。通过生物信息学（Network,GO,Pathway）分析,应用Cytoscape软件对获得的11种蛋白进行牛类基因网络搜索,得到Networks分析结果图。在数据库中搜索到了试验结果中的淀粉样肽前体蛋白(amyloid precursor protein, APP)和纤维蛋白原α链(fibrinogen alpha chain, FGA)两种差异蛋白,并得到其相关的Networks分析结果。应用Cytoscape软件中BinGO插件对11种蛋白进行GO分析,并得到GO分析结果。对这些蛋白质经软件搜库得到已经注释的差异蛋白有9种,分别为FGA、血清淀粉样蛋白A (serum amyloid A protein, SAA)、血浆蛋白酶c1抑制剂（plasma protease c1 inhibitor, SERPING1 or C1INH）、血清载脂蛋白-CⅢ（apolipoprotein c-Ⅲ,ApoCⅢ）、海帕西啶（hepcidin, HAMP）、骨桥蛋白（osteopontin, OPN or SPP1）、 甲状腺素运转蛋白（transthyretin, TTR）、胱蛋白酶抑制剂C （cystatin-c, CysC or CST）、神经分泌血管生长因子蛋白（neurosecretory protein, VGF）。应用KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）pathway数据库搜索。搜索结果显示只有6种蛋白质可在数据库中搜到,分别是FGA、SERPING1、APO-CⅢ、APP、CysC、SPP1。并得到其相关的Pathway分析结果。这些蛋白可能是与奶牛脂肪肝发病机制相关的物质。【结论】应用SELDI-TOF-MS技术有效的分离了健康牛与患病牛之间的血浆差异表达蛋白,均在肝脏代谢或脂肪肝疾病发生发展过程中起重要的调节作用,对探究奶牛脂肪肝发病机理及其对机体生物学功能的影响具有重要的理论价值。差异蛋白对奶牛脂肪肝的发病机理的影响尚待进一步研究。  相似文献   

羔羊腹泻有效的防治措施     

刘国文  李海燕  刘亚红 《中国畜禽种业》2013,(11):55-55

羔羊腹泻是常发病,其主要特征是羔羊出现不同程度的拉稀、下痢。该病发病率和死亡率都很高,特别是1~3周以内的羔羊发病率尤为严重,严重影响养羊业的发展。现将有效防治措施予以简介。  相似文献   

亚临床酮病对泌乳早期奶牛繁殖性能和血液生化指标的影响     

张锋  白云龙  宋玉锡  孙书函  夏成  徐闯  张洪友 《中国畜牧兽医》2020,47(1):290-295

试验旨在探究围产期亚临床酮病与泌乳早期奶牛繁殖性能、卵泡发育之间的关系,并检测试验牛血液生化指标的变化。试验在黑龙江某大型集约化牛场开展,根据产后血酮水平确定亚临床酮病组（SCK）和健康组（C）奶牛共60头,根据试验牛产后50 d内发情状况,将SCK组再分为发情组（SCKE,16头）和乏情组（SCKA,14头）,C组也同样分为发情组（CE,25头）和乏情组（CA,5头）。所有试验牛在产后50 d通过直肠检查和B超检查了解子宫复旧及卵泡发育状况,记录繁殖性能数据,并进行血液生化指标分析。结果表明：与健康组发情奶牛相比,亚临床酮病发情奶牛产后首次发情日期推迟约10 d（P<0.05）;产后50 d卵泡直径差异极显著（差值约4 mm）（P<0.01）。亚临床酮病乏情奶牛子宫复旧延迟发生率显著高于健康组发情奶牛（P<0.05）;亚临床酮病奶牛血浆中胰岛素样生长因子-1（IGF-1）含量显著低于健康奶牛（P<0.05）,而泌乳量极显著提高（P<0.01）。与发情奶牛相比,乏情奶牛血浆中甘油三酯（TG）含量显著升高（P<0.05）;葡萄糖（Glu）、胰岛素（Ins）、雌二醇（E₂）、孕酮（P₄）含量显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）。综合以上试验结果,奶牛患亚临床酮病而导致能量代谢指标异常是引起奶牛乏情、产后卵泡发育受阻和繁殖障碍的主要因素,进而导致奶牛繁殖力下降。  相似文献   

黑龙江省集约化牛场奶牛维生素和微量元素缺乏的调查研究     

于泓漪  张翠羽  钱伟东  赵畅  张洪友  夏成 《现代畜牧兽医》2020,(9):42-45

调查试验在黑龙江省某两个集约化牛场(A场、B场)进行,每场分别在产前10 d～分娩当天(0 d)、产后30～50 d、60～80 d各选取8头,产后10～20 d选取16头,共80头奶牛,测定血中维生素E(VE)、维生素C(VC)、维生素A(VA)、硒(Se)、锌(Zn)和铜(Cu)的含量。结果显示:A场VE、VC、VA、Se、Zn和Cu的缺乏率分别为50.0%、5.0%、20.0%、12.5%、27.5%、10.0%;B场的缺乏率分别为47.5%、0%、10.0%、12.5%、25.0%、10.0%。两场VE均在产后10～20 d缺乏率最高;A场在产后10～20 d时Zn和Cu的缺乏率达到最高,VA、Se和VC在产前10～0 d和产后10～20 d缺乏率最高;B场的Zn和Se在产后10～20 d和60～80 d缺乏率最高,Cu在产后30～50 d缺乏率最高,VA在产前10～0 d缺乏率最高。试验表明:两个牛场奶牛在围产期和泌乳早期存在不同程度的VE、VA、Se、Zn和Cu缺乏,产后10～20 d缺乏率最高。因此,牛场应在围产期和泌乳早期补充维生素和微量元素,避免造成经济损失。  相似文献   

奶牛早期妊娠的B型超声诊断   总被引：2，自引：1，他引：1  

夏成  郑家三  张洪友 《中国畜牧兽医》2009,36(4):137-139

应用实时B超对不同妊娠日龄黑白花奶牛进行早期妊娠检查。早期妊娠检查声像图特点主要表现为胚囊、胚斑和胎心搏动。配种后33 d声像图可以清晰显示胚囊和胚斑,配种后40 d确诊率可达100%。应用B超进行早期妊娠检查具有操作简单、方便,准确率高等特点。  相似文献   

亚临床酮病奶牛血液部分生化指标代谢水平研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

张志刚  李小兵  刘国文  孙国权  王哲  郭昌明  高瑞峰  潘志忠 《中国农学通报》2008,24(6):1-3

酮病是高产奶牛的一种重要的营养代谢病.本研究采用酮粉法、试剂盒法分别对60头奶牛乳汁β-羟丁酸、血液β-羟丁酸、血液葡萄糖和非酯化脂肪酸含量进行检测,以血清β-羟丁酸含量1200μmol/L作为健康奶牛和亚临床酮病奶牛的诊断标准.结果显示健康奶牛和酮病牛血液β-羟丁酸含量分别为509±43μmol/L和2348±127μmol/L,差异显著(P<0.05);血液葡萄糖含量分别为3.94±0.17mmol/L和3.18±0.06mmol/L,差异显著(P<0.05);血液非酯化脂肪酸含量分别为543.4±106μmol/L和315.5±103μmol/L,差异显著(P<0.05).酮病牛的血液葡萄糖、非酯化脂肪酸与血液β-羟丁酸含量呈负相关.  相似文献   

牛旁检测诊断产后初期奶牛亚临床酮病研究     

张志刚  刘国文  李小兵  孙国权  王哲  郭昌明  高瑞峰 《勤云标准版测试》2008,(8)

 酮病是奶牛的一种重要的营养代谢病。采用酮粉法、尿液分析试纸条、乳汁分析试纸条、试剂盒法分别对乳酮、尿酮和血酮含量进行检测,以血清β-羟丁酸含量1200μmol/L作为健康奶牛和亚临床酮病奶牛的诊断标准。乳汁检测试纸条和尿液分析试纸条的诊断标准分别为200μmol/L和15mg/dl（1470μmol/L）。酮病牛血清β-羟丁酸和葡萄糖的浓度分别为726±43μmol/L、3.42±0.05mmol/L,健康牛血清β-羟丁酸和葡萄糖的浓度分别为2563±238μmol/L、2.78±0.07mmol/L,差异显著（P<0.05）。乳汁分析试纸条的敏感性和特异性分别为67%和92%,尿液分析试纸条的敏感性和特异性分别为57%和85%,酮粉的敏感性和特异性的敏感性和特异性分别为60%和94%。使用乳汁分析试纸条牛旁检测是一种有效的奶牛亚临床酮病诊断方法。  相似文献   

马尾松人工林林分出材率表的研制   总被引：9，自引：5，他引：4  

江希钿  林文龙  刘玉明  林孝强  陈杜满  刘国文 《福建林学院学报》2000,20(3):215-218

提出了林分材种出材率表研制的基本原理和方法 ,采用现场实际造材样木建立了单株二元材种出材率模型 ,配合二元材积方程、 Weibull分布、相对树高曲线模型 ,编制了马尾松人工林林分出材率表  相似文献   

补铜对铜缺乏奶牛血浆7项生化指标的影响     

武福平  夏成  张洪友  徐闯 《黑龙江农业科学》2010,(2):80-81

选择10头患铜缺乏症泌乳奶牛,每头牛内服硫酸铜4 g.d-1,每周1次,连续服用2周,测定补铜前后奶牛血浆Cu、SOD、BUN、Glu、TP、T-AOC、MDA含量。结果显示:试验奶牛补铜后,血浆BUN、TP、SOD水平略高于补铜前(P0.05),血浆Glu、Cu、T-AOC水平明显高于补铜前(P0.05或P0.01),血浆MDA水平显著低于补铜前(P0.01)。结论:补铜能有效的改善铜缺乏奶牛机体能量代谢和抗氧化能力。  相似文献   

一起奶牛"猝死症"病原菌的分离鉴定     

刘胜利  夏成  吴凌  周玉龙  胡春丽 《中国奶牛》2007,(10):38-40

猝死症(SDS)又称暴死症或急性死亡综合征。该病的特点是:发病急、病程短、死亡率高。本文针对黑龙江省垦区牡丹江分局云山农场某奶牛场奶牛猝死症开展了流行病学调查和临床症状、病理变化观察及实验室诊断等工作,证实了本次奶牛猝死症是由A型产气荚膜梭菌所致,为该牛场今后防治该病提供了科学依据。  相似文献