荷斯坦奶牛IFN-α基因的克隆表达和抗病毒活性分析   总被引：6，自引：0，他引：6  

汪明  史喜菊  夏春 《中国兽医杂志》2004,40(1):13-17

本研究通过 PCR从荷斯坦奶牛基因组 DNA中克隆了 IFN- α(Bo IFN- α)基因 ,PCR产物双酶切后与载体 PQE30连接 ,构建重组质粒 PQE30 /Bo IFN- α,进行测序和诱导表达。测序结果表明 ,荷斯坦奶牛 IFN- α基因全长为 4 98个核苷酸 ,含一个ORF,编码 16 6个氨基酸的成熟蛋白 ,与所报道的 Bo IFN- αA亚型只存在一个点变异。表达产物经 SDS- PAGE和 Western blot分析 ,表达出 2 0 KD的融合蛋白 ,表达量占菌体总蛋白的 2 2 % ,表达产物以包涵体形式存在 ,约占沉淀蛋白的 32 %。包涵体提取物经尿素变性、透析复性后初步纯化 ,重组牛 IFN- α(r Bo IFN- α)初提物在牛肾细胞 (MDBK) /水泡性口炎病毒 (VSV)和鸡胚成纤维细胞 (CEF) /VSV细胞系上的活性分别为和 1.0～ 2 .3× 10 6 U/mg和 1.3～ 2 .6× 10 5U/mg,对传染性牛鼻气管炎病毒 (IBRV)感染有一定的抑制作用 ,抗病毒活性为 7.8× 10 5U /mg。结果显示大肠杆菌可以高效表达具有生物学活性的 r Bo IFN-α。  相似文献   

克隆猪主要组织相容性复合体Ⅱ类DR基因座α链和β链及其体外复合体的构建   总被引：6，自引：0，他引：6       下载免费PDF全文

高凤山  王磊  李新生  李云岗  王慧飞  方勤美  郝慧芳  夏春 《中国农业大学学报》2006,11(3):21-26

为推动猪主要组织相容性复合体(MHC)空间构象的研究,体外构建了猪的MHC-Ⅱ类蛋白复合体(SLA-Ⅱ)。首先克隆长白-达兰杂交商品猪DRA和DRB基因,用富含甘氨酸-丝氨酸的Linker(G4S)3连接DRA和DRB的胞外区,用SOE-PCR得到复合体基因DRA-linker-DRB,插入原核表达载体进行表达;对表达的融合蛋白进行Western-blot鉴定、纯化、蛋白酶切割并对切割后的蛋白进行分离和纯化。对分离的目的蛋白、融合蛋白及麦芽糖结合蛋白(MBP)进行二级结构测定。得到83.4 ku的可溶性融合蛋白MBP-DRA-(G4S)3-DRB,其Western杂交带与表达条带大小一致。切割分离后的目的蛋白大小为40.9 ku。目的蛋白DRA-(G4S)3-DRB二级图谱显示该蛋白呈典型α-螺旋结构,各二级结构元件α螺旋、β折叠、转角和随机卷曲的氨基酸数目分别为80、121、101和80,融合蛋白MBP-DRA-(G4S)3-DR与目的蛋白DRA-(G4S)3-DRB的二级结构各元件的符合率分别达到了95%、96.7%、91.1%和93.0%。结果分析表明得到的复合体构象正确,可用于进一步的B细胞抗原表位的筛选等结构和功能研究。  相似文献   

IL-2真核质粒对乳酸杆菌载体口蹄疫VP1 DNA疫苗猪体免疫反应的分子佐剂效应   总被引：3，自引：0，他引：3       下载免费PDF全文

李云岗  田夫林  周开锋  高凤山  李新生  马慧玲  夏春 《中国农业大学学报》2006,11(6):73-78

为研究猪IL-2真核表达质粒对乳酸杆菌载体口蹄疫VP1 DNA疫苗(Lactobacillus acidophilusSFMD-1)猪体免疫的分子佐剂效应,通过RT-PCR方法从猪的肠系膜淋巴结克隆猪IL-2基因,基于pRc/CMV2载体,构建编码猪IL-2的真核表达质粒pCSIL2,以RT-PCR方法分析了该质粒转染PK15细胞以后的mRNA表达。结果显示预期的429 bp IL-2带仅出现在pCSIL2转染细胞。试验猪单独免疫L.acidophilusSFMD-1或者联合免疫pCSIL2质粒,后者能够增强FMDV-VP1特异的T细胞和B细胞反应,免疫后5周,单独免疫组和联合免疫组的抗体水平分别为1.50和1.66;免疫后6周,抗体水平分别上升到1.83和2.28;在T细胞增殖试验中,L.acidophilusSFMD-1单独免疫组和pCSIL2联合免疫组的刺激指数(SI)分别为2.00和2.70。结果表明,联合应用IL-2真核表达质粒是改进乳酸杆菌载体口蹄疫VP1 DNA疫苗免疫原性和效能的有效方法。  相似文献   

西洋参产量与土壤肥力·微生物和酶活性关系的研究     

蔡荟梅  臧爱香  夏春  蔡敬民 《安徽农业科学》2007,35(26):8267-8268

[目的]为了明确西洋参产量与土壤肥力、微生物和酶活性关系,为西洋参高产种植提供参考依据。[方法]采用5点取样法研究了土壤微生物分布和土壤酶活性的变化规律与西洋参产量的关系。[结果]西洋参高产田土壤的有机质和速效钾含量均高于低产田,但低产田土壤速效氮和速效磷含量高于高产田;高产田土壤细菌数是低产田的7.5倍;高产田土壤蔗糖酶活性比低产田高15.6%,土壤过氧化氢酶活性比低产田高14.6%;高产田的氨化作用、硝化作用均高于低产田。[结论]土壤的肥力、微生物类群、酶活性和微生物活性都与西洋参的产量有关。  相似文献   

新型食品甜味剂的发展状况和检测、使用规范的探讨   总被引：1，自引：0，他引：1  

夏春 《现代农业科技》2006,(17):205-206

通过对新型甜味剂(阿斯巴甜、阿力甜、纽甜和三氯蔗糖等)检测方法和毒理学方面的研究,规范我国新型甜味剂的使用,为建立我国食品中新型甜味剂的限量标准提供技术资料,从而维护消费者的切身利益.  相似文献   

不同增温技术在烤烟漂浮育苗过程中的应用研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

张明金  顾勇  夏春  王飞  雷晓  何余勇  谢强  徐刚 《湖南农业科学》2013,(4):19-21

为了探索烤烟漂浮育苗的最佳增温方式,避免低温寡照等不利自然环境对培育壮苗的影响,以云97为材料,采用9种不同的增温技术,研究其对烤烟的出苗、生育期、农艺性状、生产成本等的影响。结果表明：与常规漂浮育苗技术相比,水体加热增温技术、火管加热苗棚空气增温技术的烟苗各项指标都比其他加热措施强;但综合考虑,认为双棚覆盖增温保湿技术和晾盘降湿增温技术在培育壮苗、育苗成本和环境适应性等方面优势较为明显,能较全面地满足泸州县独特的气候条件,有较强的技术优势和推广潜力。  相似文献   

微波消解—电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定蜂蜜中多种元素   总被引：2，自引：1，他引：1  

夏春  高柱  臧爱香 《现代农业科技》2013,(2):278-279

运用微波消解—电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)技术,建立蜂蜜中元素的测定方法。各元素在0-1.0 mg/L或0-4.0 mg/L测定线性范围内,呈良好线性关系,相关系数均在0.999以上,加标回收率为96.3%～108.3%。该方法测定了蜂蜜中的镁、钙、铁、铜、锌、锰、硒等营养元素,以及铅、砷、汞、镉、铬等重金属的含量,测定结果良好。  相似文献   

烟叶种植过程中专用化肥和农药的近红外快速鉴别     

顾勇  彭海根  夏春  张永辉  谢强  张明金  张远盖  王进 《江西农业学报》2018,(4)

针对烟草种植过程中所施用化肥和农药的特点,结合近红外光谱预处理及定性分析中合格性测试方法,分别建立了四川泸州烟叶产区提苗复合肥(颗粒状)、吗胍·乙酸铜(粉剂)和甲基硫菌灵(悬浮剂)的合格性测试模型,结果表明该模型可有效鉴别其他不同生产厂家的化肥和农药产品,判别率均达到100%。该方法方便、快捷,适合烟草种植过程中施用化肥和农药的快速鉴别。  相似文献   

烤烟烘烤工场附近空气SO2质量浓度分析     

张远盖  蒋胜  夏春  彭勇  雷晓  张明金  赵锦超  吴磊  陈亮  顾勇 《农业科学与技术》2017,18(7)

选取烤烟烘烤工场为监测对象,对其附近SO2质量浓度进行为期两年的监测,分析了烘烤工场周围SO2质量浓度空间分布.分析结果表明:SO2地面质量浓度高值出现在烘烤工场顺风向50 m的频率最大,且离地面0.9～2.1 m空间范围的SO2质量浓度超出限值;烘烤工场顺风向200～300 m内的作物成长环境内SO2质量浓度超出阈值.建立烘烤工场的”控硫”、”降硫”、”避硫”系统,可以从供热方式的转换,洁净能源的使用以及作物敏感期和敏感区的调整来改善烘烤工场超标排放SO2的现状.  相似文献   

不同氯化钾施用措施对烤烟上部叶产质量的影响     

张通  张永辉  陈相君  夏春  雷晓  杨浩  刘雅洁  刘雷  曾淑华 《安徽农业科学》2024,(4):139-143

[目的]探讨适宜泸州烟区的氯化钾施用措施,进一步完善田间上部烟叶的调控技术。[方法]采用田间试验,以“中川208”为试材,设施氯量30、60、90、0 kg/hm² 4个水平,基追比为5∶5,追施时期设移栽后30和50 d,共7个氯化钾施用处理。分析上部烟叶农艺性状、SPAD值、经济性状、化学成分、物理性状的变化。[结果]较不施用氯化钾而言,施用氯化钾使上部烟叶产量、产值、均价、中上等烟比例分别提高3.11%～9.17%、6.12%～19.29%、2.79%～12.92%、4.01%～18.25%;烤后烟叶颜色、成熟度、身份、油分、色度均得到提升,综合得分提升1.15%～8.30%。[结论]以基肥施用氯化钾30 kg/hm²,移栽50 d后追施30 kg/hm²的施肥措施经济效益最高,烤后上部烟叶外观质量、化学成分、物理性状评分最高。  相似文献