新城疫病毒结构蛋白功能及检测技术研究进展     

邹海涛  兰邹然  姜平 《动物医学进展》2012,33(4):85-89

新城疫是一种由新城疫病毒引起的烈性传染病,病死率很高,严重危害家禽养殖业,被世界动物卫生组织列为必须报告的动物传染病。在我国,新城疫的暴发和流行虽然已得到了控制,但病毒的变异给新城疫的防控工作带来了困难。新城疫病毒的隐性感染也对我国禽类产品的质量及出口造成了一定影响。因此,明确新城疫病毒各结构蛋白的功能、改进现有检测技术以及开发新的检测技术平台是目前新城疫防控工作的重点。论文对新城疫病毒结构蛋白功能及检测技术的进展进行了系统的阐述。  相似文献   

猪流行性腹泻病毒间接ELISA抗体检测方法建立与应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

韩蓉  时晓丽  赵攀登  白娟  李玉峰  王先炜  姜平 《畜牧与兽医》2013,(2):1-6

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是目前引起我国猪急性肠炎并水样腹泻的重要病原之一,但尚无商品化病毒血清抗体检测试剂盒。本研究以纯化的PEDV为包被抗原,通过优化ELISA反应条件,建立了间接ELISA抗体检测方法,其反应条件为:抗原最佳包被浓度为3μg/mL,血清样品最佳稀释度为1∶100,包被时间为37℃作用2 h,1.5%BSA 37℃封闭3 h,二抗1∶10 000稀释,37℃作用30 min,抗体临界值为OD450nm≥0.306判为阳性,OD450nm≤0.268判为阴性,介于二者之间为可疑。该方法检测6份已知PEDV阳性血清效价为1∶3 200,检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、伪狂犬病毒和口蹄疫病毒血清抗体均为阴性,批间和批内重复试验变异系数2.5%～8.3%,对江苏、上海、浙江、安徽地区587份猪血清样品进行检测,抗体阳性率达56.76%,证明该方法具有较好敏感性、特异性和重复性,可用于PEDV抗体检测和流行病学调查。  相似文献   

耕地撂荒的原因及对策分析     

黄慧琼姜平 《农村经济与科技》2019,(24):6-7

由于我国工业化的高速发展和城市化进程的加快,大量耕地被征用以满足适应急剧增长的建设用地规模。在我国目前耕地保护形势极端严峻的情况下,一些经济、社会、自然因素导致的承包地闲置浪费的情况仍然屡见不鲜,耕地撂荒现象也愈演愈烈,诱发耕地撂荒的因素各不相同,本文对当前农村耕地撂荒的原因进行剖析,并为解决农村土地撂荒提供了一定的理论和实践依据。  相似文献   

Sf9昆虫细胞系的致瘤性研究     

胡波  王芳  范志宇  宋艳华  魏后军  薛家宾  姜平 《江苏农业科学》2019,47(18)

为确定Sf9昆虫细胞系作为疫苗生产细胞株的安全性,检测了Sf9细胞对裸鼠的致瘤性。将3周龄SPF级雌性裸鼠随机分为5组,分别为Sf9基础细胞库细胞组、Sf9最高限制代次细胞组、阳性对照Hep-2细胞组、阴性对照CEF细胞组和空白对照组,以各自细胞悬液皮下接种裸鼠。在接种后21 d和84 d观察接种部位肿瘤形成情况,并进行病理组织学检查。结果显示,接种后21 d,Hep-2细胞组裸鼠注射部位形成米粒大小结节,经病理组织学检查为鳞状细胞癌,而CEF细胞组和Sf9细胞组注射部位均无结节。接种后84 d,经病理组织学检查,CEF细胞组和Sf9细胞组均无肿瘤形成。本研究表明基础代次和最高限制代次Sf9细胞均不具有致瘤性,Sf9细胞可用于疫苗生产。  相似文献   

荷包猪SLA-3-HB01基因四聚体前体链的构建及表达     

高花  翟晓鑫  姜平  甘慧  张宗辉  许崇波  高凤山 《中国畜牧兽医》2018,(10)

为了构建荷包猪SLA-3-HB01基因四聚体前体链原核表达载体,并获得SLA-3-HB01表达蛋白,试验以SLA-3-HB01/pMD18-T为模板进行PCR扩增四聚体前体链SLA-3-HB01-BSP,并克隆至pMD19-T载体中,经NdeⅠ和XhoⅠ双酶切筛选阳性克隆并测序,目的基因连接至表达载体pET-21a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测目的蛋白大小及表达情况,提取包涵体并进行检测。结果显示,PCR成功扩增得到SLA-3-HB01-BSP,大小为896bp左右。酶切鉴定证实,目的基因成功克隆至pMD19-T载体中,插入片段大小为876bp,阳性克隆经测序后所获序列与原序列一致,并在3′端带有BSP标签序列。酶切鉴定进一步证实成功构建SLA-3-HB01-BSP/pET-21a(+)重组表达载体,经转化及诱导表达,SDS-PAGE检测显示目的蛋白分子质量在33.5ku左右。包涵体蛋白分子质量约33.5ku,与菌体中目的蛋白大小一致,经凝胶成像系统UVP扫描分析,包涵体蛋白纯度接近于90%,符合进行相关结构和功能研究的要求。本研究成功构建了荷包猪SLA-3-HB01基因四聚体前体链的pET-21a(+)重组表达系统,并获得了一定纯度的包涵体蛋白。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒R98弱毒株的分离鉴定与ORFs3～7基因特性研究     

李玉峰  姜平  蔡宝祥  简中友 《中国兽医学报》2008,28(1):5-8

应用特异性引物从猪血凝性脑脊髓炎病毒（HEV）中扩增出S1蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体中,得到重组质粒pTS1。用EcoRI和Not I双酶切pTS1,回收目的基因S1片段将其定向克隆到pPICZαA中,构建重组质粒pPICZαAS1。用BstXI酶切pPICZαAS1使其线性化,并电转至感受态毕赤酵母细胞GS115。PCR法鉴定阳性重组子,用1%甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western blot分析。结果显示,在酵母菌培养基上清中检测到相对分子质量为73000的重组蛋白,且该重组蛋白可与HEV多克隆抗体发生特异性血清学反应,表明HEV的S1蛋白片段在毕赤酵母中获得成功表达。  相似文献   

美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光RT-PCR检测方法的建立     

鲁韦韦  唐泰山  张常印  王凯民  姜平 《中国预防兽医学报》2008,30(5):389-392

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲株的基因序列,设计U1和U6两套PCR引物和荧光探针,建立了扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR用于检测美洲型PRRSV。用10倍倍比稀释的质粒DNA、cDNA、RNA进行扩增以检测其灵敏度,同时对猪瘟（HCV）、猪伪狂犬（PRV）等7种病毒进行特异性检测。结果显示建立的扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR可用于检测PRRSV,其灵敏度为10个拷贝的质粒DNA,而与HCV等非PRRSV无交叉反应。本研究所建立的荧光RT-PCR具有快速、灵敏、准确、低污染等优点,可用于PRRSV样品的检测。  相似文献   

2018年山东省猪伪狂犬病野毒抗体流行病学调查     

曹明珠  吕林  李玉峰  白娟  王先炜  姜平 《畜牧与兽医》2019,(5):128-130

为了解2018年山东省猪伪狂犬病病毒(PRV)感染情况,对山东省99家猪场共2 240份血清样品进行了PRV gE-ELISA抗体检测。结果:猪场PRV gE抗体阳性率为82.83%(82/99),样本血清gE抗体阳性率为61.74%(1383/2240),而且春季样品阳性率最高,冬季较低。哺乳母猪血清阳性率最高,可达96.00%,其次是种公猪和后备母猪,表明该地区PRV野毒感染率依然较高,制定科学合理免疫程序并加强该病综合防控十分必要。  相似文献   

猪链球菌35个血清型标准抗血清的制备及应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

姜艳华  孙乾  王楷宬  黄保续  辛长卫  姜平  范伟兴 《中国动物检疫》2008,25(9):19-21,24

用猪链球菌35个血清型的标准菌株免疫新西兰白兔制备标准抗血清,经试管凝集测定抗血清的效价均在1:32以上,吸附处理后抗血清具有良好的特异性和敏感性。对12株猪链球菌的试验结果表明:抗血清只与相同血清型的菌株出现凝集,可以区分出PCR方法无法区分的1型和14型以及2型和1/2型,并在国内首次鉴定出猪链球菌13型。  相似文献   

牛分枝杆菌遗传学研究进展     

高峰  ;李卫民  ;李传友  ;姜平  ;范伟兴 《动物保健》2008,(5):24-26

牛分枝杆菌AF2212／97分离自肺部和支气管纵隔淋巴结发生干酪样病变的母牛,具有完全的毒力。该菌株基因组全长为4345492bp,分布于一单环染色体中,平均G＋C含量为65．63％。基因组包含3952个编码蛋白基因——包括一个前噬菌体和42个插入单位（IS）。在核苷酸水平上,牛分枝杆菌与结核分枝杆菌基因组相比,其同源性大于99．95％,  相似文献