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81.
82.
华东地区PMWS患病猪群PCV-2的检测及其基因特征 总被引:8,自引:2,他引:8
用 PCR方法 ,对江苏、上海、山东、江西、安徽和浙江等省市 6 5家猪场 99例断奶仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)肺脏和淋巴结病料 ,进行了猪圆环病毒 - 2 (PCV- 2 )基因检测 ,发现其中 18家猪场 2 1例病料为 PCV- 2阳性。源自安徽和上海的 PCV- 2分离株经基因序列分析显示 ,2个分离株部分 ORF2 与国外分离毒株同源性为 92 %~99%。安徽分离株 AHHF6与韩国分离株 KSY- 1同源性为 99% ,而上海分离株 SHHT1与加拿大分离株 Imp.114 7同源性为 98%。上述结果表明 ,我国 PMWS患病猪群广泛存在 PCV- 2 ,不同地区 PCV- 2存在一定基因差异 ,它们可能来源于不同国家或地区 相似文献
83.
84.
抗猪SIgA单克隆抗体的研制 总被引:7,自引:0,他引:7
采用饱和硫酸铵盐析、SephadexG-200柱层析和离子交换柱层析技术,从猪初乳中提纯分泌型IgA(SIgA)。经SDS-PAGE电泳鉴定,纯化的SIgA达到电泳纯。以此纯化的SIgA,采用长程免疫法免疫BALB/c小鼠,取4次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合,第1次融合率为79.7%,第2次融合率为60.3%。建立间接ELISA,用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体.初检阳性率分别为4.1%、16.8%。经2次亚克隆反复筛选获得了2株能稳定分泌抗猪SIgA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为CA6、5D4。ELISA和Western-blotting证实,所获得的单抗能特异性针对SIgA。CA6、5D4经反复冻存、复苏及多次传代,仍能分泌高效价抗体.CA6分泌抗体属IgM、κ型,而5D4分泌抗体属IgG1、κ型。 相似文献
85.
将NDVD10毒株于鸭胚尿囊腔和绒毛膜两个途径接种传代至50代,分别测定不同代次胚液病毒HA、EID50及免疫原性,结果表明该病毒用尿囊腔途径接种也可获得较高滴度病毒,不同代次病毒液HA和EID50都分别在1∶256和108.0/01ml以上,免疫原性良好,但鸭胚致死性随传代次数增加而减轻,120小时内死亡率仅说明该病毒稳定性良好。该病毒于-20℃和-50℃保存期分别达6和12个月,最小免疫剂量≤5000EID50 相似文献
86.
口蹄疫(Foot—and—mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒感染引起的一种急性、热性、高度接触性和可快速远距离传播的动物疫病,动物和动物产品的国际贸易中受到严格限制。FMDV有7个血清型,80多个亚型,型与型之间无交叉保护性,使FMD的预防和诊断更加困难。目前,该病在世界动物卫生组织(OIE)成员国中有三分之二的国家存在本病,由于发病后的巨大影响——引起消费者恐慌和出口受到限制, 相似文献
87.
根据GenBank中已发表PCV2全基因序列,设计1对特异性引物,建立扩增PCV2全基因的PCR方法。用该方法从山东、河北、安徽、甘肃4个省份的4份PMWS患病猪的阳性病料和山东德州、南京、北京、甘肃、甘肃泉州和白银5个屠宰场的7份健康猪阳性样品中直接扩增出11个PCV2全基因片段。将扩增片段克隆于pMD18-T载体,并通过双酶切的方法筛选获得了11个阳性重组质粒,分别命名为SDPCV、HBPCV、AHPCV、GSPCV、DZPCV1、DZPCV2、DZPCV3、NJPCV、BJPCV、BYPCV和QZPCV。测序结果分析表明,除了BJPCV和GSPCV2株PCV2基因组全长为1768bp外,其余9株基因组全长均为1767bp。应用DNAstar序列分析软件,对测定的11个PCV2序列与GenBank中登录的10个不同地区的代表毒株进行同源性比较,发现健康猪群感染毒株的全基因组序列和ORF2及其氨基酸序列同源性比患病猪群略高,ORF1、ORF3及其相应氨基酸序列同源性在2类猪群中则没有明显差异。系统发生进化树显示,DZPCV3与其他10株PCV2亲缘关系较远,但与山东分离株AY556473亲缘关系接近,共同构成一个独立分支;其余10株PCV2之间关系密切,都分布于一个独立的小分支中,并与法国分离株亲缘关系接近。患病猪群和健康猪群感染的PCV2在基因进化树上交错分布,表明2类猪群感染的PCV2在基因水平上差异不显著,在地域分布上也没有明显差异。 相似文献
88.
猪圆环病毒2型灭活疫苗的制备与免疫效力研究 总被引:7,自引:2,他引:5
猪圆环病毒2型(PCV2)经0.2%甲醛37℃作用一定时间后接种PK-15细胞,盲传3代,用PCR方法检测灭活效果。将灭活的PCV2加入适量的白油和氢氧化铝胶制成PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗,免疫小鼠,共免疫2次,时间间隔为3周,分别于一免后第21天和二免后第14天进行ELISA抗体检测。同时为了评价国产油佐剂和进口油佐剂的免疫效果,笔者进行了猪体免疫效力试验。通过ELISA抗体、攻毒后临床表现及体温变化、剖解时的病理变化、平均日增重及病毒血症等指标对疫苗免疫效果进行评价。结果如下:①PCV2能被0.2%甲醛完全灭活,灭活时间为16 h。②PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗免疫小鼠后均能产生较好的免疫应答,并且油佐剂灭活疫苗免疫效果好于铝胶佐剂灭活疫苗。③猪体免疫效力试验表明,两种油苗均能产生较高水平的ELISA抗体。攻毒后,攻毒对照猪的体温高于免疫猪,空白对照猪体温正常。免疫猪及空白对照猪平均体重均升高,而攻毒对照猪平均体重有所降低,且两个免疫组和空白对照组之间平均日增重差异显著(P〈0.05)。病毒血症检测及病毒DNA在组织中的分布检测表明两油苗均能够有效降低猪体的带毒。以上结果表明,PCV2灭活疫苗免疫小鼠和猪体后均能诱导机体产生免疫应答,并能够在一定程度上抵抗PCV2对猪体的感染。 相似文献
89.
90.
用于生产传染性法氏囊病(IBD)卵黄抗体的某蛋鸡群,在免疫接种 IBD 弱毒苗和灭活油佐剂苗后,产蛋率下降16%,并出现软壳蛋和蛋壳颜色变淡。用鸭胚成纤维细胞(DEF)分离到一株能致细胞病变(CPE)的病毒——GC_2株.该毒株对氯仿不敏感,对热(56℃1小时)敏感,耐酸(PH3.0)。病毒粒子呈球状,直径约70mm,在DEF 核内增殖并受5-溴-2(?)-脱氧尿核苷(BUDR)所抑制。结合血清学试验,证实该分离物为 EDS-76病毒。 相似文献