18S rRNA基因巢式PCR-RFLP鉴定吉林、大庆地区断奶前奶牛隐孢子虫分离株     

苏艳  白光彦  孙喜东  刘妍  王春仁  张静  宋军澎  尹继刚 《中国兽医学报》2011,31(3)

利用18S rRNA巢式聚合酶链反应(Nested PCR)-限制片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)鉴定吉林、大庆地区牛源隐孢子虫分离株.采取吉林、大庆地区断奶前犊牛粪便,提取DNA后经18S rRNA基因巢式PCR扩增,扩增产物测序后用Blast和MEGA4.0软件进行同源性和系统发育树分析.同时扩增产物分别用Ssp Ⅰ、Vsp Ⅰ和Mbo Ⅱ酶切后进行RFLP分析.通过18S rRNA基因PCR-RFLP分析和测序比对分析表明,吉林分离株包括2种隐孢子虫,分别为C.bovis和C.ryanae,大庆分离株包括3种,分别为C.boris、C.ryanae和C.andersoni.  相似文献   

微小隐孢子虫TSP9蛋白功能的初步研究     

韩福松  高依然  孙婷  张星星  刘刚  尹继刚 《黑龙江畜牧兽医》2014,(9):129-131

<正>隐孢子虫是一种属于顶复门的机会性寄生原虫,寄生于哺乳动物(包括人类)的胃肠道、禽类呼吸道等黏膜上皮细胞内,引起隐孢子虫病[1]。隐孢子虫病是6种世界最常见腹泻病之一,对免疫正常的个体引起自限性腹泻,对免疫受损的个体(老人、儿童、艾滋病患者等)引起致死性腹泻[2],感染途径主要是通过与病人和患病动物接触及食用污染的水和食物[3]。据报道,1933年在美国威斯康星州地区曾有40万人感染隐孢子虫,至少导致70人死亡[4]。到目前为止,因水源污染而爆发的隐孢子虫病已有20多起[5]。但目前仍没有有效的治疗和预防方法[6]。因  相似文献   

吉氏巴贝斯虫和犬瘟热病毒混合感染犬的临床观察     

陈启军  李德昌  闫仲堂  尹继刚 《黑龙江畜牧兽医》1993,(10)

笔者在进行犬吉氏巴贝斯虫病研究过程中发现,接种吉氏巴贝斯虫的摘脾犬又感染犬瘟热病毒后,病犬红细胞的吉氏巴贝斯虫染虫率不但不升高,反而随着犬瘟热症状的加剧而染虫率不断下降。现将观察结果简述如下。要提取吉氏巴贝斯虫抗原和核酸,必须首先大量繁殖虫体。一般家犬感染该虫后,只能隐性带虫,红细胞染虫率极低。只有将带虫犬的脾脏摘除才能达到大量增殖虫体的目的。笔者先后将3只接种吉氏巴贝斯虫的家犬摘脾后,观察其血液内虫体的增  相似文献   

应用巢式PCR-RFLP方法鉴别微小隐孢子虫、安氏隐孢子虫和火鸡隐孢子虫的研究     

姚龙泉  张西臣  Lihua Xiao  李建华  尹继刚 《中国预防兽医学报》2006,28(4):446-449

应用巢式聚合酶链反应（Nested PCR）-限制片段长度多态性 （restriction fragment length polymorphism, RFLP）方法对微小隐孢子虫（C．parvum）、安氏隐孢子虫（C．andersoni）和火鸡隐孢子虫（C．meleagrides）的鉴别进行了研究。结果显示C．parvum BOCC2、C．andesoni BOCC2和C．meleagrides CHCC1扩增产物片段大小分别为830bp、828bp和828bp，扩增产物分别经VspI酶切后形成3种不同的RFLP图谱，根据RFLP图谱可鉴别C．parvum、C．andersoni和C．meleagrides。本研究为我国隐孢子虫的分类和隐孢子虫病的分子流行病学研究打下了良好基础。  相似文献   

柔嫩艾美耳球虫GZ株子孢子表面抗原基因的克隆及序列分析     

秦睿玲  张西臣  李建华  秦建华  田宗成  尹继刚 《河北农业大学学报》2003,26(Z1):225-228

利用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)的孢子化10 h卵囊中扩增出了λMZ5-7基因,并把该基因片段克隆到pMD18-T载体上,对阳性克隆进行PCR鉴定及酶切分析并进行测序.结果表明,该序列全长936bp,为一完整的开放阅读框,与国外报道的柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子表面抗原基因λMz5-7的同源性为98%,氨基酸的同源性为95.6%.该基因的克隆有望用于基因工程苗的研究.  相似文献   

长春地区宠物犬贾第虫感染的分子流行病学调查与感染虫株的TPI基因分型     

张天宇  刘静  张夏平  王东强  邵清延  尹继刚 《吉林农业大学学报》2017,39(3)

贾第虫是一种人兽共患性寄生原虫,可在全世界范围内传播,并且有人—人,人—动物,以及动物特异性的传播循环,且其流行率与地理环境以及不同的区域有关。采用分子生物学分析方法,确定长春地区的宠物犬患有贾第虫的患病率以及基因型来评估犬贾第虫向人传播的危险。调查结果显示:宠物犬的贾第虫流行率为10.46%(25/239)。通过磷酸丙糖异构酶(TPI)基因的多态性对所分离虫株的基因型进行鉴定,结果显示所有贾第虫的基因型均为犬特异性的C型,未发现人兽共患的A型和B型。基因亚型结果显示在所有的样本中以CⅠ为主要亚型,占全部样本的76.00%(19/25)。此结果显示出贾第虫由犬传播给人的风险很低,这与以往来自中国南方的调查结果明显不同。  相似文献   

碘醚柳胺脂质体的研制     

陈丽凤  张西臣  杨永胜  何宏轩  尹继刚  杨举 《中国农业大学学报》1998,(Z2)

本研究用改良的冷冻融溶法制备出碘醚柳胺(Rafoxanide,Raf)脂质体定向剂,并对其药物特性进行了观察与测定.用 Raf 与聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpyrrolidone,PVP)共沉方法解决了 Raf 在水性介质中不溶的问题,从而为制备该药脂质体创造了必要条件.以薄膜分散法和冷冻融溶法为理论基础,采用单因素比较法优选出制备碘醚柳胺脂质体的最佳处方组成:药脂比为1:27(W/W);卵磷脂(Pc)与胆固醇(Chol)  相似文献   

双抗夹心—ELISA诊断牛隐孢子虫病   总被引：15，自引：1，他引：14  

尹继刚  张西臣 《中国兽医寄生虫病》1999,7(2):1-3

为了建立双抗体夹心—ＥＬＩＳＡ检测牛粪便中隐孢子虫卵囊抗原的方法。采用抗小球隐孢子虫（Ｃ．ｐａｒｖｕｍ）卵囊壁单克隆抗体,经对６０头份牛粪便样本分别进行抗酸染色和双抗夹心—ＥＬＩＳＡ检测,结果抗酸染色法检出１２头份有隐孢子虫卵囊,而ＥＬＩＳＡ除对抗酸染色阳性的１２份粪样判为阳性外,还对抗酸染色阴性的４份粪样判为阳性,且不与牛球虫、牛结肠小袋纤毛虫发生类属反应。此外,本试验在稀释液中加入ＥＤＴＡ,并增加了反应温度,使得试验在抗体包被板并封闭后３０ｍｉｎ结束整个检测过程。结果表明,双抗体夹心—ＥＬＩＳＡ是敏感性高、特异性强的诊断牛隐孢子虫病的方法。  相似文献   

柔嫩艾美耳球虫长春株克隆的建立     

魏峰  张西臣  赵永军  李春雨  李建华  尹继刚  吴涛 《吉林农业大学学报》2006,28(5):570-573

从柔嫩艾美耳球虫长春株(由单卵囊接种建立)挑选出单孢子囊,制备成单孢子囊胶囊,给鸡接种后建立5个克隆,传代后提取DNA,用已筛选的13条随机引物进行PCR扩增。结果表明:每个克隆均获得RAPD图谱,有特异条带。5个克隆中C2和C3相似值为0.993 1,C4和C5相似值为0.992 7,C1与C2和C4的相似值分别为0.931 6和0.875 3。鉴别结果表明C1为1个克隆,C2和C3为1个克隆,C4和C5为1个克隆,说明柔嫩艾美耳球虫卵囊中的4个孢子囊的基因组成不一致。  相似文献   

伊维菌素治疗猪寄生虫病的效果观察   总被引：3，自引：0，他引：3  

何宏轩  尹继刚  陈丽凤  李建华 《河南畜牧兽医(综合版)》1998,(6)

随着养猪业的发展,寄生虫病的防治变得越来越重要。尽管丙硫咪哇、左旋咪唑等能有效地防治某些寄生虫病,但是其驱虫范围狭窄,不刊于养猪场寄生虫病的综合防治,另外长期使用产生了耐药性。伊维菌素是由阿佛曼链霉素（strepomycesavermillis）液发酵产生的一组次生代谢物中B1a和Bhb混合物经化学处理获得的一种物质,是80年代初国际上出现的一种新药。据资料报道,其是驱除畜禽体内外寄生虫的广谱驱虫药。为了进一步观察该药对猪寄生病的疗效,为养猪场寄生虫病的综合防治提供可靠依据,自1995年6月到1996年门月,我们用伊维菌素对自然发…  相似文献