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41.
表达马立克氏病病毒gI基因重组鸡痘病毒的免疫原性 总被引:2,自引:1,他引:2
以鸡痘病毒为载体,构建含马立克氏病病毒(MDV)gI基因的重组鸡痘病毒(rFPV),并在鸡胚成纤维细胞(CEF)中表达gI基因,用重组FPV(命名为rFPV-MDV648gI)感染CEF,结果显示:rFPV-MDV648gI能在CEF中稳定复制。进一步用rFPV-MDV648gI接种无特定病原(SPF)鸡皮下组织,结果表明:鸡对rFPV-MDV648gI具有抗体反应性。 相似文献
42.
用非放射性的Digoxigenin标记的DNA探针检出马立克病病毒DNA 总被引:1,自引:0,他引:1
用非放射性的Digoxigenin标记的Ⅰ型马立克病病毒特异性DNA探针,杂交反应可有效地检出通过Southern blot及Dot blot固定到硝酸纤维膜上的同型病毒的DNA,其特性及敏感性均不低于放射性~(32)p标记的相同DNA探针。 相似文献
43.
常规方法研制的致弱苗或灭活苗不能满足畜禽生产向更高效益发展的需要。除了灭活苗往往成本较高而弱毒苗有重新恢复毒力再变为病原性的潜在危险外,现有疫苗中还有一些其它有待解决的问题。例如,一些弱毒疫苗的免疫效果,受母源抗体的干扰较大,如对鸡新城疫及传染性腔上囊病的疫苗。抗鸡马立克病的与活细胞结合的弱毒苗的免疫效果很好,但为保持疫苗制剂的活细胞状态,使其广泛应用受到很大限制。对有些病,如禽流感及猪伪狂犬病等,有必要在畜(禽) 相似文献
44.
脉冲电场凝胶电泳技术朱国强崔治中王永坤(江苏农学院动物医学系,扬州225009)脉冲电场凝脉电泳(pulsed-fieldgelelec-trophoresis,PFGE),又称脉冲式交变电场电泳,随着时间与电流大小的交替改变,使DNA分子能不断地调... 相似文献
45.
网状内皮组织增生病病毒特异性杂交瘤细胞培养液中单克隆抗体的效价动态 总被引:1,自引:0,他引:1
为获取网状内皮组织增生病病毒(REV)单克隆抗体的最高抗体滴度,在含10%胎牛血清的DMEM培养液中培养对REV特异性的杂交瘤细胞株11B154。每1 mL培养液中平均含0.65×106 个活细胞,于37 ℃在含7% CO2的培养箱中继续培养。在24、48、72和96 h后,每1 mL培养液中的平均总细胞数和活细胞数分别是:1.13×106和1.03×106 (活细胞占94.5%)、3.42×106和2.48×106(活细胞占72.5%)、2.6×106和0.98×106 (活细胞占37.7%)、2.47×106和0.53×106(活细胞占21.5%)。同时用细胞培养上清液对REV感染的鸡胚成纤维细胞作间接荧光抗体试验,在培养24、48、72和96 h后上清液中平均抗体效价分别是1:67、1:133、1:67及1:33。结果表明,培养48 h后,当细胞总数及活细胞总数最高但活细胞百分比开始下降时的培养液中抗体效价最高。该研究结果可作为用细胞培养方法大批量生产抗REV单抗的技术参数。 相似文献
46.
用大肠杆菌BL21表达了马立克氏病病毒(MDV)强毒GA株的囊膜糖蛋白B(gB)基因,通过SDS-PAGE电泳分离表达蛋白条带,切下并碾碎后作为免疫原制备单克隆抗体。通过ELISA和间接免疫荧光试验(IFA),得到1株阳性单克隆抗体杂交瘤细胞株7C8。该单抗腹水的ELISA效价为1:2^12,IFA效价为1:800,与MDV不同致病型毒株CVI988、GA、RB1B、MD11、648A株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)均呈IFA阳性。1:100稀释时与GA株感染的CEF在斑点酶联免疫吸附试验(dot-ELISA)中呈阳性。 相似文献
47.
48.
49.
产蛋下降综合征(EDS-76)病毒DNA探针的制备及应用研究 总被引:2,自引:0,他引:2
用纯化的产蛋下降综合征(EDS-76)病毒(H91毒株)悬液提取的核酸,经琼脂糖凝胶电泳只出现1条分子量较大、背景清晰的核酸带。用BamHI酶消化产生4个片段,大小分别为17kb、10kb、4.0kb和2.0kb。将其中的2.0kb片段克隆进pUC18DNA载体中,重组质粒DNA用digoxigenin标记作为DNA探针,在dotblot中该探针不与鹅胚尿囊液核酸抽提物、马立克氏病病毒(MDV)DNA、鸡传染性贫血病毒(CAV)DNA、SPF鸡基因组DNA等核酸反应,只与3株EDS病毒(EDS标准毒株AV-127、EDSH91毒株和从健康鹅体中分离的EDSY81毒株)DNA呈阳性反应。人工感染产蛋母鸡和雏鸡后24h即可用该探针从泄殖腔棉拭子样品中检测出EDS病毒DNA,在感染后35h仍能从部分感染鸡样品中检出。对部分探针检测阳性鸡的泄殖腔棉拭子样品用SPF鸡胚分离病毒,并用HA和HI试验检测分离病毒的特异性;在感染过程中,同时检测了血清中HI抗体的消长情况。结果表明,人工感染鸡排毒至少可以维持2个月左右,而且血清中HI抗体即使很高,也不能阻止感染鸡的排毒。 相似文献
50.
禽白血病及禽网状内皮细胞增生病感染情况的调查 总被引:2,自引:0,他引:2
在江苏省3个鸡场,应用ELISA对禽白血病病毒及禽网状内皮细胞增生病病毒的感染情况做了调查。3个鸡场的所有被检的10个鸡群均感染了禽白血病病毒(ALV),在被检的151只鸡血清中,ALV群共同性P27抗原的阳性率为39.10%(59/151);在3个鸡场中,只有1个场感染了禽网状内皮细胞增生病病毒(REV),在被检的51只鸡血清中,有2只为禽REV抗原阳性。材料和方法一、被检鸡血清:随机取样,分别采自江苏省南京市、江都县和泰县3个鸡场的不 相似文献