牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌强菌株rpoE蛋白的原核表达及其免疫保护效力研究     

嵇少泽  高云航  勾长龙  张喜庆  王羽  田佳琪  李晨 《中国预防兽医学报》2019,(7):740-743

为研究牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌(PM)强菌株rpoE蛋白的免疫保护性,本研究利用PCR方法扩增牛荚膜A型PM的rpoE基因,构建pET-28a-rpoE重组表达质粒,经诱导表达后SDS-PAGE检测结果显示,表达的rpoE蛋白相对分子量约为20 ku,与理论值一致;western blot结果显示该蛋白具有很好的特异性和反应原性;纯化的rpoE蛋白经皮下免疫BALB/c小鼠,间接ELISA检测融合蛋白的免疫原性,结果显示rpoE蛋白可以诱导小鼠产生较高水平的特异性抗体;PM攻毒后,免疫组保护率为70%。本研究获得的牛荚膜A型PM重组rpoE蛋白具有良好的免疫原性,免疫小鼠后能够提供一定的保护,可以作为研发PM亚单位疫苗的候选抗原。  相似文献   

犬细小病毒VP2蛋白的原核表达与纯化   总被引：2，自引：1，他引：1  

龙丹丹  嵇辛勤  段志强  阮涌  陈强  雷云  万彪  胡焱 《中国畜牧兽医》2018,(3)

为了研究犬细小病毒(canine parovirus,CPV)VP2蛋白的结构和功能,本试验对CPV VP2蛋白进行表达和纯化。采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,将CPVVP2基因插入原核表达载体pET-32a(+)中构建重组原核表达载体pET-VP2,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,在不同IPTG浓度、诱导温度和诱导时间条件下进行原核表达,确定最佳诱导条件。最佳条件下的诱导产物经超声破碎离心后,利用镍柱对重组蛋白进行纯化并用SDS-PAGE和Western blotting进行双重鉴定。结果显示,重组质粒pET-VP2经双酶切鉴定分别获得大小为5 900bp左右的载体条带和1 755bp左右的目的基因条带,成功构建了pET-VP2重组质粒;重组VP2蛋白的分子质量约为64ku,与预期大小一致,且在37℃、1.0mmol/L IPTG、诱导5h条件下表达量最高,条带最亮;蛋白超声破碎后经SDS-PAGE发现,只在沉淀中出现了目的条带,而上清中并未出现相应条带,说明重组蛋白均以包涵体的形式存在;纯化后获得的重组蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting双重鉴定,均在64ku处出现条带,说明纯化后的蛋白为重组蛋白pET-VP2。本试验通过对CPV VP2蛋白的原核表达及纯化成功获得了大量纯度较高的CPV VP2蛋白,为今后制备CPV VP2蛋白多克隆抗体及进一步研究该蛋白在对治疗犬细小病毒病中的临床应用价值提供了基础理论依据。  相似文献   

F1代苏香杂交猪GAS7基因多态性与生长性状关联性分析     

阮涌  嵇辛勤  卢贤君  赵佳福  段志强  倪萌萌 《黑龙江畜牧兽医》2018,(5)

为了解苏香杂交猪生长休止基因(GAS7基因)SNPs与生长性状的相关性,试验以61头F1代苏香杂交猪为研究对象,应用PCR扩增及直接测序技术对杂交猪GAS7基因进行多态性检测,并进行SNPs与生长性状各指标的相关分析。结果表明:在GAS7基因外显子2中共发现3个SNPs,39位T位点,45位T位点,93位G位点;GAS7基因外显子2中的3个SNPs与2,3,4,6月龄时的体高均存在显著正相关(P0.05),且纯合基因型均高于杂合基因型。说明GAS7基因外显子2的SNPs可作为体高性状的候选基因。  相似文献   

勤奋耕耘终不悔赢来杜鹃四季红     

嵇锡华 《中国农村科技》1999,(11):4-6

我是江苏省宜兴市张泽镇茅棚村的农民,1981年开始,我利用屋后三分自留地栽培杜鹃花,并走上了致富路.如今,我创建的华盛杜鹃花实验场,占地200亩,是目前国内规模最大、品种最多、实力最雄厚的杜鹃花专业生产基地.十多年来,我在走一条艰苦创业的道路时,得到了各级党政组织和妇女组织的关心和支持,我深深感到是党的改革开放政策扶我和乡亲们走上致富路,是"双学双比"活动拓展了我的知识视野,坚定了我发展种植业的信心.  相似文献   

推进四大作物生产全程机械化     

嵇巍然  景影  葛鸿燕 《农机科技推广》2009,(5):44-44

黑龙江省齐齐哈尔市是农业大市，是国家重要的商品粮基地，粮食产量约占黑龙江省的1／6。耕地面积3143万亩，从作物品种的种植面积来看，主要是玉米、大豆、水稻和马铃薯四大作物。  相似文献   

一例犬耳廓血肿的内侧切口双面压迫疗法     

王小兵  嵇辛勤  黄梦秋  邓珊珊 《黑龙江畜牧兽医》2019,(5):159-160,180

  相似文献   

高等学校招生过程中特殊人才选拔探索     

嵇留洋  高峰 《高等农业教育》2014,(9)

分析了高等学校招生过程中选拔特殊人才的类型与意义,探讨选拔过程中存在的问题,从加大高校自主权、多次分类考生、设立特殊人才培养实验基地、加强特殊人才评估机构建设、建立监管机制等方面,对高等学校特殊人才选拔进行探索。  相似文献   

超高茬麦田套播水稻的技术特征与优势     

嵇立生  刘宣东 《新农村(黑龙江)》2012,(13)

  相似文献   

试论大兴安岭林区湿地资源的保护与合理开发     

嵇晓芳 《防护林科技》2007,(2):62-63

阐述了大兴安岭林区湿地类型的划分和分布特点,分析了大兴安岭林区湿地资源利用方面存在了问题,并据此提出了今后大兴安岭林区湿地资源保护与合理开发利用的4条措施:(1)广泛开展宣传教育;(2)加强湿地生态系统和生态环境保护;(3)增加科技投入,积极开展湿地生态的科学研究;(4)严于管护,科学利用。  相似文献   

RNAi技术抑制禽主要病毒感染的研究进展     

嵇辛勤  段志强 《黑龙江畜牧兽医》2009,(8)

RNA干扰(RNAi)是由内源性或外源性双链RNA(dsRNA)介导的特异性基因表达沉默现象.1998年,Fire首次发现dsRNA并将其注入线虫(C.elegans)体内可特异性抑制基因表达,将这种由dsRNA引发的抑制特定基因表达的现象称为RNAi.  相似文献