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原位PCR及其在兽医分子生物技术中的应用 总被引：2，自引：2，他引：0
原位 PCR是一种将常规 PCR的高效扩增与原位杂交技术结合起来的新方法 ,其类型主要有直接原位 PCR、间接原位 PCR、原位 RT-PCR和原位再生序列复制反应 ,其中间接原位PCR应用最为广泛。原位 PCR技术的基本步骤包括标本处理、蛋白酶消化、原位 PCR扩增和扩增后产物的检测。原位 PCR技术操作比较复杂 ,同时在操作中易出现假阳性结果和假阴性结果。尽管如此 ,原位 PCR技术作为一种特异性、敏感性高的靶序列定位检测技术 ,作为研究基因信息和细胞、染色体等的形态信息的有力工具 ,在兽医分子生物技术中仍然具有广泛的应用和发展前景 相似文献
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为研究兔瘟病毒对兔血管内皮细胞的致病性,建立兔血管内皮细胞的体外培养方法.采用消化法和组织块贴壁法分离获得兔子血管内皮细胞,对其进行体外培养,并对细胞进行第Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学鉴定和CD34的间接免疫荧光检测.结果表明,消化法分离的细胞20 h左右贴壁,约1周长成单层,纯度较高;组织块贴壁法分离的细胞两周才开始... 相似文献
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我国主要猪病毒性腹泻疾病的特点及其防治对策 总被引：1，自引：0，他引：1
规模化养猪场猪传染性腹泻是一类与卫生状况及饲养管理密切相关的传染病。在养猪发达国家此类疫病已不再是主要问题，但在我国仍然是危害严重的一类常见传染病。根据其致病因素的不同，可分为细菌性、病毒性、寄生虫性以及营养性腹泻等。其中病毒性腹泻的危害是最为严重的，它的发生与流行在近年呈现持续上升的趋势，已成为造成猪场损失的最为重要的原因之一。 相似文献
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猪传染性胃肠炎(TGE)是由冠状病毒科的猪传染性胃肠炎病毒所致的猪的一种急性、高度接触性肠道传染病，临床以呕吐、严重腹泻和失水为主要特征。本病只感染猪只，不同品种、性别、年龄的猪均能感染，以仔猪最为严重。10日龄以内仔猪死亡率高达100％；断奶以后各阶段猪感染后常呈良性经过。并产生主动免疫力。本病的发生虽无明显季节性，但冬春 相似文献
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1957年,Isaccs和Lindenmann将灭活的流感病毒处理过的鸡胚绒毛尿囊膜块置于37℃震荡培养后,发现在其培养液中出现了一种能明显干扰和抑制流感病毒和仙台病毒复制的可溶性细胞分泌物 相似文献
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兽用生物制品企业按照GMP要求设计的标准万级检验用无菌室是质量监察部门工作人员活动的主要场所,做好无菌室的管理和质量控制是完成各项检验工作的前提和关键,本文对检验用无菌室的管理和质量控制作了较为详细地阐述。 相似文献
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为便于快速、准确检测猪圆环病毒2型(PCV2),减少其对我国养猪业的威胁,建立了PCV2 Cap蛋白琼脂扩散试验(AGP)检测方法。应用表达制备好的PCV2 Cap蛋白,与弗氏佐剂乳化后免疫家兔,制备多克隆抗体并进行抗体效价测定。确定AGP最佳工作条件,并进行抗体特异性、稳定性及符合率试验。结果显示:制备的多克隆抗体ELISA效价可达1:12 800,AGP效价可达1:32,表明其具有良好的特异性、稳定性;对20份PCV2 Cap蛋白抗原进行检测,发现其结果与应用标准猪血清抗体检测结果符合率为100%。结果表明,制备的抗PCV2 Cap蛋白多克隆抗体可替代标准抗体,用于PCV2 Cap蛋白的AGP试验检测。本研究为PCV2检测以及后续的免疫学特性研究提供了技术支撑。 相似文献