应用反转录聚合酶链反应检测鸡传染性支气管炎病毒核酸的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

张七斤  红梅 《中国兽医杂志》1997,23(1):5-7

根据国外报道的鸡传染性支气管炎病（ＩＢＶ）Ｇｒａｙ株的纤突蛋白（Ｓ１）核苷酸序列，自行设计合成了Ｓ１蛋白主要抗原决定簇基因两侧的１对引物，跨幅为１．０ｋｂ。用该引物对从内蒙古、天津、山东等地分离的３株ＩＢＶ进行ＲＮＡ提取，反转录后ＰＣＲ，经琼脂糖凝胶电泳结果表明，３株毒株均获得了与预期一致的ＰＣＲ产物；此外，ＩＢＶＰＣＲ灵敏度的测定结果表明，ＰＣＲ方法可检测出１０ｐｇ的模板，ＰＣＲ酶切结果为，ＨａｅⅢ、ＴａｇⅠ酶对３株ＰＣＲ产物均有１个酶切位点，而ＭｓＰⅠ酶无酶切位点  相似文献   

2株鸡新城疫病毒的F基因序列测定及其遗传变异分析     

董艳蕾  张七斤 《国外畜牧学(猪与禽)》2009,29(1):75-77

将内蒙古地区呼和浩特市和包头市获得的两株鸡新城疫病毒分离株纯化培养后,提取病毒RNA,用一步法RT—PCR扩增F基因,测出F基因的全部核苷酸序列为1662bp,编码554个氨基酸。与国内外发表的部分NDV病毒的核苷酸序列进行比较。结果表明,这两株分离株核苷酸同源性为97．5％,与标准毒株F48E9的同源性分别为86．8％和85．8％。与长春、广东、广西、山东、河北、浙江、韩国等地的NDV的同源性在96.3％-98．8％之间。并且这2株分离株F蛋白的裂解位点氨基酸组成为112R—R-Q—K—R—F117,具有典型的强毒株裂解位点的特点。  相似文献   

奶牛布鲁氏菌的PCR鉴定   总被引：7，自引：2，他引：5  

伊日盖  申之义  李平安  范伟兴  赵规  张七斤 《畜牧与饲料科学》2009,30(3)

采集内蒙古某地区的可疑感染布鲁氏菌病奶牛的乳样及奶牛流产胎儿的肺、肝、脾等相关病料,分离并培养出11株病原菌,经BCSP31-PCR、VirB8-PCR、多重PCR及AMOS-PCR4种PCR方法鉴定,证实11株病原菌均为布鲁氏菌,并将11株菌定型为牛种5,6,9或3b型.  相似文献