猪流行性腹泻病毒3种抗原卵黄抗体的制备     

胡青松  李吕木  张小飞 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2015,43(11):35-40

【目的】探讨猪流行性腹泻病毒(PEDV)3种不同抗原制备的卵黄抗体对PEDV的中和能力,为抗猪流行性腹泻卵黄抗体的制备提供新的方法和理论基础。【方法】根据PEDV S糖蛋白基因设计引物扩增PEDVS534基因(636~789位氨基酸)和PEDV COE基因(499~638位氨基酸),并构建原核表达质粒pET32a-PEDV S534和pET32a-COE,分别转化表达菌株BL21(DE3)进行诱导表达。以原核表达的PEDV S534蛋白、COE蛋白以及PEDV灭活病毒为抗原,分别免疫产蛋鸡并制备卵黄抗体,通过病毒中和试验评价各卵黄抗体的中和效力。【结果】成功表达了PEDV S534蛋白和COE蛋白,Western-Blotting分析显示,2种蛋白均具有很好的免疫原性;制备的3种特异性卵黄抗体均具有一定的病毒中和能力,PEDV S534蛋白特异性卵黄抗体的中和效价为1∶12,COE蛋白特异性卵黄抗体的中和效价为1∶25,而PEDV灭活病毒的卵黄抗体中和效价达到1∶120。【结论】PEDV灭活病毒的中和能力最强,其次为COE蛋白特异性卵黄抗体,PEDV S534卵黄抗体的中和能力较弱。  相似文献   

番鸭源鸭肝炎病毒CH12株的分离与全基因组序列分析     

黄显明  张小飞  毛火云  尹秀凤  丁美娟  王伟  靳宇田 《中国动物传染病学报》2013,(4)

从浙江省某疑似鸭病毒性肝炎的发病番鸭群分离到1株鸭肝炎病毒（Duck hepatitis virus,DHV）CH12株,分离毒株经动物回归试验、ELD50测定、中和试验等确定为DHV-1（基因A型DHV）。通过RT-PCR方法对DHV CH12株的全基因组序列进行分段扩增并测序。结果表明,CH12株的全基因组长度为7690 bp（不包括PolyA）,包括626 bp的5′UTR,6747 bp的ORF和317 bp的3′UTR。CH12株各基因均与基因A型DHV毒株的序列相似性较高,与基因B型和基因C型DHV毒株的序列相似性较低。全基因组核苷酸、多聚蛋白、VP0、VP3、VP1、2C和3D基因的进化分析均显示,CH12株均与基因A型DHV在同一进化分支上,亲缘关系较近,属于基因A型DHV。  相似文献   

盐城市银杏栽培技术     

张小飞 《现代农业科技》2013,(2):186

分析银杏的生长特性,提出在盐城市的栽培技术,以为其在当地的推广种植提供参考。  相似文献   

猪源大肠杆菌药敏试验结果与分析     

孙华伟  张敬峰  李彬  张小飞 《猪业科学》2021,38(3):48-49

大肠杆菌在猪场是一个伺机而动的沉默杀手,得到机会就会毫不犹豫地出手。江苏省农业科学院兽医诊断检测中心在2020年对猪源大肠杆菌分离菌株的药敏试验结果显示:分离菌株对猪场常用药物阿莫西林和氟苯尼考完全耐药,而磷霉素和丁胺卡那的敏感率较高。在“禁抗”时代,对大肠杆菌病的防控是摆在猪场面前的一个重要挑战。  相似文献   

数字PCR技术的发展与展望     

孙华伟  张敬峰  张小飞 《猪业科学》2020,37(3):130-131

数字PCR是基于反应体系有限分割的原理,突破了荧光定量PCR以“荧光信号”的变化进行检测的方式,实现了“数字式”检测。在特异性、可重复性等方面实现了里程碑式的跨越,在生物研究、医学检测、环境食品安全监测等科技领域得到广泛认可和推广。在国家政策大力扶持下,中国数字PCR行业保持稳定增长,数据显示,2018年中国数字PCR行业市场规模达到26.3亿元,同比增长17.9%。但目前在兽医检测领域,数字PCR在国内仍处于萌芽阶段,从生物科技的发展经验看,数字PCR预计将成为兽医检测领域未来的主要发展方向,非洲猪瘟的肆虐将催化这一进程。  相似文献   

核酸检测在猪病检测中的常见问题与分析     

孙华伟  郭静  张敬峰  李彬  张小飞 《猪业科学》2020,37(11):70-71

2020年突如起来的新冠肺炎疫情使“核酸检测”进入了公众的视野，但在核酸检测中，部分病例在不同时间经2次以上的检测后结果由阴性转为阳性，这种现象的出现给临床诊断和疾病控制带来了极大的困扰。同样，在猪病的核酸检测中，假阴性问题亦普遍存在。新病毒的确认时间周期长、采集的待检样品不合格、核酸提取效果差是出现上述现象的主要因素。因地制宜地制定样品采集方案，试剂盒质量可靠，监督环节不缺失等，是输出合格检测结果的重要保障。  相似文献   

乡村振兴战略下西安休闲农业产业现状与发展探讨     

李铜  李冬梅  张小飞  贺喻  刘喆  何苟妮  席小祥  王亚刚  张选厚 《农学学报》2021,11(7):119-124

休闲农业作为一项新的产业形态和消费业态,在发展农业、繁荣农村、富裕农民、保护生态、传承文化等方面具有不可替代的作用,已成为农业和农村经济发展的亮点之一。为推动西安市休闲农业产业健康有序发展,本研究采用查阅资料、专题访谈、实地调研等形式,对西安市休闲农业产业现状进行了专题调研。结果表明,目前西安市休闲农业已基本形成了以秦岭北麓休闲农业产业带、渭河沿岸休闲农业产业带和白鹿塬、杜陵塬、荆山塬休闲农业示范区为核心的“两带三区”产业格局,农家乐、休闲农庄、休闲农业园区为主要产业模式。西安市大力发展田园综合体,兴建特色休闲农业小镇,各种经营模式并存发展,模式不断丰富,功能日益拓展,呈现出良好的发展态势。但同时发现了影响产业发展的环境基础设施滞后、产业发展不平衡、管理制度不健全等问题,最后提出要合规经营有序发展、加强休闲农业的组织与协调、做优做强休闲农业特色产业等多项整合推进措施,以促进产业发展。  相似文献   

玉米丝黑穗病菌PCR检测     

白寿发  高增贵  张小飞 《杂粮作物》2010,30(4):294-296

利用玉米丝黑穗病菌基因组特异引物PCR技术,检测了该菌对玉米植株的侵染状况,并对不同玉米品种在苗期对丝黑穗病菌的抗性进行了初步判断。研究结果表明,感病品种K12分别在接种后第3 d的茎中,6 d的茎,9 d的根、茎、叶,12 d茎,抗病品种20060分别在接种后第3 d的茎、6 d的茎、9 d的茎和叶、12 d的茎和15 d叶都能扩增出PCR特异片段,经过EM种衣剂包衣的玉米幼苗的根茎叶材料扩增出来的特异DNA条带明显少于未经包衣的玉米幼苗。EM包衣处理能够有效的提高玉米种子的抗病能力,减少了玉米丝黑穗病菌对幼苗的侵染机会,有效地防治了玉米丝黑穗病。  相似文献   

Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达   总被引：2，自引：0，他引：2  

胡来根  廖俊伟  尹秀凤  刘大伟  毛火云  张小飞 《江苏农业学报》2010,26(2)

根据Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-I)基因组序列设计并合成一对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增DHV-I(A66株)VP1基因。用限制性内切酶EcoRⅠ/HindⅢ消化VP1基因和转移载体pFastbacⅠ,在T4DNA连接酶作用下将二者连接构建转移质粒pFastbac-VP1。经PCR、双酶切及测序鉴定后将其转化至含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10bac中,蓝白斑筛选获得重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-VP1,在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf 9,获得重组杆状病毒rvBac-VP1。SDS-PAGE分析结果表明,VP1基因在昆虫细胞中获得表达,表达产物分子量约为2.7×104。Western-blot检测结果表明,表达产物能与抗DHV-I阳性血清发生反应,具有良好的反应原性。  相似文献   

瓜类枯萎病耐铜锌生防木霉菌株的初步筛选     

高增贵  那明慧  庄敬华  赵柏霞  张小飞 《北方园艺》2010,(2)

采用平皿对峙培养等方法对10株耐铜锌木霉菌进行筛选,得到8株抑制率较高的生防菌株,并进行了防治瓜类枯萎病盆栽试验,最终筛选出2株防治效果较好的木霉菌变异株TR123、TR68。结果表明:多数REMI变异株的生防效果优于野生菌株,其中以TR123、TR68生防效果最好,野生木霉菌株中T36生防效果最好。  相似文献