蛹虫草培养残基中虫草素的水热回流提取及含量测定     

彭志苹  张景艳  郭志廷  王磊  张凯  张康  王贵波  仇正英  王学智  李建喜 《中国畜牧兽医》2022,49(9):3333-3342

【目的】 探究水热回流法提取蛹虫草培养残基中活性成分虫草素的最佳工艺参数。【方法】 选取液料比、提取次数、提取温度、提取时间4个因素进行单因素试验和正交试验,并通过高效液相色谱法（HPLC）测定虫草素含量,确定水热回流法提取蛹虫草培养残基的最佳工艺参数。【结果】 方法学验证结果表明,蛹虫草培养残基中虫草素含量的HPLC测定方法精密度、重复性、稳定性相对标准偏差（RSD）均<2%,准确度RSD为2.64%,标准曲线线性相关性高。正交试验结果显示,影响水热回流法提取效果的因素依次为提取时间、提取次数、液料比、提取温度,其中提取时间和提取次数对提取物虫草素含量均有显著影响（P<0.05）,提取温度和液料比影响不明显（P>0.05）。单因素试验和正交试验结果表明,蛹虫草培养残基的最佳提取工艺参数为：液料比25：1、提取次数5次、提取温度70 ℃、提取时间60 min,该提取条件下测得蛹虫草培养残基中虫草素含量为1.48 mg/g。【结论】 采用本研究确定的水热回流法最佳工艺参数能有效提取蛹虫草培养基活性成分,且操作简单实用,提取物活性成分得率稳定,为后续蛹虫草培养残基产品开发提供参考依据。  相似文献   

植物挥发性气味物质对中红侧沟茧蜂的趋向行为影响及田间诱集效果   总被引：1，自引：0，他引：1  

张康  任丽燕  李科明  王沫  张永军  郭予元 《中国生物防治》2011,27(2):157-164

明确不同挥发性气味物质对中红侧沟茧蜂Microplitis mediator选择行为的作用,有助于鉴定设计引诱剂以更好地利用天敌.本文采用"Y"型嗅觉仪测定了中红侧沟茧蜂对60种挥发性气味物质的趋向行为反应.结果表明,中红侧沟茧蜂对脂肪族化合物趋性最强,萜类化合物次之,芳香族化合物则相对较弱.中红侧沟茧蜂对(Z)-3-己烯乙酸酯、β-紫罗兰酮、2-十一烷酮、己醛、正辛醇、罗勒烯、橙花叔醇和香叶醇等气味的选择性最高,选择率分别为80.7%、73.2%、70.9%、69.6%、67.8%、74.1%、71.2%和67.9%,与对照相比差异极显著(P＜0.01).为了明确田间条件下挥发性气味物质对中红侧沟茧蜂行为的影响,选择趋性效果较强的6种化合物分别制成诱芯进行了田间罩笼诱集试验,结果表明中红侧沟茧蜂对罗勒烯和(Z)-3-己烯乙酸酯的选择性最高,校正选择率分别为18.6%和14%,显著高于与其它化合物.田间应用结果与"Y"型嗅觉仪测定结果具有一致性.  相似文献   

犬降钙素原蛋白多克隆抗体制备及应用分析     

王栋  刘营  张康  张鸿焱  苏峰  马卫明 《中国畜牧兽医》2020,47(3):892-901

试验旨在获得高纯度犬降钙素原（procalcitonin,PCT）重组蛋白,并对该蛋白的临床应用进行分析。采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,将PCT基因克隆至原核表达载体pET-30a（+）中,经双酶切和测序鉴定阳性的重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,以终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达,采用镍柱进行重组蛋白的纯化,纯化蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,间接ELISA法检测抗体效价,Western blotting检测重组蛋白与犬PCT多克隆抗体的特异性,采用ELISA法检测健康犬和炎症犬血清PCT。双酶切及测序结果显示,犬PCT基因成功插入pET-30a（+）,未出现碱基突变;SDS-PAGE结果显示,重组蛋白以可溶性形式表达,分子质量为14.9 ku,间接ELISA法测定的免疫小鼠血清抗体效价达1：51 200。Western blotting结果表明,制备的多抗血清具有很好的特异性;ELISA结果显示,炎症犬血清内检测到PCT,且其浓度与炎症反应程度呈正相关。结果表明,本研究成功制备了犬PCT蛋白多克隆抗体,且犬血清PCT蛋白是一种潜在的新型严重细菌性炎症感染指示物。  相似文献   

灰葡萄孢BcPDR1基因与PKA编码基因的关系研究     

张强  李白  袁雪梅  刘晓颖  藏金萍  曹宏哲  张康  邢继红  董金皋 《植物病理学报》2021,51(2):184-191

 为明确灰葡萄孢BcPDR1基因与病菌cAMP信号途径中PKA编码基因BcPKA1、BcPKA2、BcPKAR之间的关系,利用Real-time PCR技术分析了BcPDR1基因突变对PKA编码基因BcPKA1、BcPKA2、BcPKAR表达的影响,以及PKA编码基因突变对BcPDR1基因表达的影响。结果发现,BcPDR1基因突变体中BcPKA1、BcPKA2、BcPKAR的表达水平均显著高于野生型和回复菌株,BcPKA1、BcPKA2、BcPKAR基因的RNAi突变体中BcPDR1基因表达水平显著低于野生型。我们分别构建了PKA编码基因BcPKA1、BcPKA2、BcPKAR在敲除突变体ΔBcpdr1中过表达的菌株ΔBcpdr1/BcPKA1-OE、ΔBcpdr1/BcPKA2-OE、ΔBcpdr1/BcPKAR-OE;对过表达菌株的表型和致病力进行分析发现,过表达菌株的菌落形态、菌核形成、菌丝形态、生长速率、产孢量和致病力均与突变体ΔBcpdr1表现显著的差异,而更接近野生型BC22的表型和致病力。结果表明,灰葡萄孢BcPDR1基因与PKA亚基基因BcPKA1、BcPKA2和BcPKAR的表达水平密切相关,BcPDR1基因负调控这3个基因的表达,而这3个基因对BcPDR1基因表达有正调控作用。本研究为进一步阐明灰葡萄孢BcPDR1基因调控病菌生长发育和致病力的分子机制奠定了基础。  相似文献   

我国林业生态建设存在的问题及对策     

王纲  张康 《北京农业》2011,(15):157

阐述了我国林业生态现状,分析了林业生态建设存在的主要问题,并提出加强我国林业生态建设的对策。  相似文献   

江苏省优质秋蚕品种开发思路   总被引：1，自引：1，他引：0  

张康伍  贾仲伟  吴阳春 《江苏蚕业》2010,32(1):27-28

江苏省是我国优质原料茧的最主要生产基地之一，生产高品位生丝是江苏蚕桑产业稳定发展的第一目标，目前我省已经形成了一批常年生产高品位生丝的龙头企业，春季主推蚕品种为“菁松×皓月”，秋季主推蚕品种为“菁松×皓月”和“苏菊×明虎”。“菁松×皓月”为春用蚕品种类型，在春季能够稳定单产，丝质优良，可以生产5—6A级高品位生丝，但在秋季饲养近几年单产存在不稳定性；  相似文献   

用Nested—PCR诊断鸡弯曲菌病的研究     

张康  龚振华  李蕾  王洪伟  李玉清  张丽娟  王丽萍  庄青叶  于建敏  李金平  刘国庆 《动物检疫》2012,(11):44-46

本研究采用Nested—PCR方法,对于临床采集的感染空肠弯曲菌的病鸡组织样品进行了检测,研究结果表明,采用Nested．PCR方法检测空肠弯曲菌具有结果清晰,操作简便,快速等特点。研究还发现,空肠弯曲菌对鸡的致病性可能增强,应引起重视。  相似文献   

表没食子儿茶素没食子酸酯和牛磺酸联用对犬白内障模型晶状体上皮细胞凋亡的影响     

王霞  张康  夏楠  李婧  赵海焦  吴国娟  张中文 《北京农学院学报》2012,27(3):24-28

为提供兽医临床用药治疗白内障的理论依据,选取健康成年犬15只(30眼),随机分为模型组、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)组、牛磺酸、EGCG联合牛磺酸组和对照组,每组6个重复。除对照组外其他组用fenton液造模。裂隙灯观察晶状体的混浊情况,并根据国际通用的晶状体混浊分类体系Ⅲ(LOCSⅢ)分类,当混浊达到II期时用药治疗。临床用药40d后,取出晶状体透射电镜观察形态结构的变化;免疫组织化学法测定晶状体上皮细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达水平;qRT-PCR测定其mRNA的表达水平。结果表明,与模型组相比联合组中Bax/Bcl-2的比值和Caspase-3的表达较模型组显著降低(P<0.05),证明联合用药可以通过上调凋亡基因Bcl-2的表达抑制细胞凋亡。  相似文献   

过氧化氢酶BcCAT2在灰葡萄孢生长发育和致病过程中的功能初探     

宋美昕  张玮煜  王欣凯  张虎  宋凯璇  邢继红  张康  董金皋 《河北农业大学学报》2023,(2):16-21

为了明确灰葡萄孢过氧化氢酶BcCAT2在病菌生长发育时期和侵染过程中的功能,本研究利用生物信息学方法,对BcCAT2及其编码蛋白进行分析;构建了BcCAT2敲除载体,利用原生质体转化方法,获得了BcCAT2敲除突变体;利用PCR和qRT-PCR技术,对所获得的转化子进行鉴定;对野生型菌株和△Bccat2的表型（菌落形态、菌丝形态、生长速度、产孢量等）和致病力进行分析。结果发现,BcCAT2基因的缺失会导致菌丝形态纤细、生长速度缓慢、几乎不产菌核和分生孢子,且致病力明显下降,表明BcCAT2基因正调控病菌的生长发育和致病力。研究结果为进一步阐明灰葡萄孢过氧化氢酶BcCAT2基因调控病菌生长发育和致病力的分子机制奠定了基础。  相似文献   

多功能组合型农副加工机械的研制     

张康 《农业装备技术》2001,(2):27

1　前言随着农村经济的发展 ,农户的生活水平在不断地改善和提高 ,农民希望从笨重体力劳动中解放出来 ,去发展其它经济。特别是偏远山区和交通不便的农民 ,吃的米、面都靠人背肩挑 ,去几里或几千里以外的地方加工 ,广大农民迫切需要小型家庭加工机械去解决问题。 90年代市场上出售的碾米机、磨粉磨浆机都是单机 ,每台机上都装有动力电机 ,总体价格就比较高 ,增加了农民经济负担。我们在调研时 ,农民就提出能否设计一种一机多用、价格便宜、既能碾米又能磨粉、磨浆的组合加工机械。为此 ,我们设计了既能碾米又可磨粉、磨浆 ,适合农户使用的多…  相似文献