动物科学专业《分子生物学》课程多元化考核模式探讨     

徐坤  冯宇  王昕  徐秀容  张智英 《家畜生态学报》2017,38(11):91-96

针对目前动物科学专业《分子生物学》课程学时严重不足的现象以及教考分离所导致的种种弊端,提出详细的"课堂表现+章节-期末考试+文献汇报+综述写作+研究方案设计+实验操作"六位一体多元化考核方案。旨在建立"教-学-考"实时联动机制,"以考促学"、"以考促教",多管齐下促使教师和学生充分利用课堂、课间和课余时间进行互动交流;进而提高学生学习纪律与积极性、知识被动学习、知识主动学习、总结归纳、应用创新和实验动手能力等方面的综合素养,为培养优秀的动物科学专业拔尖创新型科研人才奠定基础。  相似文献   

靶向敲除绒山羊lnc15479的CRISPR/ Cas9构建及活性验证     

冯帅帅  雒志新  闫强  徐坤  王善禾  邵斯旻  张智英  王昕 《西北农业学报》2016,25(10):1442-1448

为研究生长期和休止期lnc15479的差异表达在陕北白绒山羊毛囊周期性发育中的作用及功能,利用CRISPR/Cas9技术,在lnc15479的上、下游各设计1个sgRNA靶位点,构建CRISPR/cas9表达载体;并基于SSA修复机制,分别构建含有红色和绿色荧光标记的双荧光报告载体系统。通过将表达载体和报告载体共同转染HEK293T细胞,检测该CRISPR/Cas9系统的工作效率。结果表明,lnc15479的CRISPR/Cas9表达载体成功构建,根据红色和绿色荧光表达情况及细胞计数的方法,该系统的工作效率约为20%。研究结果为进一步分析lnc15479的功能提供技术支持。  相似文献   

黄骅市林业发展现状 存在问题及解决思路     

张旺林  张智英 《河北农业科技》2011,(7):9-9

本文阐述了黄骅市林业发展现状、存在的主要问题,提出了今后黄骅市林业发展的主要思路、目标和主要任务措施,对黄骅市经济发展起到一定推动作用。  相似文献   

云南彝族农户庭园系统生物多样性研究 ——以云南省武定县永兆村为例   总被引：2，自引：0，他引：2  

蔡传涛  冯耀宗  张智英 《中国生态农业学报》2002,10(4):125-126

对云南省武定县永兆村彝族农户庭园生物多样性系统研究发现，该村农户庭园中生物种类109种，其中蔬菜占33.0％，经济林果占21.1％，饲养动物占14.7％，且随历史的变化其生物种类而变化；不同生物种类在农户庭园中出现的频率不同，出现频率在90％以上的有13种；农户庭园中生物品种为1-7个，物种丰富度为3.21-7.67，且随庭园结构层次的增加其物种丰富度指数也相应增大。  相似文献   

云南热带亚热带退耕山地中蚂蚁对舞草种子的影响研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

张智英  李玉辉  赵志模 《林业科学》2003,39(5):74-77

舞草为云南热带、亚热带山区刀耕火种轮歇地的一种常见多年生先锋植物。野外调查表明蚂蚁与舞草具有互惠共生关系。在舞草群落地，蚂蚁会将舞草种子搬运到蚁巢。本文研究了刀耕火种过程中蚂蚁对舞草种子的影响，结果表明：地表面的舞草种子火烧5min后，已完全丧失了生活力，而埋在地下5、10cm的种子，经5、30、60、90、120min火烧处理后与对照相比，都显著提高了种子的萌发率。离地表5cm处的种子其萌发率明显高于10cm处的种子，萌发时间则短于10cm处的种子。蚂蚁搬运舞草种子能使其免遭于火烧毁伤，使舞草种群得以恢复与扩散，从而有助于森林植被的演替。这可以视为舞草与蚂蚁的互惠共生。  相似文献   

鲤春病毒(SVCV)糖蛋白基因的原核表达          下载免费PDF全文

吕慧娇  康路路  张萌  闫娜娜  张经纬  高文昌  徐坤  张智英 《家畜生态学报》2018,39(9):12-17

通过将鲤春病毒血症病毒(Spring Viremia of Carp Virus,SVCV)糖蛋白(Glycoprotein,G)基因截短后构建重组表达载体,实现体外高效表达G蛋白,为有关原核诱导蛋白提供参考。以质粒pEGFP-G为模板设计引物,分别扩增G基因的不同片段,与密码子优化后的G基因分别插入pET-32a表达载体,构建重组表达载体pET-32a-GX和pET-32a-OG。经过鉴定后,将重组质粒分别转入大肠杆菌BL21(DE3),通过适宜条件的诱导表达,获得诱导产物并进行SDS-PAGE和Western blotting检测。构建了重组表达载体pET-32a-GX与含密码子优化后G基因的重组表达载体pET-32a-OG;经适宜条件诱导表达了G蛋白后的SDS-PAGE和Western Blotting检测,表明G蛋白成功表达,且含截短片段的重组载体pET-32a-G2的蛋白表达量最高,与原G序列有相同的免疫原性。成功构建截短后的原核表达载体pET-32aGX与密码子优化后的重组表达载体pET-32a-GX,并实现体外大量诱导SVCV的G蛋白。  相似文献   

拉美斑潜蝇在云南的发生与防治   总被引：24，自引：3，他引：24  

蒋小龙  张智英 《植物检疫》1997,11(A00):20-23

  相似文献   

金黄色葡萄球菌烈性噬菌体的分离鉴定和最佳保存方法研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

李陇平  张智英 《中国畜牧兽医》2011,38(6):141-146

基于细菌rRNA区域序列的PCR技术,通过设计特异性引物从奶样中快速、准确地鉴定奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌。采用金黄色葡萄球菌与挤奶前从奶牛乳房上洗刷下来的污水经过3次富集的方法,通过双层琼脂平板法,分离纯化得到了强裂解性的奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌的噬菌体。本试验分离的是可收缩尾的噬菌体,其头部为二十面体,约50 nm×62.5 nm,尾部长约187.5 nm,尾宽约37.5 nm,有尾鞘、基板等结构。纯化后在双层琼脂平板上形成的噬菌斑大而整齐,边缘光滑,透明,直径约2 mm,具有明显的强裂解性噬菌体特性,通过测定,该噬菌体的最佳感染复数为0.01,效价大于10⁹ PFU/mL。对噬菌体的不同保存方法进行比较,结果表明,将噬菌体置于-80 ℃加入7% DMSO冷藏是较好的保存方法。  相似文献   

鸡PLA2基因的克隆与原核表达及PLA2蛋白卵黄抗体的制备     

杨涵江  辛颖  麻丽霞  张智英 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2011,(11)

【目的】克隆并原核表达鸡PLA2基因,小量制备鸡PLA2卵黄抗体,为大规模制备PLA2卵黄抗体作为饲料添加剂提供参考。【方法】提取鸡胰脏总RNA,利用RT-PCR方法获得鸡PLA2基因,将其克隆至pGEX-4T-1原核表达载体中,构建表达载体pGEX-4T-1-PLA2,转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达GST-PLA2融合蛋白。将GST-PLA2融合蛋白免疫青年蛋鸡,每次0.3mg/只,共免疫4次,收集鸡蛋,提取卵黄抗体,采用West-ern Blotting检测抗体的特异性。【结果】成功克隆出了鸡PLA2基因,构建了pGEX-4T-1-PLA2原核表达载体,并诱导表达了分子质量为44.59ku的GST-PLA2融合蛋白。GST-PLA2融合蛋白免疫蛋鸡后获得了卵黄抗体,经West-ern Blotting检查,制备的卵黄抗体具有很好的特异性。【结论】构建了表达鸡PLA2基因的表达系统,并成功的制备了抗鸡PLA2的卵黄抗体。  相似文献   

利用CRISPR/Cas9技术对鸡AMHR2基因进行精确编辑     

黄思嘉  祝梦琦  李鹏程  张智英  魏泽辉 《家畜生态学报》2020,41(6):12-18

为了在鸡基因组上对AMHR2基因进行精确编辑,该研究利用crispr.mit.edu:807网站设计并通过PCR退火拟合获得成对的AMHR2基因靶位点,将靶位点分别整合进pX330-U6-Chimeric_dBsa I-CBh-hSpCas9载体骨架,构建靶向AMHR2基因的成对CRISPR/Cas9敲除载体。将包含成对靶位点的DNA序列整合进pB-CMV-DsRed-CAG-Chimeric.200 bp repeat.Puro-T2A-GFP载体骨架,构建与敲除载体对应的双荧光报告载体。载体测序鉴定正确后分别共转染HEK293T细胞与鸡DF-1细胞,通过细胞荧光粗略判断CRISPR/Cas9系统是否工作。随后,利用Puromycin对基因编辑阳性的DF-1细胞进行药物筛选富集,提取细胞基因组进行TA克隆,进一步检测CRISPR/Cas9系统的工作效率。结果表明靶向鸡AMHR2基因的CRISPR/Cas9敲除系统构建成功,且成对靶位点敲除系统的工作效率高于单一靶位点敲除系统,CRISPR/Cas9敲除系统在DF-1细胞基因组上对AMHR2基因的敲除效率约为60.0%,并在鸡DF-1细胞基因组上实现了AMHR2基因的精确编辑。  相似文献