H5亚型AIV诱导组织细胞凋亡的TUNEL检测     

曹伟胜  罗开健  张桂红  任涛  辛朝安  廖明 《中国兽医杂志》2006,42(8):17-19

细胞凋亡（apoptosis）是指细胞在一定的生理或病理条件下，按照其自身的程序，自已逐渐结束其生命的历程，通常最后细胞脱落离体，或者裂解为若干个凋亡小体而被其他细胞吞噬。随着对细胞凋亡研究和认识的不断深入。检测细胞凋亡的方法也不断更新和多样化。Gavrieli Y等（1992）首先建立的TUNEI。方法，该方法特别适合于组织切片的细胞凋亡原位检测。  相似文献   

H5亚型禽流感病毒分离株对金刚烷胺耐药性的鉴定          下载免费PDF全文

曹伟胜  徐成刚  任涛  罗开健  张桂红  廖明 《华南农业大学学报》2006,27(4):82-85

对1株H5亚型禽流感病毒（AIV）分离株进行了金刚烷胺耐药性的鉴定．应用RT—PCR获得了AIV178株的M基因，序列分析显示M2蛋白有S31N的点突变；动物试验发现该毒株对200mg／L金刚烷胺饮水途径给药仍有抗性．结果表明AIV178分离株具有对金刚烷胺的耐药性，而且M2蛋白的第31位氨基酸突变可能与此有关．  相似文献   

畜禽粪便污染及其治理技术进展   总被引：9，自引：0，他引：9  

何逸民  冯春复  阳燕  何兆祥  张桂红 《广东畜牧兽医科技》2009,34(1):3-5

近年来，随着经济的发展和人们生活水平的提高，畜禽产品需求量不断增加，生产规模不断扩大，我国畜禽养殖模式已经逐渐从散户养殖转向规模化、集约化养殖。随着生产规模的扩大，排放的粪便带来的污染也越严重。虽然动物排泄物在数量上比生活和工业废水及废弃物要少，但其有机物含量高，  相似文献   

Marc-145细胞CD163基因克隆及其真核表达质粒构建     

曹宗喜  焦培荣  林哲敏  于俊勇  吴欣伟  张桂红 《东北农业大学学报》2013,44(6)

猪繁殖与呼吸综合征是危害养猪业重要传染病之一,CD163是猪繁殖与呼吸综合征感染易感细胞受体之一.从Marc-145细胞克隆出CD163基因并测序,再根据得到序列,应用Primer5.0软件设计引物,成功地扩增出带酶切位点CD163 ORF基因,通过Hind Ⅲ和Xho Ⅰ双酶切位点将CD163基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1-myc-His中,获得重组质粒pcDNA3.1-CD163,并将重组质粒pcDNA3.1-CD163在BHK细胞上进行表达鉴定.结果表明,Marc-145细胞CD163蛋白在BHK细胞中得到了表达.这为进一步研究CD163受体在PRRSV感染Marc-145细胞过程中作用以及与其他受体之间相互作用提供试验数据.  相似文献   

Marc-145细胞CD163基因克隆及其真核表达质粒构建     

曹宗喜  焦培荣  林哲敏  于俊勇  吴欣伟  张桂红 《东北农业大学学报》2013,(6):28-31

猪繁殖与呼吸综合征是危害养猪业重要传染病之一,CD163是猪繁殖与呼吸综合征感染易感细胞受体之一。从Marc-145细胞克隆出CD163基因并测序,再根据得到序列,应用Primer5.0软件设计引物,成功地扩增出带酶切位点CD163 ORF基因,通过HindⅢ和XhoⅠ双酶切位点将CD163基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1-myc-His中,获得重组质粒pcDNA3.1-CD163,并将重组质粒pcDNA3.1-CD163在BHK细胞上进行表达鉴定。结果表明,Marc-145细胞CD163蛋白在BHK细胞中得到了表达。这为进一步研究CD163受体在PRRSV感染Marc-145细胞过程中作用以及与其他受体之间相互作用提供试验数据。  相似文献   

PRRSV 的病毒蛋白研究进展     

曹宗喜  师志海  林哲敏  焦培荣  张桂红 《广东农业科学》2013,40(16):134-137

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的病毒性疾病,给世界养猪业造成了极大的威胁.从猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因组、非结构蛋白和结构蛋白3个方面对PRRSV的病毒蛋白研究进展进行综述.  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9蛋白单克隆抗体制备与鉴定     

赵孟孟  张二芹  冯松林  郭依嘉  阮海宇  王文佳  邢星  张桂红 《东北农业大学学报》2016,(7):63-69

根据NSP9非结构蛋白参数选取相应30 bp DNA片段,片段串联后人工合成并连接p ET-28a(+)载体,大肠杆菌BL21中表达得到可溶蛋白,镍柱亲和层析纯化后免疫Balb/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞骨髓瘤细胞融合。细胞融合后利用间接ELISA法杂交瘤细胞阳性克隆筛选,2次亚克隆后共获得3株抗PRRSV NSP9单克隆抗体,命名为3B17、3J13、3F19。这3株单抗可与大肠杆菌表达的蛋白产物和PRRSV感染的Marc-145细胞发生特异性反应。在PRRSV感染的Marc-145细胞中,NSP9蛋白表达水平接毒后不断升高,48 h达最高,为深入研究NSP9功能奠定基础。  相似文献   

广东地区猪链球菌的耐药性特点及四环素耐药基因携带情况   总被引：2，自引：2，他引：0  

黄文明  欧阳昀  张民泽  黄震  谢杰雄  孙龙  张桂红 《中国畜牧兽医》2013,(5):54-58

猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是危害世界养猪业的重要细菌性病原菌之一,本研究旨在了解猪链球菌临床分离株的耐药性特点和四环素耐药基因的携带情况,为临床上该病的防控提供科学依据。本试验采用K-B法和CLSI推荐的肉汤微量稀释法检测猪链球菌广东分离株对18种抗菌药物的耐药性。结果显示,被检菌株对四环素类、磺胺类和氨基糖苷类抗菌药物表现较强的耐药性,尤其对四环素类药物的耐药率高达98.2%;对头孢菌素类药物比较敏感;菌株都耐受6种或6种以上的抗菌药物,其中以6和14重耐药菌株的数量最多,分别占20%和17%。本试验设计了4对引物检测四环素耐药基因携带情况,结果发现56株菌中以携带tetM基因为最多(85.71%)。结果表明tetM很可能是介导广东SS分离株对四环素产生极高耐药率的主要原因之一。  相似文献   

猪戊型肝炎病毒的流行病学调查   总被引：1，自引：1，他引：0  

张亮权  梁焕斌  王衡  高李泽  王德刚  尤佳  张桂红 《中国畜牧兽医》2012,39(8):215-219

利用双抗原夹心ELISA对2009-2011年间采自广东省各地区的若干猪场的484份血清样品,进行血清流行病学调查;对69份病猪胆汁样品进行分子流行病学调查,分离得到猪源戊型肝炎病毒(swine hepatitis E virus, swHEV),并基于ORF2部分基因序列进行核苷酸序列比对、相似性分析和遗传进化树分析,以期初步了解广东各地猪群戊型肝炎(hepatitis E, HE)的感染情况和流行特点。试验结果显示,全部被检查猪的swHEV抗体平均阳性率为71.9%(348/484),分离的猪源HEV毒株均属于基因Ⅳ型,阳性率为71.0%(49/69)。调查结果表明基因Ⅳ型swHEV在广东地区普遍流行。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒FS株Nsp9基因的克隆与序列分析     

赵孟孟  宋中宝  冯松林  王文佳  邢星  冯嘉萍  张桂红 《中国畜牧兽医》2016,43(9):2249-2256

为了对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）Nsp9基因的功能进行预测,利用RT-PCR法从细胞毒中扩增PRRSV FS株的Nsp9基因,并将其克隆至pMD18-T载体上,测序得到Nsp9基因序列,利用多种生物信息学软件分析Nsp9序列生物学信息。结果显示,Nsp9基因全长1 929 bp,目的基因的蛋白分子质量为70.5 ku,pI为7.78,表明该蛋白不稳定;抗原性分析显示,Nsp9基因存在多个抗原位点,柔韧性较好,多处位点的亲水性较强,适合作为单抗制备的表位;同种亚型不同毒株的Nsp9基因氨基酸同源性为96.9%～98.9%,这表明Nsp9基因高度保守,可进一步作为检测靶蛋白用于猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的诊断与疫苗免疫;亚细胞定位预测该基因可能定位于细胞质中,而不是细胞核内;同源建模预测三级结构结果显示,三维结构呈右手型,具有3个亚结构域,没有信号肽。此外,亲本株Nsp9基因与疫苗株Nsp9基因存在多个氨基酸的突变,这些氨基酸的插入与缺失是否与病毒的聚合酶活性和毒力有关还需要进一步试验验证。  相似文献