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91.
牛γ-干扰素在大肠杆菌与毕赤酵母中的表达及抗病毒活性比较** 总被引:2,自引:0,他引:2
用RT-PCR从经ConA刺激的荷斯坦奶牛外周血淋巴细胞总RNA中扩增了BolFN-γ基因,克隆人pGEM T-easy载体测序。再亚克隆其成熟肽基因,分别构建大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET28a/BolFN-γ和毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZα/BolFN-γ前者存Ecoli BL21中经IPTG诱导实现了高效表达,表达蛋白占菌体总蛋白的30%,表达产物以包涵体形式存;后者存P. pastorisGS115中经甲醇诱导实现了高效分泌表达,表达产物直接分泌到培养上清中,表达量约为1.0g/L。分别在CEF/VSV和MDBK/VSV细胞系上对2种表达蛋白的抗病毒活性进行了比较,结果表明,两种重组蛋白在MDBK/VSV抗病毒活性高于在CEF/VSV上的活性,而毕赤酵母表达的蛋白抗病毒活性高于大肠杆表达蛋白,约为前者的2倍。 相似文献
92.
为探索控制沙门氏菌感染的新途径,本试验进行了高效价宽裂解谱噬菌体的分离。首先利用点斑试验和成斑率(EOP)测定法对环境样品进行了沙门氏菌噬菌体的分离纯化及裂解效价和裂解谱的测定,然后对其中1株效价较高、裂解谱较广的噬菌体进行了电镜形态特征观察、最佳感染复数测定、一步生长曲线测定及温度、pH和紫外线敏感性的测定。结果显示,该株噬菌体对不同沙门氏菌的裂解率不同,裂解效价在109~1012 PFU/mL;对检测的32株沙门氏菌菌株的裂解率为59.4%;透射电镜下观察到该噬菌体为头部直径约70 nm、尾部长约140 nm的长尾噬菌体;以鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028为宿主菌测得最佳感染复数为0.01;在宿主菌鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028中的一步生长曲线显示,潜伏期为20 min,暴发期为100 min,暴发量为113 PFU/cell;在40~60 ℃效价稳定在1010 PFU/mL,pH 5.0~13.0效价在106 PFU/mL以上,紫外线照射50 min效价仍有106 PFU/mL。综上可知,该株噬菌体分离株具有效价高、裂解谱宽且对温度、pH、紫外线稳定性良好等特性,符合噬菌体制剂的相关特征,具备作为噬菌体制剂后备菌株开发的潜力。 相似文献
93.
汶上芦花鸡形成的历史悠久,是山东省地方鸡种之一。在二零零二年十月份,被山东省列入优良地方家禽品种重点保护名录。据当地群众反映:“芦花鸡已有几百年历史了。”该品种全身羽毛均为黑白相间、宽窄一致的斑纹.羽毛紧覆全身各部.显得清秀美观;芦花鸡耐粗抗病,适应性好,觅食力强.产卵较多,肉质好,味道鲜美,深受当地群众喜爱。 相似文献
94.
96.
为探究荒漠草原放牧与舍饲对滩羊屠宰性能和肉品质的影响,本研究将39只3月龄滩羊公羔分为荒漠草原放牧组(GZ)、限时放牧4 h补饲组(TG)和舍饲组(SF)3组,测定滩羊的屠宰性能与肉品质指标。结果显示:SF组滩羊的宰前活重、胴体重、屠宰率、净肉率和肉骨比显著优于TG组,TG组滩羊除肉骨比和净肉率外,显著优于GZ组(P<0.05);3种饲养模式滩羊的肉色、pH、剪切力、滴水损失指标差异不显著(P>0.05),但SF组的蒸煮损失显著低于GZ组与TG组(P<0.05);TG组与GZ组滩羊肌肉中的多不饱和脂肪酸C18?3n3,C20?5n3,C22?6n3,C18?2n6,C20?3n6,C20?4n6等含量显著高于SF组(P<0.05),且n-6/n-3脂肪酸比例显著低于SF组(P<0.05)。综上表明,荒漠草原放牧会提高滩羊肌肉中的不饱和脂肪酸含量,但会提高滩羊肌肉的蒸煮损失,降低滩羊的屠宰性能,而限时放牧补饲可以较大程度保留滩羊肌肉脂肪酸组成,同时提高滩羊的屠宰性能。 相似文献
97.
98.
99.
选择6株不同裂解谱的大肠杆菌噬菌体,进行抗体与噬菌体的交叉抑制试验,并经SDS-PAGE电泳分析噬菌体间的抗原差异。结果:原裂解谱相同的噬菌体,主蛋白区域分布相同;原裂解谱部分相同的噬菌体,蛋白条带分布情况相似。具有相同或部分相同裂解谱的噬菌体,在吸附同一株大肠杆菌时所结合的位点并不一定相同;在这6株噬菌体的表面存在着部分相同的表面抗原,同时存在着各自特异的表面抗原。 相似文献
100.
用MTT法观察龙葵生物碱的体外抗肿瘤作用,用TUNEL染色法检测龙葵生物碱对HeLa细胞凋亡的影响,用免疫细胞化学方法研究龙葵生物碱对HeLa细胞PCNA和突变型P53蛋白表达的影响。浓度为100μg/mL~800μg/mL的龙葵生物碱对HeLa细胞的生长均表现出一定的抑制作用;TUNEL染色结果提示400μg/mL的龙葵生物碱处理HeLa细胞48 h后,能够诱导更多的细胞出现凋亡;免疫细胞化学分析结果显示,400μg/mL的龙葵生物碱处理HeLa细胞48 h后,会使HeLa细胞中PCNA蛋白和突变型P53蛋白表达量显著下调。结果表明,龙葵生物碱在体外具显著抗宫颈癌活性,其作用机制是通过诱导更多的细胞出现凋亡而实现的。 相似文献